代謝改造釀酒酵母高效生產(chǎn)葡萄糖二酸
葡萄糖二酸是一種重要的化合物,在醫(yī)療和工業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用。目前生產(chǎn)葡萄糖二酸的方法主要以化學(xué)法-葡萄糖化學(xué)氧化法為主,但該方法具有選擇性低、成本高、得率低、要高溫及產(chǎn)生大量氧化反應(yīng)副產(chǎn)物不利于后續(xù)葡萄糖二酸的分離等局限性。目前生物法合成葡萄糖二酸主要是在大腸桿菌中進(jìn)行的,但在大腸桿菌中異源合成葡萄糖二酸被許多因素限制。釀酒酵母因具有耐酸能力強(qiáng)、耐低溫、可低 pH 發(fā)酵、沒(méi)有噬菌體感染、適合大規(guī)模發(fā)酵、易分離和高抗逆性等特點(diǎn),已被廣泛用于產(chǎn)有機(jī)酸的研究,因此釀酒酵母比大腸桿菌更適合葡萄糖二酸的生產(chǎn)并具有更高的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。利用釀酒酵母合成葡糖二酸具有很好的應(yīng)用前景。 創(chuàng)新要點(diǎn) 1) 以釀酒酵母 BY4741 為出發(fā)菌株,將擬南芥的肌醇加氧酶 MIOX4 和丁香假單胞菌的 UDH 基因在 delta 重復(fù)序位點(diǎn)高效表達(dá),敲除轉(zhuǎn)錄抑制因子OPI1 獲得工程菌 Bga-3,該菌株在分批補(bǔ)料發(fā)酵條件下能夠產(chǎn) 6 g/L 的葡萄糖二酸,為目前報(bào)道的最高值; 2) 通過(guò)提高工程菌的轉(zhuǎn)運(yùn)胞外肌醇的能力和工程菌自身合成肌醇的能力,解決提高葡萄糖二酸產(chǎn)量的關(guān)鍵問(wèn)題; 3) 進(jìn)一步協(xié)調(diào)肌醇用于細(xì)胞自身代謝活動(dòng)和葡萄糖二酸合成之間的分配關(guān)系,并通過(guò)提高葡萄糖二酸合成途徑效率和發(fā)酵優(yōu)化,提高肌醇利用率和葡萄糖二酸合成的產(chǎn)量。
江南大學(xué)
2021-04-11