本發明涉及生物技術領域,具體地,本發明涉及二維培養系統在小鼠腸上皮干細胞體外培養中的應用。本發明提出了一種培養系統。該培養系統用于單層細胞培養,該培養系統包括:基質膠、N2、B27、雙抗、GlutaMAX、N?acetylcysteine、R?spondin1以及基礎培養基,其中,所述基質膠的厚度為5μm~50μm。該培養系統適用于胃腸道的表皮細胞和干細胞的單層細胞的培養,尤其適用于腸道表皮細胞和腸道干細胞的單層細胞的培養。該培養系統可以更加直觀的觀察胃腸道表皮細胞和干細胞的一系列生化細胞水平的變化,能很好的模擬體內腸道表皮細胞的各項指標,能更加便捷地探索外泌體、炎癥因子等對小腸干細胞穩態的影響,提供低成本、高效率的篩藥體系。