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重組大腸桿菌生產磷脂酶D及轉酯化產品開發
磷脂酶D（PLD, EC 3.1.4.4）是一類廣泛存在于各種生物體的酶，具有水解作用和磷酰基轉移作用（見圖1）。作為一種酶制劑，PLD的轉磷脂酰活性尤為重要，被用于制備具有生物活性的稀有磷脂。其中，以大豆磷脂酰膽堿（PC）為底物，PLD酶法制備磷脂酰絲氨酸（PS），受到廣泛關注。PS作為腦健康營養補充劑，相繼被美國FDA、日本HBM和中國國家衛生計生委所認證，列為新資源食品。相較于提取自牛腦和植物的PS，生物酶法制備的PS，避免了食品安全和植物源含量低的問題。進一步，一些新的結構和功能磷脂，通過P
廈門大學
2021-01-12
基于固定化酶生產低分子量肝素的新工藝
低分子量肝素(LMWH)是臨床上最主要的天然抗凝劑，目前主要是通過動物來源的肝素進行酶降解制得。歐洲藥典要求 LMWH 的分子量為 6000~8000，質量控制是生產 LMWH 的重要環節。而肝素酶的活性和利用率直接影響 LMWH 生產成本和產業經濟。 本項目組利用融合肝素酶 I (Hep I)與甲殼素之間的親和作用，實現酶的循環利用，同時融合酶活性和穩定性提高。利用綠色溶劑體系制備形態完好、尺寸均一的甲殼素微球。用固定化酶制備的 LMWH 產品達到歐洲藥典要求，實現了分子量可控，生產過程可實時監測。該項目將對 LMWH 產業的綠色和經濟生產提供技術支持。目前已發表 SCI 論文 2 篇，并與相關企業開展了合作。
江南大學
2021-04-13
一種具有增強的抑菌效果的噬菌體裂解酶
本發明將裂解酶Bp7e氨基酸的第99位亮氨酸和102位蛋氨酸分別進行突變為丙氨酸和谷氨酸，經原核表達技術得到了突變體蛋白并經Western-blot對其進行了鑒定，命名為Bp7c突變體蛋白。對Bp7e和Bp7e突變體蛋白進行了純化及濃度測定，通過體外裂解實驗及裂解譜檢測得知，純化的Bp7e和Bp7e突變體兩種蛋白具有廣譜的抑菌作用，對溶壁微球菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和多種血清型大腸桿菌均有裂解效果，且Bp7e突變體裂解效果整體優于天然裂解酶Bp7e。
青島農業大學
2021-04-13
自然界中首例 [6+4] 環加成反應的酶
鑒定首個高階環加成酶，拓展了環加成酶的認知
一、項目分類
重大科學前沿創新
二、成果簡介
南京大學化學化工學院梁勇教授，生命科學學院譚仁祥教授和戈惠明教授的科研團隊，發現了抗幽門螺旋桿菌的潛在藥物-漢城霉素并對其生物合成途徑進行深入研究。通過多菌株基因組序列比對，對漢城霉素類生物合成基因簇進行了鑒定，利用微生物學，分子生物學、底物化學衍生化、體外酶促反應等手段從該基因簇中鑒定出一個新穎、可催化高階環加成反應的酶。團隊基于蛋白質晶體數據，量子化學計算和蛋白質定點突變技術，對該酶促動力學過程進行了深入解析，最終確定該酶通過“雙過渡態”來同時催化產生6+4和4+2環加成產物。該特殊高階環加成酶的發現，解答了“自然界中是否存在酶催化的高階環加成反應”，這一持續五十余年的謎題。這類酶的發現將進一步拓展人們對周環反應酶的認識，啟發科學家們將來利用和改造周環反應酶來實現有價值的分子轉化。
成果于2019年4月以Letter形式發表于Nature。F1000評述該研究“鑒定首個高階環加成酶，拓展了環加成酶的認知”，諾貝獎得主霍夫曼評述“這是在酶促反應中直接觀察到的[6+4]環加成產物的首個例子……，該研究對酶促高階環加成研究具有深遠影響”。
南京大學
2022-08-12
高性能角蛋白酶的高效表達與應用研究
角蛋白酶是一種特異性蛋白酶類，可降解結構復雜、硬質難溶的角蛋白，具有多種優良的催化特性，在生物加工、綠色制藥、廢棄生物質處理、生物制革、生態紡織、洗滌劑等實際應用中備受關注，被認為是有著巨大應用潛力和市場前景的新一代蛋白酶類。 本項目從角蛋白酶基因挖掘、高效表達、性能改造及其應用研究等方面開展了一系列工作。課題組目前建立了角蛋白酶資源庫，是我國擁有角蛋白酶基因資源產權最多和最具多樣性來源的單位；實現了角蛋白酶基因在大腸桿菌及枯草芽孢桿菌等外源宿主中的克隆及高效表達；在 5L 罐上發酵酶活最高可達10000 U/mL 以上，是目前文獻報道的重組角蛋白酶表達最高水平；項目已完成了 1M3 規模中試試驗，成本降低 30%以上。在應用方面，本項目成功將角蛋白酶用于生物法制備納米銀粒子 AgNPs，與傳統化學法相比，酶法合成的納米銀具有更好的抑菌活性。另外，項目組已首次開發出無膠原活力的高特異性角蛋白酶，具有高角蛋白活力，不會對皮革膠原造成破壞，能保護膠原結構完整性，可開發出不傷及皮膚真皮的洗滌劑產品、藥品及化妝品，在生物制革領域也具有極大應用價值，可緩解制革工業中的爛皮現象；同時本研究所開發的角蛋白酶在活性多肽制備中也表現出良好的應用前景。
江南大學
2021-04-13
菲律賓刺參硫酸軟骨素多糖及其提取方法和用途
本發明公開了一種菲律賓刺參硫酸軟骨素多糖,其結構式如下:主鏈為硫酸軟骨素E結構,同時帶有硫酸巖藻糖構成的支鏈,該支鏈通過糖苷鍵連接在主鏈的β-D-葡萄糖醛酸上,且硫酸基的取代方式為75%3,4-O-SO4,20%2,4-O-SO4以及5%4-O-SO4。本發明還同時公開了上述菲律賓刺參硫酸軟骨素多糖的提取方法。該多糖具有抗凝血或者抗血栓的作用。
浙江大學
2021-04-11
一種提取干擾信號自動復位數據采集系統的電路
本實用新型涉及一種提取干擾信號自動復位數據采集系統的電路，該電路主要包括穩壓電源、參考電壓為4.5V的電池、運放單元、非門、與非門、觸發器、微處理器、AD轉換電路、采集數據傳感器電路及電子模擬開關電路；該電路工作時，電阻R1、R2、R3、R4、R5、R6；電容C1、C2、C3；比較器03和04組成干擾信號提取電路；析出電源輸入端的干擾信號；通過與非門和RS觸發器，輸出復位控制信號，控制微處理器和傳感器電路在干擾信號期間同步復位，使09模塊TS5A3166在干擾信號出現期間切斷模塊12的電源。該復位電路連接簡便，易于理解，當穩壓電路輸出端出現干擾信號時，電路提取這個干擾信號控制微處理器和傳感器電路同步復位，避免對后續電路的影響，有效提高了系統的可靠性。
江蘇師范大學
2021-04-11
一種基于灰點提取的自動白平衡矯正方法
本發明公開一種基于灰點提取的自動白平衡矯正方法，包括以 下步驟：S1 通過黑電平矯正圖像傳感器采集的 RAW 數據，去除直流 偏移成分；S2 利用灰點選取標準對經 S1 獲得的圖像數據進行處理， 檢測其中是否存在灰點；S3 當識別出灰點時，通過均值計算法計算其 RGB 三通道的增益，然后跳轉到步驟 S7；S4 當沒有識別出灰點時， 通過圖像熵判斷顏色復雜度，去除圖像中大色塊；S5 通過灰度陰影法 求出經 S4 處理后圖像 RGB 三通道顏色亮度的閔可夫斯基范數；S6 根 據 S5 得出閔可夫斯基范數計算圖像 RGB 三通道的增益；S7 將計算的 RGB 三通道的增益輸入白平衡矯正模塊完成白平衡矯正，本發明將灰 點選取標準應用于經典白平衡算法中，減少了失效情況。
華中科技大學
2021-04-11
從發酵液中提取林可霉素的新萃取劑和工藝開發
一、項目簡介林可霉素是一種非β內酰胺類抗生素，對厭氧菌、金黃色葡萄球菌和許多鏈球菌有顯著的抑殺作用，臨床上多用于骨髓炎的治療；以林可霉素為原料藥開發的克林霉素等抗生素臨床上應用更為廣泛，可用于治療敗血癥、呼吸系統感染、皮膚軟組織感染、尿路感染等多種疾病。因此林可霉素仍是一種有效的高效廣譜抗生素。目前國內生產廠家都是采用的萃取方法提取林可霉素，所用的萃取劑是正丁醇或混合醇，多級逆流萃取，操作溫度為50-55℃，其工藝在此溫度下，有機溶劑水溶性大，溶劑揮發度高，因此大量的有機溶劑進入提取的發酵廢液和揮發到空氣中損失掉，不僅造成萃取劑的大量損耗，大幅度提高生產成本，而且嚴重污染環境。本項目開發一種新型混合萃取劑和相對應的生產工藝，使得萃取劑水溶性低，揮發度小，且可以在45℃以下甚至在室溫下操作，一級萃取率可以達到90％以上。而正丁醇一級萃取率僅為85％，混合醇一級萃取率更低，因此本項目不僅大幅度降低生產成本，而且顯著改善生產環境。本項目已經完成實驗室階段研究，進一步完善后進行中試，然后可直接應用于從微生物發酵液中提取林可霉素的工業化生產。二、應用范圍本項目適合應用于大中型制藥廠生產林可霉素，利用原有設備即可。三、合作方式面議。
河北工業大學
2021-04-13
一種基于深度信息提取的多聚焦圖像融合方法
本發明屬于圖像處理技術領域，涉及一種基于深度信息提取的多聚焦圖像融合方法，廣泛應用于目 標識別，顯微成像，軍事作戰，機器視覺等領域。本發明首先利用各向異性熱擴散理論建模多聚焦圖像 的成像過程，獲取原始的多聚焦圖像的深度信息，根據圖像信息確定聚焦區域，得到多聚焦圖像融合模 板，最后根據平滑的多層次融合模板圖進行多聚焦圖像的融合。本方法不僅能夠有效的提高融合圖像的 質量，并且具有良好的實用性和廣泛的適用性。
武漢大學
2021-04-13