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成果與項目的背景及主要用途： 菌糠是指以棉籽殼、木屑、稻草、玉米芯、甘蔗渣及多種農(nóng)作物秸稈、工業(yè) 廢料（如酒糟、醋糟、造紙廠廢液及制藥廠黃漿廢液等）為主要原料栽培食用菌 后的廢棄培養(yǎng)基。菌糠主要含有物質(zhì)是纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、抗營養(yǎng)因子 和少量的蛋白質(zhì)，這些原料作為培養(yǎng)基栽培食用菌后，通過食用菌菌體的生物固 氮作用、酶解作用等一系列生物轉(zhuǎn)化過程，粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量均比不經(jīng)過食 用菌發(fā)酵前提高二倍以上，纖維素、半纖維素、木質(zhì)素等均已被不同程度的降解， 其中粗纖維素降低了 50%以上，木質(zhì)素降低 30%以上，棉酚降低 60%以上，同 時還產(chǎn)生了多種糖類、有機酸類和生物活性物質(zhì)。據(jù)報道，我國菌糠年產(chǎn)量在 200 萬噸以上大部分當作廢料而被浪費掉，給環(huán)境造成了很大的污染，一些菌糠 可以被用作畜禽飼料，并且用廢棄菌糠來改良土壤可以做到廢物利用、改善環(huán)境， 實現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。 我國土壤絕大部分嚴重缺磷、缺鉀，化學肥料中的磷元素和鉀元素在施肥后 很快被固化，不再能夠被植物使用。解磷菌、解鉀菌及固氮菌是生物益生菌肥中 的主要菌株，使用這些土壤益生菌可以提高土壤中植物可利用氮磷鉀的利用率。 如果能夠利用廢棄菌糠大規(guī)模培養(yǎng)這三種菌，制備成為生物菌肥，將會極大的增 211天津大學科技成果選編 加菌糠做為肥料的優(yōu)勢。本項目利用菌糠培養(yǎng)解磷菌、解鉀菌、固氮菌，制備成 為生物菌肥，預(yù)期產(chǎn)生極大的經(jīng)濟效益和社會效益。 技術(shù)原理與工藝流程簡介： 本項目擬利用處理后的廢棄菌糠殘渣培養(yǎng)酵母、解磷菌、解鉀菌、固氮菌， 優(yōu)化發(fā)酵條件，提高菌體量，獲得制備微生物菌肥的最佳工藝路線。 天津大學從農(nóng)業(yè)廢棄物堆肥中篩選出 7 株解磷能力較強的菌株，其中菌株 FL7 表現(xiàn)出較好的解磷效果，F(xiàn)L7 解磷量為 436.63mg/L。該菌株已經(jīng)于 2010 年 7 月 13 日在中國微生物菌種保藏中心進行保藏（保藏號：CGMCC NO.4008）。 本課題組還從農(nóng)業(yè)廢棄物堆肥中篩選得到解鉀菌 K3、固氮菌 N1。解鉀菌 K3 解 鉀量達 4.10mg/L、固氮菌 N1 固氮量為 1.81×10—2mol/L。 另外，天津大學已經(jīng)建立了以菌糠為基質(zhì)培養(yǎng)解磷、解鉀、固氮菌的發(fā)酵條 件，經(jīng)過發(fā)酵條件優(yōu)化，制備的菌肥中三種菌的含量達到 48.62×108CFU/g，其 中解磷菌 2.4×108cfu/g，解鉀菌 25.22×108cfu/g，固氮菌 21×108cfu/g，均遠高于 國標。 應(yīng)用領(lǐng)域：生物、農(nóng)業(yè)領(lǐng)域 合作方式及條件：具體面議

有很高的食用和藥用價值，是我國傳統(tǒng)的藥用真菌之一。其鮮嫩醇香，肉 質(zhì)細嫩、潔白如玉、口感獨特、生熟皆可食、食藥兩用、營養(yǎng)豐富。雞樅菌中 含有麥角甾醇類物質(zhì)及治療糖尿病的有效成份，對降低血糖有明顯效果。并有 抑制人體癌細胞生長的作用。 

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產(chǎn)品詳細介紹1、材料：主體采用1.5mm冷軋鋼板、其它部分采用1.2mm冷軋鋼板精裝冷軋鋼板、一次折彎焊接而成,外型美觀、大方。同時具有防火牢固的優(yōu)點。扶手及臺面選用了高檔木制材料、進一步提升了使用者的舒適性。 2、表面處理：經(jīng)酸洗、磷化防腐防銹后靜電噴塑，正常使用塑面經(jīng)久耐用。3、整體造型設(shè)計以人為本，顯示器可以任意調(diào)整，以便達到最佳視角。邊角圓弧過渡，工藝精湛高貴大方。4、鍵盤和講臺臺面合二為一、有效提升了講臺的使用空間。確保能同時兼容分體、一體中央控制器。內(nèi)部配置底盒、可以放置書本，粉筆，粉擦等。5、安全防盜；鎖好講桌后、桌外無任何可拆卸鑼釘；桌面是一個整體的平板、方便做一般講臺使用。可升級安裝隱藏接線模塊（含：HIMA、VGA、AUDIO一個、USB、LAN、電源接口一個、話筒接口等)（選配）。6、一把鎖控制（使用和維護各只用一把鎖），老師上課使用方便、免于開啟多把鎖；預(yù)留安裝IC卡電磁鎖接口、方便升級聯(lián)網(wǎng)和遠程控制。7、講桌配隱藏式滑軌抽拉抽屜，可容納鍵盤、鼠標等。8、終端、中控裝置、實物展示臺、電腦主機、液晶顯示器、鍵盤鼠標、  功放、筆記本電腦等。桌體采用開合式小柜門設(shè)計，不必打開桌子柜門，便可方便使用電腦光驅(qū)、開關(guān)主機。9、適應(yīng)范圍廣泛：大中專院校、中小學校的多媒體教室、階梯教室、普通教室、會議室、演播廳、以及各種培訓教室、報告廳等。10、外型尺寸: 1100×700×960 mm

本發(fā)明的目的在于提供了一種裝載具有干擾素誘導(dǎo)活性的聚肌胞苷酸，并加入殼寡糖作為佐劑的鴨疫里默氏菌菌影疫苗。該方案首先構(gòu)建溫控表達載體，電轉(zhuǎn)化入鴨疫里默氏菌原生質(zhì)體，篩選陽性克隆后28℃增菌培養(yǎng)，然后42℃誘導(dǎo)裂解基因的表達，待OD600不再降低時，加入聚賴氨酸繼續(xù)作用以充分裂解活菌，然后離心分離菌體。將干燥菌體與6mg/mL的聚肌胞溶液等比例混合，使聚肌胞包埋進入菌影內(nèi)，然后加入2%殼寡糖水溶液攪拌形成均一的混合物，分裝于西林瓶，冷凍干燥，即得到鴨疫里默氏菌新型菌影疫苗。本發(fā)明所制備的菌影疫苗經(jīng)飲水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激發(fā)體液免疫，對機體的保護效果與注射免疫無明顯差異。

CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因編輯工具酶，在科研領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，而在臨床方面的應(yīng)用因為其脫靶活性一度停滯不前。它通過guide RNA（gRNA）與靶向DNA序列的配對，從而將Cas9錨定在靶向基因并誘導(dǎo)產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂（DSB）。在基因編輯誘發(fā)的DSB的修復(fù)過程中，一定幾率會產(chǎn)生基因突變或者外源DNA片段的插入，從而達到基因編輯的目的。在實際應(yīng)用過程中，一個好的基因編輯酶Cas9需要同時滿足高效切割靶位點、低脫靶活性和低染色體異常三個特點。目前在這三個方面，有一部分基于PCR的方法用于估算基因編輯效率，但其結(jié)果可靠性有待提高；有一些基于高通量測序的方法可以在體內(nèi)或者體外檢測基因編輯酶的脫靶活性；尚無系統(tǒng)的可定量的測量基因組異常結(jié)構(gòu)的方法。本項目開發(fā)了一種新的方法，可以用來同時定量檢測Cas9編輯效率和脫靶活性以及編輯引起的染色體異常結(jié)構(gòu)，即primer-extension-mediated sequencing（PEM-seq）。這是對基因編輯和DNA損傷修復(fù)等領(lǐng)域都有巨大促進作用的新技術(shù)。與此同時，該項目包括了該團隊利用PEM-seq篩選出的一個相比于現(xiàn)有Cas9變體具有更低脫靶活性且與野生型Cas9切割效率相當?shù)腃as9變體further enhanced Cas9 (FeCas9)。

本發(fā)明公開了一對特異識別綿羊KRT25基因的多肽及其編碼基因和應(yīng)用。該多肽由多肽甲和多肽乙組成；所述多肽甲由16個TAL核酸識別單元組成，每個TAL核酸識別單元中具有一個雙連氨基酸；所述多肽乙由15個TAL核酸識別單元組成，每個TAL核酸識別單元中具有一個雙連氨基酸。本發(fā)明可實現(xiàn)在細胞或個體水平上對綿羊KRT25基因進行敲除或修飾，以解析綿羊KRT25基因的功能、構(gòu)建綿羊KRT25基因突變庫或獲得相關(guān)疾病模型,為綿羊育種及醫(yī)藥研發(fā)服務(wù)。

鹽脅迫直接影響植物的生長，我國現(xiàn)有約9913萬公頃的鹽堿土地，占全國可用耕地面積近四分之一，無法進行大規(guī)模農(nóng)作物種植。植物耐鹽堿促生菌可以通過調(diào)節(jié)土壤pH值，促進植物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，調(diào)節(jié)植物激素，調(diào)節(jié)植物耐受氧化和滲透脅迫的能力等，幫助植物抵抗鹽堿脅迫在逆境下生長增產(chǎn)。 對于耐鹽堿促生菌Bacillus subtilis N51和Bacillus cereus T146，實驗室現(xiàn)通過連續(xù)發(fā)酵，優(yōu)化發(fā)酵工藝以及噴霧干燥工藝，制備孢子形成率達70%以上、干粉菌劑活菌數(shù)目達1010/g的菌劑。 對于菌株Kocuria sp. LA1T6、Bacillus sp. LA1T8和Pseudomonas sp.T44，實驗室現(xiàn)進行多糖包衣制劑的開發(fā)，研制高穩(wěn)定性、成膜性、安全性和緩釋性的包衣制劑。