本發明公開了一種免固定生物傳感電極的制備及其在免標記均相光致電化學農殘檢測與癌癥診斷中的應用。它是采用電還原的方式,將含負電基團的苯基重氮鹽與不含負電基團的苯基重氮鹽共同修飾在基礎電極表面。該電極只吸附單鏈DNA而不吸附雙鏈DNA,穩定性與重現性高。該電極可用于免標記均相光致電化學生物傳感方法中,該方法包含一個目標分子觸發的生化反應回路,其含有無標記DNA發卡(DNA?1)與單鏈(DNA?2)。無目標分子時,DNA?1和DNA?2均可吸附到電極表面;此時卟啉可借助DNA?1與DNA?2吸附到電極表面,產生光致電化學信號響應;有目標分子時,DNA?1可與DNA?2相互雜交,在聚合酶的作用下將大量的DNA?1和DNA?2轉變為長雙鏈DNA,導致DNA?1與DNA?2在電極表面吸附量的減少及卟啉光致電化學響應的降低。
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