本發明提供了用于檢測禽白血病病毒J亞群(ALV?J)的試劑盒,屬于RT?PCR檢測技術領域。本發明的試劑盒含有一對特異性引物,其核苷酸序列分別如SEQ ID NO.1?2所示。本發明還提供了檢測禽白血病病毒J亞群的方法。本發明試劑盒和檢測方法具有高特異性、高靈敏度、高效率、通用性好、低成本的特點,可在6.5h內對臨床病料進行快速鑒別診斷,本發明為ALV?J的早期快速診斷和開展分子流行病學調查提供技術手段,以更好地指導養禽生產中對該病的防控。