目的基因轉(zhuǎn)化甜櫻桃的方法及其在甜櫻桃原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用
本發(fā)明公開了目的基因轉(zhuǎn)化甜櫻桃的方法及其在甜櫻桃原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用。本發(fā)明公開的甜櫻桃轉(zhuǎn)化方法包括:將甜櫻桃果肉愈傷組織進行懸浮繼代培養(yǎng),得到懸浮細胞;將懸浮細胞用CPW13M進行處理,得到CPW13M處理的懸浮細胞,CPW13M為向細胞?原生質(zhì)體清洗液中加入甘露醇得到的甘露醇質(zhì)量百分比濃度為11%?15%的溶液;用纖維素酶和果膠酶酶解CPW13M處理的懸浮細胞得到甜櫻桃原生質(zhì)體;以甜櫻桃原生質(zhì)體為受體進行甜櫻桃轉(zhuǎn)化。實驗證明,本發(fā)明的甜櫻桃轉(zhuǎn)化方法可以將目的基因在甜櫻桃原生質(zhì)體中進行瞬時表達,可以用來進行目的基因的功能驗證及蛋白質(zhì)和細胞器的定位,還可用來檢測蛋白質(zhì)互作及細胞代謝。
中國農(nóng)業(yè)大學
2021-04-11