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川菜是我匡八大菜系之一 ， 深受廣大人民的喜愛(ài)。然而， 盡管市場(chǎng)上也出現(xiàn)了一些作坊式生產(chǎn)的川菜，但這些川菜既不能保證菜肴風(fēng)味品質(zhì)的一致性，又不能保證食品安全， 同時(shí)也不能節(jié)約成本， 而且也無(wú)法滿足人們對(duì)川菜的需求

項(xiàng)目背景：山東是全國(guó)最重要的家兔主產(chǎn)區(qū)，兔肉產(chǎn)量 約占全國(guó)的 1/4，兔肉出口量占全國(guó) 90%以上。肉兔健康養(yǎng) 殖中飼料營(yíng)養(yǎng)是主要環(huán)節(jié)，飼料成本占養(yǎng)殖成本的 70%左右。 肉質(zhì)安全是生產(chǎn)關(guān)鍵因素，目前，我國(guó)仍面臨生產(chǎn)用藥不規(guī) 范、疾病防控技術(shù)落后、安全高效營(yíng)養(yǎng)技術(shù)相對(duì)碎片化、集 成不夠等問(wèn)題。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部相繼出臺(tái)了《國(guó)家遏制細(xì)菌耐藥 行動(dòng)計(jì)劃（2016-2020 年）》和《全國(guó)遏制動(dòng)物源細(xì)菌耐藥行 動(dòng)計(jì)劃（2017-2020 年）》，在國(guó)內(nèi)全面實(shí)施藥物飼料添加劑 退出計(jì)劃。目前此計(jì)劃已在全國(guó)實(shí)施，但行業(yè)內(nèi)至今還未研 發(fā)出能真正替代抗生素的高效安全低成本的飼料產(chǎn)品，國(guó)內(nèi) 所有肉兔養(yǎng)殖場(chǎng)都在面臨著這一嚴(yán)峻考驗(yàn)。基于此，開(kāi)展無(wú) 抗飼料關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)、組裝及產(chǎn)業(yè)化勢(shì)在必行。 所需技術(shù)需求簡(jiǎn)要描述：1.替抗飼料添加劑功效及組方 研發(fā)。通過(guò)對(duì)中藥提取物成分和功能分析，及優(yōu)選能夠刺激 動(dòng)物免疫力的功能微生物等研究，研制系列替代藥物飼料添 加劑的肉兔無(wú)抗高效飼料添加劑。2.無(wú)抗全價(jià)顆粒飼料的研 發(fā)。根據(jù)營(yíng)養(yǎng)需要量、飼料原料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及研制的肉兔無(wú)抗 飼料添加劑，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的飼料配方、生產(chǎn)針對(duì)不同生理 狀況的低成本全價(jià)配合飼料產(chǎn)品并產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。通過(guò)以上技 術(shù)研發(fā)，達(dá)到調(diào)節(jié)肉兔體內(nèi)菌群、提高飼料轉(zhuǎn)化率、預(yù)防疾病發(fā)生、減少抗生素使用等目的。   對(duì)技術(shù)提供方的要求:在肉兔無(wú)抗飼料領(lǐng)域擁有一定的 研發(fā)基礎(chǔ)，相關(guān)研究成果處于國(guó)內(nèi)頂尖水平。 

我國(guó)是豬肉生產(chǎn)、消費(fèi)大國(guó)，平均年產(chǎn)量高達(dá) 0.6 億噸，占世界總產(chǎn)量的 50% 以上。豬血作為生豬屠宰的副產(chǎn)物之一，年產(chǎn)量也高達(dá)幾百萬(wàn)噸，豬血蛋白含量 高，素有“液態(tài)肉”之稱，是寶貴的食物資源。生豬屠宰后會(huì)產(chǎn)生大量豬血、豬 骨、豬油等副產(chǎn)物，但目前開(kāi)發(fā)利用率較低，不僅造成了資源浪費(fèi)，而且污染了 環(huán)境。 目前，肉味調(diào)味食品主要以畜禽肉為原料，雖風(fēng)味醇厚，成本過(guò)高。利用價(jià) 格低廉的禽畜血制備肉味香精的研究鮮有報(bào)道。該技術(shù)利用生豬屠宰下游產(chǎn)品豬 血、豬骨及豬油為原料，進(jìn)行精深加工，降低血腥味，開(kāi)發(fā)肉味濃郁的天然功能 性核心調(diào)味基料。 該產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于方便食品調(diào)料包、湯包、火腿腸、罐頭等多種產(chǎn)品。 南通金旺農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)有限公司是江蘇省南通市農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化市級(jí)龍頭企業(yè)，主要 從事生豬收購(gòu)與屠宰。每日屠宰產(chǎn)生大量豬血、豬骨等，具有豐富的原料資源。本技術(shù)項(xiàng)目的實(shí)施是提升調(diào)味食品安全和品質(zhì)的重大突破，可提高生豬屠宰 副產(chǎn)品的附加值，提升我國(guó)食品企業(yè)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力和出口創(chuàng)匯能力。 技術(shù)水平： 該技術(shù)水平居國(guó)際先進(jìn)水平。 關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)與參數(shù)：原料預(yù)處理（豬血、豬骨、豬板油）→生物控制酶解 技術(shù)（酶的篩選、最佳底物濃度、酶添加量、適宜的酶解時(shí)間）→美拉德反應(yīng)調(diào) 控技術(shù)（三種主要熱反應(yīng)底物的最適配比、外源氨基酸與糖類的選擇與配比、適 宜熱反應(yīng)溫度、時(shí)間、體系 pH）→真空濃縮、配料→天然調(diào)味核心基料。 

主要研究了食源性致病菌（以腸炎沙門氏菌和單增李斯特菌為主，此外還有大腸桿菌 O157:H7 和空腸彎曲桿菌）生長(zhǎng)和致死預(yù)測(cè)微生物模型研究。研究涉及：預(yù)測(cè)微生物模型，致病菌檢測(cè)與控制，微生物脅迫抗性等內(nèi)容。系統(tǒng)研究了在模擬的儲(chǔ)藏溫度和熱處理方式下兩種致病菌在模擬食品基質(zhì)系統(tǒng)和真實(shí)食品中的生長(zhǎng)，熱致死、損傷和修復(fù)動(dòng)態(tài)變化情況。研究結(jié)果表明兩種致病菌在液體、固體的模擬系統(tǒng)中以及真實(shí)的食品中呈現(xiàn)不同的熱殺死動(dòng)態(tài)學(xué)曲線。基于模擬系統(tǒng)建立的生長(zhǎng)和熱致死模型并不能很好的應(yīng)用于預(yù)測(cè)肉及肉制品中致病菌的真實(shí)狀態(tài)。此外

研發(fā)階段/n可用于豬胴體性狀的遺傳改良，在豬的遺傳改良中胴體性狀的測(cè)定需要進(jìn)行屠宰測(cè)定，只有背膘厚度性狀可在達(dá)到目標(biāo)體重時(shí)進(jìn)行活體測(cè)定，利用這3項(xiàng)專利，可以進(jìn)行胴體性狀的改良（不需要進(jìn)行屠宰測(cè)定），降低背膘厚度，降低板油率和內(nèi)脂率，提高瘦肉率和腿臀肉骨率。

帕金森病是一種是老年人群中常見(jiàn)的慢性、進(jìn)行性、運(yùn)動(dòng)障礙性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。帕金森病主要是由于大腦中缺乏多巴胺引起的．左旋多巴(Levodopa，L-dopa)為目前治療帕金森病的主要藥物．多巴胺不能夠通過(guò)血腦屏障到達(dá)大腦治療帕金森病，而 L-dopa 能夠通過(guò)血腦屏障，到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，并在體內(nèi)脫羧酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟桶罚瑥亩委熍两鹕。Ｒ?jiàn)的治療帕金森病的藥物多為 L-dopa 及其與其他藥物的復(fù)合物，如美多芭、息寧等。在全球 500 強(qiáng)暢銷藥物市場(chǎng)中，抗帕金森治療市場(chǎng)超過(guò) 20 億美元。 來(lái)源于大腸桿菌的 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶（ p-hydroxyphenylacetate3-hydroxylase ，PHAH) 具有較寬的底物范圍，可以將 L-酪氨酸轉(zhuǎn)化為 L-dopa，反應(yīng)單向進(jìn)行，產(chǎn)物均為 L 型，且該酶不會(huì)進(jìn)一步氧化 L-dopa。但由于 L-酪氨酸并不是 PHAH 的最適底物，該方法催化生成 L-dopa 反應(yīng)速率慢，到目前文獻(xiàn)報(bào)道的最高產(chǎn)率為 12.5g/L，并不能實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用。 前期本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)對(duì)大腸桿菌芳香族氨基酸代謝途徑進(jìn)行改造，已獲得從葡萄糖發(fā)酵生成 L-酪氨酸高產(chǎn)大腸桿菌菌株，發(fā)酵水平僅次于美國(guó)麻省理工學(xué)院與美國(guó)杜邦合作文獻(xiàn)報(bào)道的 L-酪氨酸發(fā)酵水平.本課題對(duì) 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶進(jìn)行突變改造，獲得了一催化反應(yīng)速度大幅提升的突變體。在 L-酪氨酸的代謝途徑的基礎(chǔ)上，含 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶突變體的大腸桿菌培養(yǎng) 38 小時(shí)轉(zhuǎn)化生成左旋多巴產(chǎn)率即可達(dá) 50g/L 以上，且培養(yǎng)發(fā)酵簡(jiǎn)單易行為世界上首個(gè)采用此法可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)應(yīng)用的左旋多巴生產(chǎn)路線。目前左旋多巴市場(chǎng)價(jià)格約為50 萬(wàn)/噸，此法生產(chǎn)成本遠(yuǎn)低于左旋多巴市場(chǎng)價(jià)格。

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)紅肉蘋(píng)果花青苷降低豬卵巢顆粒細(xì)胞內(nèi)活性氧的方法。按如下步驟操作：用丙酮浸提出紅肉蘋(píng)果中的花青苷，抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至丙酮除盡，剩余液體用濾膜過(guò)濾后，4℃保存?zhèn)溆茫惑w外培養(yǎng)豬卵巢顆粒細(xì)胞；用不同體積分?jǐn)?shù)的紅肉蘋(píng)果花青苷和活性氧陽(yáng)性對(duì)照試劑Rosup刺激豬卵巢顆粒細(xì)胞F1代6小時(shí)；給細(xì)胞裝載熒光探針DCFH?DA，收集細(xì)胞后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。本發(fā)明方法原理可靠，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果顯示，紅肉蘋(píng)果花青苷能降低細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平，且隨著濃度的增加效果越明顯。

帕金森病是一種是老年人群中常見(jiàn)的慢性、進(jìn)行性、運(yùn)動(dòng)障礙性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。帕金森病主要是由于大腦中缺乏多巴胺引起的．左旋多巴(Levodopa，L-dopa)為目前治療帕金森病的主要藥物．多巴胺不能夠通過(guò)血腦屏障到達(dá)大腦治療帕金森病，而 L-dopa 能夠通過(guò)血腦屏障，到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，并在體內(nèi)脫羧酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟桶罚瑥亩委熍两鹕。Ｒ?jiàn)的治療帕金森病的藥物多為 L-dopa 及其與其他藥物的復(fù)合物，如美多芭、息寧等。在全球 500 強(qiáng)暢銷藥物市場(chǎng)中，抗帕金森治療市場(chǎng)超過(guò) 20 億美元。來(lái)源于大腸桿菌的 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶（ p-hydroxyphenylacetate3-hydroxylase ，PHAH) 具有較寬的底物范圍，可以將 L-酪氨酸轉(zhuǎn)化為 L-dopa，反應(yīng)單向進(jìn)行，產(chǎn)物均為 L 型，且該酶不會(huì)進(jìn)一步氧化 L-dopa。但由于 L-酪氨酸并不是 PHAH 的最適底物，該方法催化生成 L-dopa 反應(yīng)速率慢，到目前文獻(xiàn)報(bào)道的最高產(chǎn)率為 12.5g/L，并不能實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用。前期本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)對(duì)大腸桿菌芳香族氨基酸代謝途徑進(jìn)行改造，已獲得從葡萄糖發(fā)酵生成 L-酪氨酸高產(chǎn)大腸桿菌菌株，發(fā)酵水平僅次于美國(guó)麻省理工學(xué)院與美國(guó)杜邦合作文獻(xiàn)報(bào)道的 L-酪氨酸發(fā)酵水平.本課題對(duì) 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶進(jìn)行突變改造，獲得了一催化反應(yīng)速度大幅提升的突變體。在 L-酪氨酸的代謝途徑的基礎(chǔ)上，含 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶突變體的大腸桿菌培養(yǎng) 38 小時(shí)轉(zhuǎn)化生成左旋多巴產(chǎn)率即可達(dá) 50g/L 以上，且培養(yǎng)發(fā)酵簡(jiǎn)單易行為世界上首個(gè)采用此法可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)應(yīng)用的左旋多巴生產(chǎn)路線。目前左旋多巴市場(chǎng)價(jià)格約為50 萬(wàn)/噸，此法生產(chǎn)成本遠(yuǎn)低于左旋多巴市場(chǎng)價(jià)格。