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首先選取了序列特征各異的12條富含RGG的多肽片段，利用SPR技術(shù)評價多肽片段對G-四鏈體的結(jié)合能力。再結(jié)合filter-binding、NMR等研究手段，發(fā)現(xiàn)并證實了含有7個RGG重復(fù)單元的多肽12能選擇性識別G-四鏈體結(jié)構(gòu)，其識別位點為G-四鏈體的四分體平面。利用序列突變和序列重排等方式，作者證實多肽12對G-四鏈體的特異識別存在明顯的序列特異性，這種特異性同時表現(xiàn)在氨基酸的類型以及其特定的排布順序上。基于上述結(jié)果，作者對含有該RGG多肽序列的蛋白進行數(shù)據(jù)庫搜索，發(fā)現(xiàn)了cold-inducible RNA-binding protein（CIRBP），并通過一系列實驗證實該蛋白能在細(xì)胞內(nèi)外有效識別G-四鏈體。值得注意的是，該RGG肽段在CIRBP識別G-四鏈體的過程中起關(guān)鍵作用，突變或缺失都會導(dǎo)致蛋白識別G-四鏈體的能力顯著下降。該研究首次通過RGG多肽序列與G-四鏈體相互作用的系統(tǒng)研究，發(fā)現(xiàn)了全新的G-四鏈體結(jié)合蛋白，并為將來發(fā)現(xiàn)更多的G-四鏈體結(jié)合蛋白提供了一種新途徑。

神經(jīng)遞質(zhì)作為神經(jīng)元與神經(jīng)元及神經(jīng)元與細(xì)胞之間溝通的媒介分子，介導(dǎo)了發(fā)育、信息感知，運動及大腦的高級認(rèn)知功能。隨著生化分離純化技術(shù)的發(fā)展以及人們對大腦精細(xì)結(jié)構(gòu)的進一步了解，現(xiàn)如今已發(fā)現(xiàn)有幾十種重要的神經(jīng)遞質(zhì)。而神經(jīng)系統(tǒng)在時間和空間上的高度復(fù)雜性對研究特定神經(jīng)遞質(zhì)的動態(tài)變化及其功能提出了極大的挑戰(zhàn)。本項目成功構(gòu)建了一系列新型的基因編碼的神經(jīng)遞質(zhì)熒光探針，可實現(xiàn)對特定神經(jīng)遞質(zhì)動態(tài)變化的靈敏檢測。該類熒光探針利用大多數(shù)已知的神經(jīng)遞質(zhì)所對應(yīng)的特異性G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）與循環(huán)重排的熒光蛋白（cpGFP）融合，利用循環(huán)重排熒光蛋白的熒光強度變化來指示GPCR的激活，進而反應(yīng)外源神經(jīng)遞質(zhì)的濃度變化（圖一）。我們命名該類熒光探針為GRAB探針，即為GPCR Activation Based Sensor的縮寫。

一、 項目簡介基于Web GIS/3G的設(shè)備遠(yuǎn)程監(jiān)測系統(tǒng)是一個基于3G無線網(wǎng)絡(luò)及Google地圖的實時監(jiān)測系統(tǒng)，主要針對那些分布廣泛或數(shù)據(jù)不易采集的設(shè)備進行實時在線監(jiān)測，當(dāng)設(shè)備數(shù)據(jù)異常時，GIS地圖迅速定位到異常地并有報警提示聲音，同時以短信或電話方式通知設(shè)備關(guān)聯(lián)人員前去現(xiàn)場查看確認(rèn)。二、 項目技術(shù)成熟程度該項目技術(shù)成熟，目前已在天津市消防系統(tǒng)試運行。三、 技術(shù)指標(biāo)（包括鑒定、知識產(chǎn)權(quán)專利、獲獎等情況）正在申請軟件著作權(quán)。四、 市場前景（應(yīng)用領(lǐng)域、市場分析等）  本項目的研發(fā)成功能解決目前各中小企業(yè)中設(shè)備運行情況難以監(jiān)測，設(shè)備故障維修不及時等問題，也有利于提高各企業(yè)的生產(chǎn)效率。可見本項目有著廣闊的應(yīng)用前景和極大的市場空間。五、 規(guī)模與投資需求（資金需求、場地規(guī)模、人員等需求）本系統(tǒng)售價5萬（包括培訓(xùn)），加上所需服務(wù)器、數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)軟件、數(shù)據(jù)采集發(fā)送器、語音通訊設(shè)備、指紋錄入設(shè)備。總投資預(yù)計20萬。六、 效益分析本系統(tǒng)主要針對那些現(xiàn)場設(shè)備分布廣泛或數(shù)據(jù)不易采集的場合,能夠及時地監(jiān)視設(shè)備的運行狀態(tài)并進行有效控制，大大設(shè)備的工作效率，防止設(shè)備出現(xiàn)故障不能及時維修而導(dǎo)致其他問題的發(fā)生。具有良好的經(jīng)濟效益和社會效益。七、 合作方式  技術(shù)服務(wù)、協(xié)作開發(fā)、提供咨詢，具體事宜面議。八、 項目具體聯(lián)系人及聯(lián)系方式（包括電子郵箱）顧軍華，022-60435758，[email protected]九、高清成果圖片2-3張

G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）家族是最大的一類膜蛋白家族受體，在視覺，嗅覺，味覺以及激素和神經(jīng)遞質(zhì)等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮著重要的生理功能，同時也是關(guān)鍵的藥物靶標(biāo)。近年來，隨著越來越多GPCR在失活和激活狀態(tài)下的晶體及電鏡結(jié)構(gòu)的解析，人們對于這一大類受體的激活機制有了愈發(fā)深入的了解。然而，GPCR受體的失活和激活結(jié)構(gòu)僅代表了信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程起始和終止時相對穩(wěn)定的構(gòu)象狀態(tài)，受體在激活過程中發(fā)生了復(fù)雜多樣的動態(tài)構(gòu)象變化，這些變化很可能與不同配體引起的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)多樣性相關(guān)。目前，GPCR在激活過程中的動態(tài)構(gòu)象變化仍不清楚，國際上這方面的研究尚處于起步階段。液體核磁共振方法能夠在原子分辨率水平研究蛋白質(zhì)相互作用和構(gòu)象變化，提供晶體或電鏡結(jié)構(gòu)缺失的信息，是GPCR動態(tài)結(jié)構(gòu)與激活機制研究中不可缺少的重要研究手段。 M2毒蕈堿型乙酰膽堿受體（M2R）是一個典型的GPCR，在調(diào)節(jié)人體心率和許多中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能中發(fā)揮重要作用，是研究GPCR 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、調(diào)節(jié)以及藥物設(shè)計的模式受體。該項研究通過在M2R中引入13CH3-ε-甲硫氨酸同位素標(biāo)記探針，檢測受體在結(jié)合一系列配體小分子時的核磁圖譜變化（圖一），分析M2R動態(tài)構(gòu)象變化與這些配體對G蛋白激活和抑制蛋白 （arrestin）招募效應(yīng)差異的相關(guān)性。同時，結(jié)合分子動力學(xué)模擬實驗進一步解釋不同配體結(jié)合導(dǎo)致受體激活時構(gòu)象和功能變化差異的分子機制。該項研究首次將M2R的配體結(jié)構(gòu)、受體構(gòu)象變化以及配體功能多樣性聯(lián)系起來，揭示了M2R信號轉(zhuǎn)導(dǎo)多樣性可能的分子機制，并為針對這類重要受體的藥物研發(fā)提供了理論指導(dǎo)。

3D電子心理沙盤 （一）、軟件功能1、3D場景：①提供10個不同樣式的沙箱場景，根據(jù)沙盤主題進行自由選擇，包含草原、沙漠、湖畔、雪地等，沙箱場景與實際沙盤高度逼真。②場景編輯功能：在場景中，可以升降地面，調(diào)節(jié)水位高度，改變天氣狀態(tài)，比如晴天、多云、陰天、日出、日落、黃昏、黑天。提供60個地表畫刷，可以對地面進行背景替換和填充。2、3D沙具①10類沙具，包括人物類，動物類，植物類，建筑物類，景觀類，交通運輸類……，其他種類。總計不少于1500個3D沙具。②任一沙具不僅可以進行拖動、旋轉(zhuǎn)、移動，還可以刪除，同時系統(tǒng)自動記錄沙具編號、名稱、位置。某些動物類沙具可以設(shè)置為動態(tài)，如甩尾、踏步、抬頭、眨眼等微動作；沙漠或草原可以有明顯的刮風(fēng)、下雨天氣。③自定義沙具屬性：管理員可以自定義沙具屬性，支持沙具的左右、上下、大小、發(fā)轉(zhuǎn)等操作，該屬性能夠為沙具意義分析報告提供參考根據(jù)。 3、可外接硬件：具有支持眼動儀的接口。支持眼動追蹤功能：系統(tǒng)預(yù)留外接眼動儀接口，一旦鏈接眼動儀即可實時記錄游戲者沙盤制作過程中眼動注視情況，回放時可以與沙盤畫面同步呈現(xiàn)，給老師提供眼動信息作為咨詢參考依據(jù)。對于心理沙盤游戲過程中的眼動與心理分析及研究提供客觀性數(shù)據(jù)支持。【眼動儀非標(biāo)配】 4、沙盤環(huán)境操作與設(shè)置①通過地形編輯器（地形刷）對場景地形進行上升（凸起造山）、下降（洼陷造湖）、平坦（回填復(fù)原）等創(chuàng)造性制作場景，也可以通過控件進行地表切換（變色、草地沙地雪地等地形變換、調(diào)整明亮度），進行地形填充與批量化場景創(chuàng)設(shè)。②多種天氣切換：晴天、多云、陰天、日出、日落、黃昏、黑天等天氣與時間設(shè)置控件，將選擇后的場景更加豐富多彩。③水面設(shè)置具有調(diào)整水位高低、風(fēng)吹波浪、水面渾濁、風(fēng)向角度等4個功能，讓場景中的水面更具生氣。④根據(jù)不同來訪者自己的愛好與心理偏向，提供40多種場地顏色切換功能。 5、加載功能。將一次沙盤制作分為若干次，每次均在上次基礎(chǔ)上進行沙盤制作，適合多次連續(xù)咨詢。6、回放功能。系統(tǒng)提供實時回放，將沙盤制作過程重新呈現(xiàn)，可以作為學(xué)習(xí)資料進行存檔留存。 7、報告功能。 ①自動出具心理沙盤分析報告，報告內(nèi)容分為基本信息、來訪者評價、作品截圖、移動/擺放列表、沙具使用數(shù)量統(tǒng)計圖、沙具意義分析、沙具布局熱點圖、不同象限眼動注視分布圖(加載眼動儀則呈現(xiàn)，不加載不呈現(xiàn))、整體分析記錄表等信息。沙盤組織者可以對其中的內(nèi)容進行編輯。②沙盤報告是根據(jù)內(nèi)部沙具意像智能化出具，是千人千面的智能動態(tài)化（非套用靜態(tài)模板）。

本發(fā)明涉及一種新型的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細(xì)胞水平篩選系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應(yīng)用。所述篩選系統(tǒng)由HEK293細(xì)胞或CHO細(xì)胞構(gòu)建，含有來自以下序列中不同組間基因序列構(gòu)建的2種融合表達(dá)載體：第1組：(1)DnaE基因的C端與報告基因的C端的拼接序列：DnaE-C-Report-C，(2)DnaE基因的N端與報告基因的N端的拼接序列：Report-N-DnaE-N；第2組：①GPCR基因，②β-arrestin基因。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：應(yīng)用本發(fā)明篩選系統(tǒng)進行G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細(xì)胞水平篩選，靈敏度高、特異性強，操作簡單、快速，檢測范圍廣，對任何靶細(xì)胞型中任何GPCR或GPCR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激動劑、拮抗劑都可以篩選。

一種杜仲eu-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA分子包括：編碼具有杜仲eu-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第170-1952位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第170-1952位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高杜仲中次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，次生代謝產(chǎn)物具有雙向調(diào)節(jié)人體血壓的作用，并可降低人體膽固醇含量，預(yù)防心腦血管硬化等功能。對于保護人民的健康生長有所幫助。

一種樂昌含笑Mc-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA分子包括：編碼具有樂昌含笑Mc-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第56-1726位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第56-1726 位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高樂昌含笑中次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，次生代謝產(chǎn)物具有雙向調(diào)節(jié)人體血壓的作用，并可降低人體膽固醇含量，預(yù)防心腦血管硬化等功能。對于保護人民的健康生長有所幫助。

一種南京椴tm-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA 分子包括：編碼具有南京椴tm-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第131-1888位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第131-1888位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高南京椴中萜類化合物次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，且可以開拓新蛋白資源，對于保護人民的健康生長將有所幫助，同時對我國的農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥的研究和發(fā)展具有重要的意義。