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已有樣品/n一種冰核蛋白-超聲波協(xié)同提高柑橘汁冷凍濃縮晶體成核溫度的方法。　　成果簡介：一種冰核蛋白-超聲波協(xié)同提高柑橘汁冷凍濃縮晶體成核溫度的方法，屬于食品工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明具體涉及在-15-20℃下通過冷凍濃縮法來制備柑橘濃縮汁，將10-50μg/mL冰核蛋白溶解于柑橘汁中，同時施加頻極電流為0.2-0.5A的超聲波，超聲波頻率為25MHz，超聲波處理時間為0.5-2min，通過適當(dāng)?shù)臄嚢枋垢涕僦艿骄鶆虻某暡ㄗ饔茫軌蛱岣吒涕僦鋬鰸饪s晶體成核溫度5-8℃，并且快速形成冰晶。本發(fā)明方法節(jié)能

 本發(fā)明提供一種抗蛋白吸附毛細管電泳共價鍵合涂層柱的制備方法。利用聚苯乙烯磺酸鈉和感光聚合物重氮樹脂的靜電自組裝和光固化交聯(lián)反應(yīng)在石英毛細管柱的內(nèi)壁上構(gòu)筑共價鍵合抗蛋白吸附涂層。所制備的毛細管電泳涂層柱具有良好的抗蛋白吸附性能，與未涂層的石英毛細管裸柱相比，對蛋白質(zhì)的分離性能提高1倍以上。本方法所用工藝流程簡單，生產(chǎn)效率高，生產(chǎn)成本低，重復(fù)性好，無毒環(huán)保，易于大規(guī)模生產(chǎn)，制得的共價鍵合毛細管電泳涂層柱具有優(yōu)良的化學(xué)穩(wěn)定性和抗蛋白吸附性能，適用于對蛋白質(zhì)、糖蛋白、肽鏈、激素、酶等生物的樣品的電泳分離檢測和純化。毛細管電泳涂層柱、產(chǎn)品附加值高。

本發(fā)明提供了一種高穩(wěn)定性蛋白質(zhì)?殼聚糖復(fù)凝聚交聯(lián)微膠囊及其制備方法，首先將芯材與不含還原糖的或含有還原糖的蛋白質(zhì)溶液混合，高速分散形成O/W型乳狀液，再加入殼聚糖溶液，調(diào)節(jié)pH，讓蛋白質(zhì)與殼聚糖通過靜電相互作用發(fā)生復(fù)凝聚反應(yīng)，形成復(fù)凝聚相沉降在芯材乳滴周圍而得到微膠囊，離心收集微膠囊，加熱，使蛋白質(zhì)?殼聚糖、蛋白質(zhì)?殼聚糖?還原糖兩兩之間發(fā)生美拉德反應(yīng)引發(fā)交聯(lián)而提高微膠囊的穩(wěn)定性。本發(fā)明簡單易行、安全、高效，適于大規(guī)模生產(chǎn)；本發(fā)明可廣泛用于具有良好熱穩(wěn)定性芯材的包埋，對于開發(fā)高穩(wěn)定性的蛋白質(zhì)?殼聚糖復(fù)凝聚微膠囊體系和推進復(fù)凝聚微囊化技術(shù)在食品工業(yè)中的實際應(yīng)用具有重要意義。

b0,+AT-rBAT是人體內(nèi)的一種氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白復(fù)合物，屬于異源多聚體氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白（HAT）家族。異源多聚體氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白，由輕鏈蛋白和重鏈蛋白構(gòu)成。b0,+AT是其中的輕鏈蛋白，負責(zé)轉(zhuǎn)運底物。而rBAT是其中的重鏈蛋白，具有負責(zé)輕鏈蛋白細胞膜定位（即將輕鏈蛋白“護送”到細胞膜上）和維持輕鏈蛋白的穩(wěn)定性的作用。b0,+AT主要分布于小腸和腎臟中。b0,+AT或者rBAT的突變，會誘發(fā)胱氨酸尿癥，一種先天性遺傳疾病。患者尿路中常有胱氨酸結(jié)石形成，造成腎絞痛，可引起尿路感染和腎功能衰竭。該病作為一種隱性遺傳疾病在人群中的發(fā)病率約為1/7000，屬于罕見病的一種。研究b0,+AT-rBAT的最新研究成果，揭開了胱氨酸尿癥發(fā)病的分子機理。復(fù)合物的結(jié)構(gòu)和功能，將能幫助我們認識胱氨酸尿癥，為可能的治療方案提供線索。本項研究工作在全世界首次解析了b0,+AT-rBAT的高分辨率電鏡結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)顯示，b0,+AT蛋白與rBAT蛋白首先形成異源二聚體分子，然后兩個異源二聚體分子通過rBAT蛋白的相互作用再進一步形成一個二聚體。體外轉(zhuǎn)運實驗表明rBAT蛋白對b0,+AT蛋白的轉(zhuǎn)運活性是必需的；也就是說，b0,+AT要正常發(fā)揮轉(zhuǎn)運功能，需要有rBAT蛋白的存在。這與周強實驗室2019年解析的LAT1-4F2hc復(fù)合物相似。LAT1-4F2hc復(fù)合物同屬HAT家族，其中的4F2hc蛋白是LAT1蛋白發(fā)揮轉(zhuǎn)運活性所必需的。同時，該研究也首次解析了b0,+AT-rBAT和它的天然底物精氨酸的復(fù)合物的冷凍電鏡結(jié)構(gòu)，解釋了它的底物識別機制。如果把b0,+AT-rBAT復(fù)合物比做生物膜上的一艘船，那么被轉(zhuǎn)運的精氨酸，可以被理解為“貨物”。研究人員通過解析b0,+AT-rBAT與底物的復(fù)合物的結(jié)構(gòu)，可以了解該“貨物”如何加載到船上的——這個過程，即為“識別機制”。在底物結(jié)合點附近，科研團隊還鑒定出了底物結(jié)合位點附近的一個轉(zhuǎn)運調(diào)控區(qū)域。通過點突變和同位素轉(zhuǎn)運實驗，他們證明了該轉(zhuǎn)運調(diào)控區(qū)域?qū)τ赽0,+AT-rBAT的轉(zhuǎn)運功能至關(guān)重要。西湖大學(xué)黃晶實驗室采用了分子模擬的方式，亦驗證了該區(qū)域的重要性。對于b0,+AT-rBAT復(fù)合物突變而導(dǎo)致的胱氨酸尿癥，基于上述研究，研究團隊進一步揭開了該疾病發(fā)生的機理。通過分析已解析出的b0,+AT-rBAT的高分辨率結(jié)構(gòu)，研究人員對突變的位點進行了準(zhǔn)確定位，并對這些位點進行了體外生化實驗的驗證。結(jié)果顯示，b0,+AT-rBAT的關(guān)鍵位點的突變影響了氨基酸轉(zhuǎn)運的活性，造成了胱氨酸尿癥。

本成果發(fā)明了以秸稈和廢棄動物蛋白酸解氨基酸為原料，物料和空間均無需嚴格滅菌下大規(guī)模制造木霉固體菌種的技術(shù)工藝，突破了木霉全元生物有機肥制造技術(shù)瓶頸。 一、項目分類 顯著效益成果轉(zhuǎn)化 二、成果簡介 木霉生物量大、根表定殖能力強、次生代謝產(chǎn)物種類多和含量高，促生和生防效果比細菌更顯著，但木霉在液體擴繁后期不能有效產(chǎn)孢，需再進行固體發(fā)酵才能獲得高濃度木霉固體菌種，傳統(tǒng)工藝原料貴、物料嚴格滅菌成本高，難以擴大規(guī)模，這是木霉生物有機肥產(chǎn)業(yè)中的技術(shù)瓶頸。本成果發(fā)明了以秸稈和廢棄動物蛋白酸解氨基酸為原料，物料和空間均無需嚴格滅菌下大規(guī)模制造木霉固體菌種的技術(shù)工藝，突破了木霉全元生物有機肥制造技術(shù)瓶頸。

組蛋白H3的N端翻譯后修飾在調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄活性和染色質(zhì)結(jié)構(gòu)方面發(fā)揮著非常重要的功能，其異常修飾可能會導(dǎo)致發(fā)育紊亂和癌癥的發(fā)生。

本發(fā)明公開了一種測定甲胎蛋白的電化學(xué)免疫傳感器及其制備方法與應(yīng)用，基底電極由MWNTs?CS溶液修飾，甲胎蛋白第一抗體溶液共價結(jié)合到修飾后的基底電極上，甲胎蛋白抗原溶液特異性結(jié)合到甲胎蛋白第一抗體上，CdTe@SiO2?GO?甲胎蛋白第二抗體溶液特異性結(jié)合到甲胎蛋白抗原上，所述基底電極為玻碳電極。本發(fā)明還提供了一種基于CdTe QDs信號放大的電化學(xué)免疫傳感器的人血清中甲胎蛋白的檢測方法，所述檢測方法靈敏度高、特異性好、具有很寬的線性范圍和較低的檢測限且成本低廉。

本發(fā)明涉及分子細胞生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域中，一種多能干細胞形成必需蛋白CREPT的在誘導(dǎo)多能干細胞中的應(yīng)用。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何制備多能干細胞及不能誘導(dǎo)為多能干細胞的細胞模型。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了下述X1)或X2)的方法：X1)多能干細胞的制備方法，包括：增加名稱為動物細胞1的出發(fā)動物細胞中CREPT蛋白質(zhì)的含量和/或活性，得到重組動物細胞，利用所述重組動物細胞制備多能干細胞；所述動物細胞1非干細胞；X2)不能誘導(dǎo)為多能干細胞的細胞模型的制備方法，包括：降低名稱為動物細胞2的出發(fā)動物細胞中所述CREPT蛋白質(zhì)的含量和/或活性，得到不能誘導(dǎo)為多能干細胞的細胞模型；所述動物細胞2非干細胞且表達所述CREPT蛋白質(zhì)。所述動物細胞1和所述動物細胞2均為離體的動物細胞。利用所述重組動物細胞制備多能干細胞可利用Yamanaka因子進行。Yamanaka因子為Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc。

本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定性高的蛋白質(zhì)?殼聚糖復(fù)凝聚交聯(lián)微膠囊及其制備方法，首先將芯材與蛋白質(zhì)溶液混合，高速分散形成O/W型乳狀液，再加入殼聚糖溶液，調(diào)節(jié)pH，讓蛋白質(zhì)與殼聚糖通過靜電相互作用發(fā)生復(fù)凝聚反應(yīng)，形成復(fù)凝聚相沉降在芯材乳滴周圍而得到微膠囊，離心收集微膠囊，冷凍干燥得到微膠囊粉末再與還原糖混合均勻，此時殼聚糖將蛋白質(zhì)與還原糖從空間上隔開，加熱使殼聚糖分別與蛋白質(zhì)和還原糖發(fā)生美拉德反應(yīng)引發(fā)交聯(lián)而提高微膠囊的穩(wěn)定性。本發(fā)明簡單易行、安全、高效，適于大規(guī)模生產(chǎn)；可廣泛用于具有良好熱穩(wěn)定性芯材的包埋。本發(fā)明對于開發(fā)穩(wěn)定性高的蛋白質(zhì)?殼聚糖復(fù)凝聚交聯(lián)微膠囊體系和推進復(fù)凝聚微囊化技術(shù)在食品工業(yè)中的實際應(yīng)用具有重要意義。

南開大學(xué)藥物化學(xué)生物學(xué)國家重點實驗室、生命科學(xué)學(xué)院、藥學(xué)院教授饒子和院士，南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2014屆博士畢業(yè)生、上海科技大學(xué)王權(quán)教授，英國伯明翰大學(xué)Gurdyal Besra教授，上海科技大學(xué)李俊副研究員為論文共同通訊作者。南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2019屆博士畢業(yè)生張璐（排名第一）、上海科技大學(xué)博士生趙耀為論文共同第一作者，南開大學(xué)藥學(xué)院趙煒教授是該成果合作者之一，南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2016級本科生吳方羽參與文章發(fā)表。南開大學(xué)細胞應(yīng)答交叉科學(xué)中心為論文通訊單位之一。據(jù)介紹，該聯(lián)合研究團隊綜合利用冷凍電子顯微鏡技術(shù)和X射線晶體學(xué)技術(shù)解析了抗結(jié)核一線藥物乙胺丁醇與靶標(biāo)蛋白，分枝桿菌膜蛋白糖基轉(zhuǎn)移酶EmbA-EmbB-AcpM2蛋白復(fù)合物，及與EmbC2-AcpM2蛋白復(fù)合物與乙胺丁醇結(jié)合的高分辨率三維結(jié)構(gòu)，首次闡明這個使用了近60年，治愈了無數(shù)結(jié)核病感染者的一線藥物的抑制作用機理，并首次揭示了臨床耐藥的分子機制。研究結(jié)果顯示，每個Emb蛋白單體均為含有氨基端15次跨膜螺旋的跨膜區(qū)和羧基端可溶區(qū)結(jié)構(gòu)域的折疊形式，并且以EmbA-EmbB或EmbC-EmbC組成異源或同源二聚體，并首次報道了每個Emb蛋白均在胞內(nèi)結(jié)合一個酰基載脂蛋白AcpM，最終組成EmbA-EmbB-AcpM2/EmbC2-AcpM2蛋白復(fù)合物。據(jù)悉，這是世界上第一個解析的源于結(jié)核分枝桿菌的膜蛋白三維結(jié)構(gòu)，該研究共解析并向蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫（protein data bank, PDB）投遞5個蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)坐標(biāo)，為全世界范圍研發(fā)設(shè)計新型抗結(jié)核抑制劑提供可靠的數(shù)據(jù)支撐。饒子和院士團隊長期致力于抗結(jié)核藥物重要靶標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能研究以及抗結(jié)核新藥研發(fā)，此項最新研究成果是繼2018年饒子和院士南開團隊在《科學(xué)》雜志發(fā)表分枝桿菌呼吸鏈超級復(fù)合物高分辨率結(jié)構(gòu)，2019年上海科技大學(xué)團隊在《細胞》雜志發(fā)表分枝桿菌關(guān)鍵藥靶跨膜轉(zhuǎn)運蛋白MmpL3與抑制劑復(fù)合物結(jié)構(gòu)后，在抗結(jié)核藥物研發(fā)領(lǐng)域的又一重大科研成果。