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一步酶法從頭孢菌素 C( CPC) 生產 7-氨基頭孢烷酸( 7-ACA) 菌株及
催化
工藝
一步酶法從頭孢菌素 c(CPC) 生產 7-氨基頭孢烷酸( 7-ACA) 是繼我們研發的兩步酶法工藝成功應用于工1 成果簡介一步酶法從頭孢菌素 c(CPC) 生產 7-氨基頭孢烷酸( 7-ACA) 是繼我們研發的兩步酶法工藝成功應用于工業生產以后,在生產頭孢菌素類抗生素醫藥中間體技術的又一個突破。與化學法和兩步酶法相比,一步酶法有工藝簡單、環保和轉化率高、產品質量好等優點。該技術采用基因工程技術對 CPC 酰化酶(一步酶法用酶)的基因進行了改造,獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構建的高效啟動子 HP 以及優化組合的調控表達元件,構建并篩選出了能夠高效、高活性表達一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細胞株。這是國內第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達到工業應用水平的技術。由于采用了高效的表達系統和穩定的質粒,以及組成型表達結構,使得該基因工程菌遺傳特性非常穩定,在發酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導劑就可以實現高效、高活性表達。在高效表達 CPC 酰化酶的基礎上,我們通過在表達基因上同時引入的特殊基因序列,使得蛋白的純化和固定化工藝一步進行。通過自己開發研制的可重復使用的固定化載體,可以使得固定化酶活性達到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質,可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶,酶收率在 90 %以上,固定化酶活達到 60U/g 以上。固定化酶可以重復使用 20 批以上,純化和固定化用載體可以重復使用。2 技術指標菌 種:基因工程大腸桿菌,卡那抗性,組成型表達。 發酵溫度: 37℃ 培 養 基:普通的大腸桿菌培養基,主要成分有玉米漿等廉價的營養源。 發酵周期: 20 小時 發酵酶活: 3U/ml 以上( 5 升發酵罐) 特 點:遺傳特性穩定,不需要添加誘導劑和抗生素,工藝簡單。3 合作方式小試技術轉讓或合作進行中試。4 所屬行業領域醫療衛生。業生產以后,在生產頭孢菌素類抗生素醫藥中間體技術的又一個突破。與化學法和兩步酶法相比,一步酶法有工藝簡單、環保和轉化率高、產品質量好等優點。該技術采用基因工程技術對 CPC 酰化酶(一步酶法用酶)的基因進行了改造,獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構建的高效啟動子 HP 以及優化組合的調控表達元件,構建并篩選出了能夠高效、高活性表達一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細胞株。這是國內第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達到工業應用水平的技術。由于采用了高效的表達系統和穩定的質粒,以及組成型表達結構,使得該基因工程菌遺傳特性非常穩定,在發酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導劑就可以實現高效、高活性表達。在高效表達 CPC 酰化酶的基礎上,我們通過在表達基因上同時引入的特殊基因序列,使得蛋白的純化和固定化工藝一步進行。通過自己開發研制的可重復使用的固定化載體,可以使得固定化酶活性達到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質,可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶,酶收率在 90 %以上,固定化酶活達到 60U/g 以上。固定化酶可以重復使用 20 批以上,純化和固定化用載體可以重復使用。
清華大學
2021-04-13
一步酶法從頭孢菌素C(CPC)生產7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)菌株及
催化
工藝
一步酶法從頭孢菌素c( CPC) 生產7-氨基頭孢烷酸(7-ACA) 是繼我們研發的兩步酶法工藝成功應用于工業生產以后,在生產頭孢菌素類抗生素醫藥中間體技術的又一個突破。與化學法和兩步酶法相比,一步酶法有工藝簡單、環保和轉化率高、產品質量好等優點。該技術采用基因工程技術對 CPC 酰化酶(一步酶法用酶)的基因進行了改造,獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構建的高效啟動子 HP 以及優化組合的調控表達元件,構建并篩選出了能夠高效、高活性表達一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細胞株。這是國內第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達到工業應用水平的技術。由于采用了高效的表達系統和穩定的質粒,以及組成型表達結構,使得該基因工程菌遺傳特性非常穩定,在發酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導劑就可以實現高效、高活性表達。在高效表達 CPC 酰化酶的基礎上,我們通過在表達基因上同時引入的特殊基因序列,使得蛋白的純化和固定化工藝一步進行。通過自己開發研制的可重復使用的固定化載體,可以使得固定化酶活性達到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質,可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶,酶收率在 90 %以上,固定化酶活達到 60U/g 以上。固定化酶可以重復使用 20 批以上,純化和固定化用載體可以重復使用。
清華大學
2021-04-13
一種綠色
催化
合成N-(苯基亞氨基)吲唑-1-硫代酰胺類化合物的方法
(專利號:ZL 201410066913.3) 簡介:本發明公開了一種綠色催化合成N-(苯基亞氨基)吲唑-1-硫代酰胺類化合物的方法,屬于有機合成技術領域。該合成反應中芳香醛、雙硫腙與5,5-二甲基-1,3-環己二酮的摩爾比為1:1:1,多磺酸基布朗斯特酸性離子液體催化劑的摩爾量是所用芳香醛的20~50%,反應溫度為80~100℃,反應時間為25~60min,反應后冰水冷卻,抽濾,濾渣經硅膠色譜柱分離得到純N-(苯基亞氨基)吲唑-1-硫代
安徽工業大學
2021-01-12
一種綠色
催化
制備14-芳基-14H-二苯并[a,j]氧雜蒽類衍生物的方法
(專利號:ZL 201410351149.4) 簡介:本發明公開了一種綠色制備14-芳基-14H-二苯并[a,j]氧雜蒽類衍生物的方法,屬于化學材料制備技術領域。該制備反應中芳香醛與2-萘酚的摩爾比為1:2,催化劑的摩爾量是所用芳香醛的3~5%,反應溫度為110℃,反應時間為10~30min,反應結束后加入水冷卻,有大量固體析出,碾碎固體,靜置,抽濾,所得濾渣水洗、干燥后用95%乙醇水溶液重結晶,真空干燥后得到純14-芳基-14H-二苯并
安徽工業大學
2021-01-12
InP基多量子阱光調制器/開關、可調式多模干涉耦合器、諧振腔濾波器、2×
4
分路器技術
基于平面光波光路(PLC)技術的各類光功能器件,是實現現代高速光網絡、高速光信號處理、大容量光互連節點和終端設備中光信號處理模塊的基礎。/lineInP基多量子阱PLC器件基于成熟的半導體工藝,以脊波導為基礎,具有體積小、功耗/損耗低、可靠性高、性價比高等優點,在國際上即將形成新的產業熱點。電子科學與工程學院光子學與光通信研究室順應這一趨勢,潛心攻關,埋頭研究,歷時四年完成了InP多量子阱PLC單元器件理論與實驗研究。在國內首次建立了PLC光路設計和光學特性測試平臺,探索出國產化工藝加工途徑,取得多項自主知識產權,成功地研制出InP基多量子阱PLC無源光子器件。包括光調制器/開關、可調式多模干涉耦合器、諧振腔濾波器、2×4分路器等,于2007年2月通過了教育部組織并主持的科技成果鑒定,達到國際先進水平。
東南大學
2021-04-10
布蘭斯特酸
催化
烯烴的不對稱胺氫化反應:合成含季碳中心的吡咯烷類化合物
在非活化烯烴官能團化方面的研究進展:含α-季碳中心的手性胺是許多有生物活性化合物和重要藥物的結構單元,該結構單元的不對稱合成一直以來是充滿挑戰性的課題:需要克服季碳中心的空間位阻和控制與之相連的四個取代基的正確方向。劉心元、譚斌課題組利用質子酸(布蘭斯特酸)催化非活化烯烴的不對稱胺氫化反應,合成了含季碳中心的α-吡咯烷類化合物。此項研究成果在國際上首次實現了通過不對稱胺氫化反應構建含有季碳中心的含N雜環化合物,該工作通過在底物中引入硫脲基團,該基團在手性磷酸(布蘭斯特酸)催化下可活化非活化烯烴和控制手性的季碳中心的形成。該方反應具有操作簡單,產率高,官能團耐受性好,綠色環保(非金屬催化的)等優點,可以很方便轉化為各種具有潛在生物活性的螺環的含季碳中心的α-吡咯烷類化合物。
南方科技大學
2021-04-13
酶
催化
的原子轉移自由基聚合(ATRPase)和金屬配位交聯方法成功制備出納米人工多酶凝膠體系
常見的納米酶大多數是金屬化合物納米顆粒,其催化活性主要是來自在納米顆粒表面的金屬離子。在自然界中,生物酶的特征表明活性位點和支持、穩定活性位點的網絡環境對于高催化效率同樣重要。通過調整活性位點的成分和環境可以實現高的活性和選擇性。水凝膠是一類具有良好生物相容性的三維親水網絡材料,其結構可以有效地保護酶分子活性中心,同時提供更好的底物遷移微環境,從而實現有效的催化作用,載酶水凝膠材料已成為生物學研究中的熱點。納米凝膠為水凝膠的納米粒子,具有類似于宏觀水凝膠材料的親水網絡及類似流體的傳輸特性,其納米的尺寸可以作為進一步體內生物應用的理想載體。在受限的納米空間中實現修飾或組裝以獲得雜化納米凝膠仍然存在挑戰。應對這一挑戰,同濟大學化學科學與工程學院王啟剛團隊從仿生的角度出發,設計了一種酶催化的原子轉移自由基聚合(ATRPase)和金屬配位交聯方法成功制備出納米人工多酶凝膠體系。該體系具有模擬超氧化物歧化酶(SOD-like)和過氧化物酶(POD-like)特性,可以實現腫瘤微環境級聯催化的響應成像。日前,相關研究成果以“Multienzyme‐Mimic Nanogels Synthesized by Biocatalytic ATRP and Metal Coordination for Bioresponsive Fluorescence Imaging”為題,發表在國際著名學術期刊 Angewandte Chemie International Edition (《德國應用化學》) 上。同濟大學化學科學與工程學院為該文的唯一通訊作者單位,碩士生齊美園為第一作者,王霞副教授和王啟剛教授為共同通訊作者。 圖1.(a)人工多酶凝膠體系的ATRPase及配位交聯制備流程(b)模擬SOD和POD級聯酶催化的腫瘤微環境響應的熒光成像機制。研究人員首先在納米粒子表面修飾酶催化的原子轉移自由基聚合的引發劑(-Br),以具有良好生物相容性的生物酶為催化劑,修飾有雙鍵的賴氨酸(N-acryloyl-L-lysine)為聚合單體,在納米粒子周圍聚合制備得到聚賴氨酸高分子刷,最后通過亞鐵配位交聯,從而構建出具有多酶活性的人工多酶凝膠體系(如圖1所示)。凝膠體系中高分散的Fe離子一方面作為凝膠網絡的交聯劑,同時作為模擬酶的活性中心。通過模擬SOD和POD酶,先將腫瘤部位高水平的O 2 ?? 催化轉化為H 2 O 2 ,進一步基于腫瘤部位提升的H 2 O 2 通過級聯酶催化反應實現腫瘤微環境響應的安全、高效的腫瘤成像。該人工多酶凝膠體系類似自然的過氧化物酶催化機制不產生羥基自由基,具有低毒性和高生物安全性。同時,ATRPase方法和金屬配位交聯技術可進一步實現多種納米材料體系的制備,用于藥物輸送和其他生物醫學應用。該研究成果得到了國家自然科學基金、國家重點研發計劃等經費支持以及中國科學院強磁場科學中心的技術支持。王啟剛教授團隊多年來一直致力于高分子凝膠固定酶技術及其生物診療應用,近5年累計以通訊作者在 Adv.Mater. , Nat. Commun. , Angew. Chem. Inter. Ed. 等期刊發表SCI論文50多篇。文獻鏈接:https://www.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/anie.202002331 PDF:anie_202002331.pdf課題組網站:https://qgwang.tongji.edu.cn/
同濟大學
2021-04-11
4
分鐘內能檢測到新冠病毒核酸!復旦大學魏大程團隊研發新型檢測方法,未來即測即走或將成為可能
復旦大學高分子科學系魏大程團隊研發出一種新型檢測方法,只需4分鐘,核酸檢測就能出結果。未來核酸檢測,即測即走或將成為可能。
復旦大學
2022-02-17
(2S,3S,
4
R,9E)-2-[(2、-R)- 2-羥基-二十九碳酰胺]-十八碳-1,3,4-三醇
本發明公開了一種源于東洋參的新化合物(2S,3S,4R,9E) 2 [(2′R) 2′ 羥基 二十九碳酰胺] 十八碳 1,3,4 三醇,其結構式為該化合物對膽固醇酰基轉移酶具有選擇性抑制的作用,能夠有效用于預防和治療血脂、動脈粥樣硬化、冠心病等疾病,具有良好的研究開發和應用前景;該化合物的制備方法步驟少及操作簡便,得到的化合物天然無毒性。
青島大學
2021-04-13
技術需求:工業級SLA打印機二極管泵浦固體激光Nd:YVO
4
波長的控制研發控制程序的編程研發
工業級SLA打印機二極管泵浦固體激光Nd:YVO4波長的控制研發控制程序的編程研發
臨沂拓普三維科技有限公司
2021-08-24
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