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評(píng)估基因編輯工具
酶
的新方法以及高保真的新基因編輯
酶
CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因編輯工具酶,在科研領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,而在臨床方面的應(yīng)用因?yàn)槠涿摪谢钚砸欢韧磺啊Kㄟ^(guò)guide RNA(gRNA)與靶向DNA序列的配對(duì),從而將Cas9錨定在靶向基因并誘導(dǎo)產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂(DSB)。在基因編輯誘發(fā)的DSB的修復(fù)過(guò)程中,一定幾率會(huì)產(chǎn)生基因突變或者外源DNA片段的插入,從而達(dá)到基因編輯的目的。在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中,一個(gè)好的基因編輯酶Cas9需要同時(shí)滿足高效切割靶位點(diǎn)、低脫靶活性和低染色體異常三個(gè)特點(diǎn)。目前在這三個(gè)方面,有一部分基于PCR的方法用于估算基因編輯效率,但其結(jié)果可靠性有待提高;有一些基于高通量測(cè)序的方法可以在體內(nèi)或者體外檢測(cè)基因編輯酶的脫靶活性;尚無(wú)系統(tǒng)的可定量的測(cè)量基因組異常結(jié)構(gòu)的方法。本項(xiàng)目開(kāi)發(fā)了一種新的方法,可以用來(lái)同時(shí)定量檢測(cè)Cas9編輯效率和脫靶活性以及編輯引起的染色體異常結(jié)構(gòu),即primer-extension-mediated sequencing(PEM-seq)。這是對(duì)基因編輯和DNA損傷修復(fù)等領(lǐng)域都有巨大促進(jìn)作用的新技術(shù)。與此同時(shí),該項(xiàng)目包括了該團(tuán)隊(duì)利用PEM-seq篩選出的一個(gè)相比于現(xiàn)有Cas9變體具有更低脫靶活性且與野生型Cas9切割效率相當(dāng)?shù)腃as9變體further enhanced Cas9 (FeCas9)。
北京大學(xué)
2021-02-01
生物
組織攤片烤片機(jī)
1.微電腦控制,中文界面,液晶顯示,觸摸鍵操作,簡(jiǎn)潔、直觀、方便。全程電腦自動(dòng)控制,開(kāi)機(jī)自動(dòng)加熱并恒溫。2.分?jǐn)偲⒖酒⒑嫫齻€(gè)功能區(qū)。3.溫度控制:0-99 ℃預(yù)設(shè),恒溫精度±1℃
孝感奧華醫(yī)療科技有限公司
2025-01-21
發(fā)酵香腸
酶
法增香技術(shù)
發(fā)酵香腸是一類高檔肉制品,以其風(fēng)味受到消費(fèi)者歡迎。本技術(shù)利用酶法促 進(jìn)發(fā)酵香腸生產(chǎn)過(guò)程中風(fēng)味的形成,在保持產(chǎn)品原有風(fēng)味、香型不變的情況下, 使其風(fēng)味物質(zhì)形成量增大 7 倍(以 GC/MS 出峰面積計(jì)),生產(chǎn)時(shí)間明顯縮短,產(chǎn) 品風(fēng)味更濃、持久性更強(qiáng)。
江南大學(xué)
2021-04-11
酶
法生產(chǎn)5’-核苷酸
5’-核苷酸為生物體內(nèi)重要的生化物質(zhì),參與多種生理生化反應(yīng)。本項(xiàng)目即利用核糖核酸(RNA)為原料,通過(guò)酶催化反應(yīng)生成四種5’-核苷酸,再經(jīng)分離純化,最后獲得高品位的5’-腺苷酸(5’-AMP)、5’-鳥(niǎo)苷酸(5’-GMP)、5’-胞苷酸( ’-CMP)和5’-尿苷酸(5’-UMP)等四種5’-核苷酸產(chǎn)品。這四種核苷酸目前作為營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑,添加到嬰兒配方奶粉中,或作為各種核酸藥物中間體。 本項(xiàng)目的特點(diǎn)是:1)提取高活力的磷酸二酯酶,代替桔青霉直接發(fā)酵液,大大減少了設(shè)備投資及生產(chǎn)成本,有效地消除了對(duì)環(huán)境的污染;2)通過(guò)對(duì)酶的預(yù)處理,有效地控制了酶反應(yīng)過(guò)程中的副反應(yīng),使核苷酸轉(zhuǎn)化率明顯提高;3)通過(guò)新型離子交換樹(shù)脂的有序排列組合,可一次分離純化得到高純度單核苷酸,技術(shù)上收率達(dá)80%以上;4)使用本項(xiàng)目生產(chǎn)出來(lái)的產(chǎn)品,含量和純度均可達(dá) %以上。達(dá)到國(guó)外先進(jìn)水平。
華東理工大學(xué)
2021-02-01
酶
的新型固定化系列技術(shù)
已有樣品/n針對(duì)酶在工程化應(yīng)用中的缺陷,如易失活、不具回收性、抗逆性差 等,采用新型固定化技術(shù),制備出具有高活性、高耐逆和工程化回用性 良好的固定化脂肪酶,提高酶活力 10-46 倍。如:以碳納米管為載體整 合其它方法固定化 BCL,固定化酶最大蛋白比活達(dá) 50,200 U/min/g protein,酶活回收率達(dá) 3,740%,為游離酶的 54 倍,是 MPR-NKA 固定化 酶的 1.5 倍,且大幅縮短了酶促反應(yīng)時(shí)間,10 分鐘就能使手性拆分反應(yīng) 達(dá)到平衡,較國(guó)際報(bào)道的最高水平提高 200 倍,
華中科技大學(xué)
2021-01-12
α-淀粉
酶
抑制蛋白的制備
α-淀粉酶抑制劑是一種純天然生物活性物質(zhì),屬于糖水解酶抑制劑的一種。 α-淀粉酶抑制劑通過(guò)對(duì)淀粉酶的抑制作用而發(fā)揮減肥效應(yīng),并經(jīng)胃腸道排出體外,因此不必進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng),不作用于大腦中樞,減肥的同時(shí)不抑制食欲,使用劑量很高時(shí)也無(wú)副作用,符合世界衛(wèi)生組織的減肥原則。對(duì)于肥胖患者,可減少糖向脂肪轉(zhuǎn)化,延緩腸道的排空,增加脂肪消耗以減少體重。因此,能用α-淀粉酶抑制劑來(lái)防止和治療肥胖癥、脂肪過(guò)多癥、動(dòng)脈硬化癥、高血脂及糖尿病等。另外,純化的α-淀粉酶抑制肽的另一重要作用是作為糖尿病的輔助治療(中藥一類),可以阻礙或延緩其對(duì)食物中主要的碳水化合物淀粉的消化作用,阻止血糖的升高,從而能使糖尿病人吃飽飯,消除饑餓感。本成果利用固液萃取技術(shù)、膜技術(shù)、雙水相萃取技術(shù)和層析技術(shù)等現(xiàn)代生物分離技術(shù)從小麥中分離純化了 -淀粉酶抑制劑( -淀粉酶抑制劑的活性大于2500U/mg.protein),達(dá)到了日本國(guó)應(yīng)用的要求。新工藝較原工藝相比具有操作方便,收率高,成本低,產(chǎn)品質(zhì)量好,易于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。據(jù)悉,歐美已將 -淀粉酶抑制劑開(kāi)發(fā)成保健食品,如starch blocker。每年的用量在100噸以上,且近年來(lái)每年以30%的速度在遞增。預(yù)計(jì)到2010年我國(guó)將有2億人口加入肥胖者行列,而糖尿病早已成為我國(guó)中老年人的常見(jiàn)病、多發(fā)病,因此將本成果應(yīng)用于治療上述疾病方面是極有市場(chǎng)潛力的。
南京工業(yè)大學(xué)
2021-04-13
植物油
酶
法脫膠(技術(shù))
成果簡(jiǎn)介:油脂精煉過(guò)程中,脫膠是非常重要的一步工序,脫膠效果的好壞 直接影響到油脂精煉的效率和最終產(chǎn)品的質(zhì)量。傳統(tǒng)的脫膠方法常存在產(chǎn)品 質(zhì)量不穩(wěn)定、消耗大、得率低、“三廢”排放量大等問(wèn)題。酶法脫膠工藝是現(xiàn) 代工業(yè)生物催化技術(shù)在傳統(tǒng)油脂行業(yè)中的應(yīng)用,是對(duì)現(xiàn)有化學(xué)或物理脫膠工 藝的改進(jìn),以提高其經(jīng)濟(jì)性和環(huán)保性,有著廣泛的發(fā)展前景和重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)價(jià)值。本技術(shù)以自行篩選所得菌株 BIT-18表達(dá)的磷脂酶為對(duì)象
北京理工大學(xué)
2021-04-14
基于 GPS RTK 和全景影像的自主定位
定向
測(cè)圖方法
本發(fā)明公開(kāi)了一種基于 GPS?RTK 和全景影像的自主定位定向測(cè)圖方法,本發(fā)明利用全景相機(jī)獲取 的全景影像和 GPS?RTK 測(cè)得的設(shè)站點(diǎn)坐標(biāo),采用基于全景影像球體模型中量測(cè)交會(huì)角的三維立體前交 計(jì)算方法,實(shí)現(xiàn)兩組全景影像公共區(qū)域中地物的直接量測(cè),從而快速獲取全景影像公共區(qū)域地物的三維 坐標(biāo)信息。本發(fā)明可實(shí)現(xiàn)在全景影像上直接對(duì)地物進(jìn)行量測(cè),可快速獲取地物數(shù)據(jù)及測(cè)點(diǎn)測(cè)距,從而獲 得三維建模、場(chǎng)景重建、數(shù)字城市建設(shè)等所需的地物信息。
武漢大學(xué)
2021-04-13
α-環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移
酶
的制備及
酶
法生產(chǎn)α-環(huán)糊精
環(huán)糊精在食品、香料、醫(yī)藥、農(nóng)藥、化工等行業(yè)有著廣泛的應(yīng)用。本項(xiàng)目通過(guò)基因工程技術(shù)構(gòu)建了高效表達(dá)?-CGT 酶工程菌,通過(guò)發(fā)酵優(yōu)化,發(fā)酵液酶活達(dá)到 100 U/ml (以?-環(huán)糊精的生成速率計(jì))以上,70400 U/ml (以水解活性計(jì)),具有發(fā)酵周期短,工藝簡(jiǎn)單易控等特點(diǎn)。發(fā)酵結(jié)束后發(fā)酵液過(guò)濾除菌可以直接作 為酶液進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)。此外,通過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù)改造了酶的產(chǎn)物特異性,當(dāng)以15%淀粉為底物時(shí),環(huán)糊精總轉(zhuǎn)化率達(dá)到 55%以上,其中α-環(huán)糊精含量達(dá)到 85%以上
江南大學(xué)
2021-04-11
“以飼代采”
生物
釀蜜新模式
原理:以蜜蜂為活體生物轉(zhuǎn)化器,利用體內(nèi)酶系進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化,將果汁轉(zhuǎn)化為果蜜創(chuàng)新點(diǎn):世界上首次提出“以飼代采”生物釀蜜概念,以大宗水果為原料,經(jīng)前處理,飼喂蜜蜂,實(shí)現(xiàn)定場(chǎng)養(yǎng)蜂,實(shí)現(xiàn)蜂蜜工業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用案例:2023年,在沈陽(yáng)建立200群的生物釀蜜示范基地,輻射東北地區(qū)成果獲獎(jiǎng):第十五屆“挑戰(zhàn)杯”全國(guó)大學(xué)生課外科技活動(dòng)大賽,三等獎(jiǎng)成果評(píng)價(jià):完全顛覆國(guó)內(nèi)外幾千年的蜂蜜生產(chǎn)模式,實(shí)現(xiàn)0→1的突破,為蜂蜜生產(chǎn)打開(kāi)一扇全新的大門(mén),規(guī)避了傳統(tǒng)蜂蜜生產(chǎn)的限制因素以及不利因素,實(shí)現(xiàn)蜂蜜生產(chǎn)工業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化、機(jī)械化、智能化,蜂蜜生產(chǎn)效率比傳統(tǒng)提高3-4倍,解決了水果滯銷、儲(chǔ)運(yùn)損失的問(wèn)題。
沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
2025-05-19
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