本發明公開了一種染料功能化磁性納米材料的制備方法及其熒光傳感與磁分離TNT的應用,其特征在于:首先以油酸鐵配合物與油胺在油酸中反應獲得油酸包覆的四氧化三鐵納米材料;再將油酸包覆的四氧化三鐵納米材料分散在2-磷酸乙胺的乙醚溶液中完成配體交換,獲得2-磷酸乙胺包覆的四氧化三鐵納米材料;最后再與熒光素異氰酸酯反應即得目標產物。本發明的染料功能化磁性納米材料能夠傳感并去除污染水樣中的痕量TNT,且具有再生性。