褐藻膠裂解酶的創(chuàng)制及應用
課題組前期從海洋淤泥中篩選出一株V. natriegens SK42.001生長迅速,該菌株攜帶天然質粒并且能夠表達外源基因,具有作為新型模式生物的開發(fā)價值和應用潛力。同時,該菌株含有編碼褐藻膠裂解酶的基因、編碼寡褐藻膠裂解酶的基因,還可用于生產(chǎn)制備褐藻寡糖相關產(chǎn)品。
課題組構建了分泌表達褐藻膠裂解酶的大腸,以大腸桿菌為宿主表達來源于需鈉弧菌褐藻膠裂解酶,所得重組大腸桿菌在常規(guī)LB培養(yǎng)基中即可生產(chǎn)分泌胞外褐藻膠裂解酶,無需添加誘導底物海藻酸鈉,并且簡化蛋白下游加工工藝,具有較大的工業(yè)化應用潛力。
課題組解析了編碼褐藻膠裂解酶的基因,該褐藻膠裂解酶降解活性高,酶活達65U/mg;性質穩(wěn)定,于4℃儲存18個月后酶活仍保持初始酶活的98%以上;具有很高的產(chǎn)物特異性,可特異性生產(chǎn)褐藻寡糖三糖。該酶具有重要的工業(yè)應用價值和科學研究價值。
江南大學
2021-05-11