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本發(fā)明涉及一種復(fù)合菌即糞鏈球菌與啤酒酵母液體共生培養(yǎng)的方法。采用的技術(shù)方案是：培養(yǎng)基配方中蛋白胨28‰，葡萄糖12‰，酵母粉10‰，按體積比1 : 1投加糞鏈球菌和酵母菌，初始pH 為7，振蕩轉(zhuǎn)速為180r/min，培養(yǎng)時(shí)間20h后混合菌量達(dá)到最大值。本發(fā)明成本低、作用效果穩(wěn)定、提高復(fù)合菌的數(shù)量，增強(qiáng)糞鏈球菌和酵母菌復(fù)合菌劑的作用效果。

成果簡(jiǎn)介： 本項(xiàng)目在高純度RNA的綠色制造的核心關(guān)鍵技術(shù)上取得重大進(jìn)展，產(chǎn)品質(zhì)量明顯優(yōu)于OMTEK等國(guó)際公司；在核苷酸的高效制造的核心關(guān)鍵技術(shù)上取得重大突破，成本明顯低于YAMASA等國(guó)際公司，建成了國(guó)際上規(guī)模最大的、技術(shù)最先進(jìn)的酵母-核酸-核苷酸的生物制造生產(chǎn)線并實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)高端應(yīng)用；共申請(qǐng)專(zhuān)利20項(xiàng)，授權(quán)發(fā)明專(zhuān)利11項(xiàng)。

項(xiàng)目在高純度RNA的綠色制造的核心關(guān)鍵技術(shù)上取得重大進(jìn)展，產(chǎn)品質(zhì)量明顯優(yōu)于國(guó)際同類(lèi)產(chǎn)品；在核苷酸高效制造的核心關(guān)鍵技術(shù)上取得重大突破，成本明顯低于國(guó)際同類(lèi)產(chǎn)品，建成了國(guó)際上規(guī)模最大的、技術(shù)最先進(jìn)的酵母-核酸-核苷酸的生物制造生產(chǎn)線并實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)高端應(yīng)用。項(xiàng)目通過(guò)中國(guó)、美國(guó)、瑞士等國(guó)內(nèi)外權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證，大量進(jìn)入歐美等國(guó)際知名公司，為嬰幼兒配方奶粉往母乳化發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。申請(qǐng)專(zhuān)利20項(xiàng)，授權(quán)發(fā)明專(zhuān)利11項(xiàng)，部分授權(quán)專(zhuān)利如下：1、一株高產(chǎn)核

項(xiàng)目簡(jiǎn)介 采用一種酵母降酸與超高壓加工技術(shù)相結(jié)合制備黑莓酒的方法。精選優(yōu)良黑莓品種 進(jìn)行低溫發(fā)酵，熱浸提果渣中的單寧色素，選用低溫酸性果膠酶與高效降酸酵母進(jìn)行同 步酶解發(fā)酵與同時(shí)發(fā)酵降酸，接入0.01～0.02%漿果專(zhuān)用低溫酸性果膠酶和0.025～0.03% 的降酸酵母，其中所述的降酸酵母為啤酒酵母或者果酒酵母發(fā)酵溫度控制在 20～25℃， 當(dāng)殘?zhí)墙档?4g/L 以下時(shí)，過(guò)濾、除渣，得原酒；根據(jù)最終產(chǎn)品要求對(duì)原酒進(jìn)行成分調(diào)整；209 調(diào)配后的黑莓酒在常

紅酵母是單細(xì)胞真核生物，因其含有蝦青素等高抗氧化生命活性物質(zhì)，能夠使三文魚(yú)等養(yǎng)殖動(dòng)物的肉色鮮紅而具有非常重要和廣泛的應(yīng)用前景與價(jià)值。 應(yīng)用領(lǐng)域： 直接作為飼料添加劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖、畜禽養(yǎng)殖。 可以作為提取提純蝦青素等主要生命活性物質(zhì)的原料，在化妝品、醫(yī)藥和食品添加劑方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

研發(fā)有效的內(nèi)毒素 LPS 脫毒方法具有重要意義，本項(xiàng)目一方面通過(guò) KDO 定量方法檢測(cè)對(duì) LPS 分子的吸附能力，從發(fā)酵食品中篩選到 LPS 吸附能力最強(qiáng)酵母菌株 CSW。證實(shí) LPS 與 Y. lipolytica 細(xì)胞共存一段時(shí)間后，會(huì)產(chǎn)生 LPS 含量降低的現(xiàn)象。通過(guò) 18s r DNA 分析，菌株 CSW1 與 1.0 mg/m L 來(lái)源于 E. coil O111:B4的 LPS 共存后，可使 LPS 水平降低約 70%，而 S. cerevisiae BY4742 僅使 LPS含量近 30%。 另外一方面，過(guò)敲除大腸桿菌 E. coli 染色體基因上與 LPS 合成相關(guān)基因，構(gòu)建了多株能夠直接合成新型特殊結(jié)構(gòu) Kdo2-lipid A 的突變菌株，具有低內(nèi)毒素，適合用于大腸桿菌表達(dá)宿主生產(chǎn)各種蛋白及氨基酸。 關(guān)鍵技術(shù) 脂多糖 LPS 是存在于大多數(shù)革蘭氏陰性菌外膜的主要組成部分，可通過(guò)激活宿主細(xì)胞內(nèi) TLR4 受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等，促進(jìn)炎性細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，進(jìn)而引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，造成疾病或者死亡，在食品和藥品中是重要的毒力因子，因此研發(fā)有效的 LPS 脫毒方法具有重要意義。本成果獲得了食品級(jí)的 LPS 脫毒菌株，具有應(yīng)用前景。工業(yè)發(fā)酵中大腸桿菌野生型菌株中內(nèi)毒素釋放，是導(dǎo)致熱原污染的重要原因，這增加了分離純化成本，本成果從源頭改造獲得低毒性的大腸桿菌平臺(tái)菌株，避免了發(fā)酵工程中熱原產(chǎn)生

本發(fā)明屬于植物病害生物防治技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株防治藍(lán)莓等果蔬采后病害的淺黃隱球酵母HMQAUSZ01的分離篩選、發(fā)酵以及生防活性測(cè)定，屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域。其保藏編號(hào)為CGMCC No.11984。本發(fā)明還公開(kāi)了利用該菌株制備的微生物菌劑，及其在藍(lán)莓等果蔬采后病害上的應(yīng)用。本發(fā)明為防治藍(lán)莓等果蔬采后病害提供了一株高效的微生物，本發(fā)明的淺黃隱球酵母（Cryptococcus flavescens）菌株HMQAUSZ01對(duì)藍(lán)莓等果蔬采后病害有較強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)作用；其次，本發(fā)明的淺黃隱球酵母（Cryptococcus flavescens）菌株HMQAUSZ01在藍(lán)莓、葡萄、櫻桃、蘋(píng)果、番茄等果蔬采后病害離體果實(shí)試驗(yàn)有較好的防效；此外，本發(fā)明微生物菌劑對(duì)人、畜安全，屬于環(huán)境友好型，具有良好的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用前景。

近日，我校生物工程學(xué)院蔡孟浩課題組在畢赤酵母合成生物系統(tǒng)方面取得重要進(jìn)展，通過(guò)設(shè)計(jì)靈活可控的新型人工轉(zhuǎn)錄器件庫(kù)，實(shí)現(xiàn)了天然藥物合成途徑的精細(xì)表達(dá)控制，相關(guān)成果以“Yeast transcriptional device libraries enable precise synthesis of value-added chemicals from methanol”為題，在線發(fā)表于Nucleic Acids Research（《核酸研究》IF=19.610）。

帕金森病是一種是老年人群中常見(jiàn)的慢性、進(jìn)行性、運(yùn)動(dòng)障礙性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。帕金森病主要是由于大腦中缺乏多巴胺引起的．左旋多巴(Levodopa，L-dopa)為目前治療帕金森病的主要藥物．多巴胺不能夠通過(guò)血腦屏障到達(dá)大腦治療帕金森病，而 L-dopa 能夠通過(guò)血腦屏障，到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，并在體內(nèi)脫羧酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟桶罚瑥亩委熍两鹕。Ｒ?jiàn)的治療帕金森病的藥物多為 L-dopa 及其與其他藥物的復(fù)合物，如美多芭、息寧等。在全球 500 強(qiáng)暢銷(xiāo)藥物市場(chǎng)中，抗帕金森治療市場(chǎng)超過(guò) 20 億美元。來(lái)源于大腸桿菌的 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶（ p-hydroxyphenylacetate3-hydroxylase ，PHAH) 具有較寬的底物范圍，可以將 L-酪氨酸轉(zhuǎn)化為 L-dopa，反應(yīng)單向進(jìn)行，產(chǎn)物均為 L 型，且該酶不會(huì)進(jìn)一步氧化 L-dopa。但由于 L-酪氨酸并不是 PHAH 的最適底物，該方法催化生成 L-dopa 反應(yīng)速率慢，到目前文獻(xiàn)報(bào)道的最高產(chǎn)率為 12.5g/L，并不能實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用。前期本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)對(duì)大腸桿菌芳香族氨基酸代謝途徑進(jìn)行改造，已獲得從葡萄糖發(fā)酵生成 L-酪氨酸高產(chǎn)大腸桿菌菌株，發(fā)酵水平僅次于美國(guó)麻省理工學(xué)院與美國(guó)杜邦合作文獻(xiàn)報(bào)道的 L-酪氨酸發(fā)酵水平.本課題對(duì) 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶進(jìn)行突變改造，獲得了一催化反應(yīng)速度大幅提升的突變體。在 L-酪氨酸的代謝途徑的基礎(chǔ)上，含 4-羥基苯乙酸-3-羥化酶突變體的大腸桿菌培養(yǎng) 38 小時(shí)轉(zhuǎn)化生成左旋多巴產(chǎn)率即可達(dá) 50g/L 以上，且培養(yǎng)發(fā)酵簡(jiǎn)單易行為世界上首個(gè)采用此法可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)應(yīng)用的左旋多巴生產(chǎn)路線。目前左旋多巴市場(chǎng)價(jià)格約為50 萬(wàn)/噸，此法生產(chǎn)成本遠(yuǎn)低于左旋多巴市場(chǎng)價(jià)格。

本發(fā)明（小試階段）采用的技術(shù)方案是：將野生型釀酒酵母細(xì)胞內(nèi)的分子伴侶SSA1基因編碼的第483位亮氨酸突變?yōu)樯彼幔玫交蛲蛔冃蚐SA1-YS1酵母細(xì)胞；然后經(jīng)SSA1-YS1酵母細(xì)胞的活化；初始OD值的調(diào)試；制備篩選待測(cè)藥物檢測(cè)溶液；從第一天起，隔天提取適量SSA1-YS1酵母細(xì)胞懸液稀釋后平板涂布；置于24℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，再轉(zhuǎn)入4℃冰箱中培養(yǎng)7天，觀察SSA1-YS1酵母細(xì)胞的顏色。 將野生型釀酒酵母細(xì)胞內(nèi)的分子伴侶SSA1基因編碼的第483位亮氨酸突變?yōu)樯彼幔玫交蛲蛔冃蚐SA1-YS1酵母細(xì)胞；然后經(jīng)SSA1-YS1酵母細(xì)胞的活化；初始OD值的調(diào)試；制備篩選待測(cè)藥物檢測(cè)溶液；從第一天起，隔天提取適量SSA1-YS1酵母細(xì)胞懸液稀釋后平板涂布；置于24℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，再轉(zhuǎn)入4℃冰箱中培養(yǎng)7天，觀察SSA1-YS1酵母細(xì)胞的顏色。