一種檢測靶核酸序列的方法
一、項目分類
關(guān)鍵核心技術(shù)突破
二、技術(shù)分析
(1)本技術(shù)能夠在僅使用一種標(biāo)記探針(即,檢測探針)的情況下,實現(xiàn)對多種靶核酸序列的同時檢測(多重檢測)。
(2)本技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)對多種靶核酸序列的同時檢測(多重檢測),并且能夠同時檢測靶核酸序列的最大數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了所使用的標(biāo)記探針(即,檢測探針)的數(shù)目。
因此,本技術(shù)提供了一種簡單、高效、低成本的多重檢測法。本技術(shù)能夠檢測的靶核酸序列的最大數(shù)目不受限于所使用的標(biāo)記探針(即,檢測探針)的數(shù)目;能夠基于相對有限數(shù)目的標(biāo)記探針(即,檢測探針)實現(xiàn)對顯著更多數(shù)量的靶核酸序列的同時檢測(多重檢測),這是特別有利的。
對比國內(nèi)外同類技術(shù),本技術(shù)的優(yōu)勢包括:①標(biāo)記過程極為方便且成本低。假設(shè)同樣需要識別15種高危型HPV,已商品化的實時PCR檢測試劑盒、已報道的多管實時PCR檢測體系、包括實時PCR熔解曲線技術(shù)均需要15條熒光探針進(jìn)行檢測。而本技術(shù)只需要4條熒光探針就可以完成15種高危型HPV的識別。②熔點溫度不會受待檢DNA序列的多態(tài)性位點或二級結(jié)構(gòu)的影響。傳統(tǒng)實時PCR技術(shù)和熔解曲線分析技術(shù)的檢測結(jié)果經(jīng)常會受到熒光探針覆蓋區(qū)的SNP或二級結(jié)構(gòu)的干擾。而本技術(shù)中熒光探針只與標(biāo)簽序列雜交,因此檢測獲得的熔點溫度可以保持恒定。③具備優(yōu)秀的兼容能力,一個熔點標(biāo)簽庫可以適用于不同領(lǐng)域多個對象的檢測,而且針對不同的檢測對象可以采用相同的檢測流程,試劑組份只需要更換雜交探針,設(shè)計上只需改動雜交探針的特異雜交序列。這種體系兼容能力大幅度縮短了新體系的研發(fā)時間。④判讀統(tǒng)一規(guī)范,易于在臨床應(yīng)用中推廣。目前大部分檢測技術(shù)針對不同的檢測對象需要建立不同的判讀標(biāo)準(zhǔn)。而本技術(shù)則可以像條形碼一樣標(biāo)記不同的檢測對象,因此較容易實現(xiàn)自動化判讀。
廈門大學(xué)
2022-07-28