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活載體疫苗是指對細菌、病毒、真菌等微生物進行基因改造，保留其基本入侵宿主細胞引起免疫反應(yīng)的能力，降低其對宿主造成危害毒力，之后通過外源插入疫苗靶點基因等方法建立起來的一種新型疫苗。近年來團隊在對常見腸道致病菌致病機理研究的基礎(chǔ)上，篩選了單增李斯特菌做為載體菌，對其關(guān)鍵毒力基因進行敲除構(gòu)建穩(wěn)定減毒突變株用來表達外源基因。目前團隊已構(gòu)建了雙基因敲除株疫苗載體、半致死載體等活載體疫苗運載系統(tǒng)，并對其進行抗原遞呈、免疫機理等進行了初步研究發(fā)現(xiàn)，該類疫苗載體對免疫因子具有強烈的激活效應(yīng)，更為重要的是該類活載體

目前，沙門菌的檢測主要還是采用傳統(tǒng)的細菌學(xué)方法，通過前增菌、選擇性增菌、分離培養(yǎng)、生化試驗以及血清學(xué)鑒定的步驟一步一步進行檢測，工作量大且耗時長。PCR及Real Time PCR等分子生物學(xué)技術(shù)雖然具有快速、簡便等大量優(yōu)點，卻較少應(yīng)用，主要原因是以DNA為模版的PCR及Real Time PCR技術(shù)并不能區(qū)分細菌的死活細胞，樣品中存在的死細胞可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。本課題將EMA對死活細胞的鑒別作用與Real Time PCR的靈敏度、特異性相結(jié)合，有效克服了DNA分子檢測手段不能鑒別死活細胞的弊端，在實現(xiàn)檢測的快速、簡便的同時大大提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性。確證了EMA-Real Time PCR可實現(xiàn)實際樣品中沙門菌活細胞的快速測定，可將EMA-Real Time PCR推廣到實際檢測工作中，如此便可大大縮短檢測所需的時間，節(jié)省大量的人力、物力。研究成果具有重大的應(yīng)用前景。 社會效益：EMA-Real Time PCR可用于實際樣品中沙門菌活細胞的快速檢測，建立一種快速檢測病原菌的新方法體系，用于實際的檢測工作中，如此不僅可以減少食品安全日常監(jiān)測的工作量，更重要的是，在突發(fā)性食物中毒事件中，大大縮短了病原菌檢測所需時間，提高了反應(yīng)效率，為突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的解決提供更好的技術(shù)平臺。

??????? 非損傷微測技術(shù)（Non-invasive Micro-test Technology，NMT）源于美國MBL實驗室（54位諾貝爾獎得主的搖籃），由神經(jīng)學(xué)家Lionel F. Jaffe（美國揚格公司創(chuàng)始人之一）于1974年發(fā)明，2001年，美國揚格公司正式推出現(xiàn)代NMT。NMT是一種研究活體材料的底層核心技術(shù)，研究人員基于NMT能夠建立自己獨有的Me-Only 研究平臺，從而獲得極具創(chuàng)新的研究成果。 ??????? NMT可在不接觸、不損傷樣品的情況下，檢測分子/離子進出生物活體的流速（流動速率和方向），可測樣品種類繁多，小到菌、單細胞、液泡，大到組織、器官、整體都可檢測。基于NMT商業(yè)化的設(shè)備統(tǒng)稱為非損傷微測系統(tǒng)。 ??????? 揚格/旭月的非損傷微測系統(tǒng)包含BIO系列、CONFLUX系列（共聚焦/熒光NMT）、NMT100系列、NMT200系列、NMT100S系列、NMT200S系列、NMT150系列、NMT活體工作站系列、NMT Physiolyzer?系列等，已發(fā)展至第七代自動化智能產(chǎn)品。揚格/旭月的NMT系統(tǒng)全部采用從美國揚格（旭月北京）研發(fā)中心自主研發(fā)的imFluxes智能操作軟件，將十余年的NMT應(yīng)用大數(shù)據(jù)與設(shè)備實現(xiàn)完美結(jié)合，并且在產(chǎn)品一體化、自動化、智能化、擴展升級等諸多方面都有大幅提升。 ??????? 揚格/旭月已取得基于NMT的數(shù)十項專利及軟件著作權(quán)，擁有完善的專利保護體系，所有產(chǎn)品全部通過中關(guān)村NMT聯(lián)盟認證和ISO9001質(zhì)量體系認證。揚格/旭月所銷售的NMT專用耗材，已通過中關(guān)村NMT聯(lián)盟認證，所有耗材是揚格/旭月研發(fā)中心結(jié)合十余年的經(jīng)驗、摸索并自主研發(fā)生產(chǎn)的。NMT專用耗材較傳統(tǒng)的通用型耗材保質(zhì)期更長，性能更穩(wěn)定、可靠，所有對外銷售的耗材全部經(jīng)過嚴格的生產(chǎn)、檢驗流程。 ??????? 揚格/旭月的NMT研究平臺已經(jīng)幫助國內(nèi)外科研單位取得近百項各類專利，以及包含Nature、Cell在內(nèi)的500多篇論文。同時，已銷往歐洲的瑞士蘇黎世大學(xué)（擁有包括愛因斯坦在內(nèi)10余位諾貝爾獎得主），以及中國科學(xué)院、中國林科院、中國農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部下屬的眾多科研院所與高校，以及北大、上海交大等知名高校。 名稱：NMT活細胞工作站 代數(shù)：第七代 品牌：旭月 產(chǎn)地：中國 已獲得認證：中關(guān)村NMT聯(lián)盟認證，ISO9001國際質(zhì)量體系認證 簡介：NMT活細胞工作站是一款針對活細胞生理功能研究而特別設(shè)計的活體生理功能檢測平臺，可在細胞的正常培養(yǎng)/生長環(huán)境中，檢測進出細胞內(nèi)外的分子、離子的流速，反映細胞的實時生理狀態(tài)，分辨率高達10-12 mol級別。能滿足質(zhì)膜生理功能、神經(jīng)傳導(dǎo)、細胞凋亡等方向的臨床與基礎(chǔ)研究需求。 1 活體、原位、非損傷測量 對整體或分離后的樣品不造成損傷，獲取正常生理狀態(tài)下的信息。 2 無需標(biāo)記 預(yù)先知道測定的是何種指標(biāo)，無需用放射性、化學(xué)或藥理學(xué)等標(biāo)記方法，安全且環(huán)保。 3 不用提取樣品 可直接檢測，不需要研磨等傳統(tǒng)的提取方法。 4 實時、動態(tài)檢測 動態(tài)實時（最短在6秒左右）檢測和獲取數(shù)據(jù)。 5 長時間持續(xù)檢測 可進行長達8個小時以上的實時和動態(tài)監(jiān)測。 6 可測指標(biāo) 采購相對應(yīng)耗材后可單獨檢測Ca2+、Cl-濃度和流速。 預(yù)留指標(biāo)檢測升級端口，可升級指標(biāo)包含：IAA、O2、H2O2、Cd2+、Pb2+、Cu2+、Ca2+、H+、K+、Na+、NH4+、NO3-、Mg2+的濃度和流速檢測。 預(yù)留雙指標(biāo)檢測升級端口，升級后可單獨檢測一種離子或分子，也可同時檢測兩種離子或一種離子與一種分子的濃度和流速，用于離子/分子相關(guān)性研究及更前沿的科研探索。 7 可測樣品種類繁多 整體、器官、組織等都可以檢測（理論值：5μm-10cm均可）。 8 自動化操作 X、Y、Z方向自動/手動操控傳感器移動。 9 數(shù)據(jù)采集方式 X方向一維數(shù)據(jù)采集。 型號 功能 可升級功能 NMT-LCP 1.標(biāo)配兩種指標(biāo)：Ca2+、Cl-。 2.操作方式：三維自動。 3.檢測樣品：可檢測樣品尺寸為5μm-10cm。 4.數(shù)據(jù)：1D。可直接檢測、輸出流速和濃度數(shù)據(jù)。 5.檢測方式：單傳感器檢測 6.異常報警：有 1.可升級指標(biāo)：膜電勢、IAA、O2、H2O2、Cd2+、Pb2+、Cu2+、H+、K+、Na+、NH4+、NO3-、Mg2+。 2.可擴展：未來新研發(fā)指標(biāo)可擴展升級。 3.可升級檢測方式：單/雙傳感器檢測可選。 4.數(shù)據(jù)：1D/3D可選。可直接檢測、輸出流速和濃度數(shù)據(jù)。 ? ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ? ??

于生物制藥生產(chǎn)廢水中通常含有病原性微生物，殺死病原體后才能排放到污水處理系統(tǒng)中，沃恩專門研制出一套生物滅活處理系統(tǒng)，該系統(tǒng)通過持續(xù)穩(wěn)定的高溫使細菌的菌體變性或凝固酶失去活性而使細菌死亡，病菌在高溫下DNA、RN的化學(xué)吸收熱量導(dǎo)致鍵斷裂，從而滅活。本系統(tǒng)采用序批次處理方式，配有一個收集罐和兩個或兩個以上的滅活罐，通過間歇式方式運行，確保使用過程中的節(jié)能環(huán)保，系統(tǒng)可靠性高；另外整個系統(tǒng)采用智能化控制，能夠?qū)崿F(xiàn)無人值守，全自動運行，并已在實際項目中取得顯著效果。

真核細胞具有復(fù)雜而高度有序的空間結(jié)構(gòu)，研究生物大分子的亞細胞定位，對于闡明其生物學(xué)功能有著重要意義。核酸分子在細胞中的特異性分布直接影響基因表達的效率，在蛋白質(zhì)翻譯調(diào)控、學(xué)習(xí)與記憶形成等一系列生物學(xué)過程中扮演了重要角色。針對亞細胞區(qū)域中RNA組份的研究，傳統(tǒng)手段依賴于化學(xué)交聯(lián)、免疫沉淀、離心分離等技術(shù)，不但需要預(yù)先破壞細胞的天然結(jié)構(gòu)，而且還局限于少數(shù)能夠被機械分離的亞細胞區(qū)域，缺乏普適性。 本研究提出“鄰近核酸標(biāo)記”的策略。該策略的核心是在活細胞中利用酶促反應(yīng)形成大量高活性的自由基，與酶鄰近的核酸分子發(fā)生共價加成反應(yīng)，從而實現(xiàn)空間特異性標(biāo)記。從工程改造的過氧化物酶APEX2出發(fā)，鄒鵬課題組首先設(shè)計并合成了十余種與生物素偶聯(lián)的酶底物，并從中發(fā)現(xiàn)生物素-苯胺探針的核酸標(biāo)記活性最高。他們進一步以線粒體、核纖層和核仁等亞細胞結(jié)構(gòu)為例，建立了在活細胞中開展鄰近核酸標(biāo)記的方法，并通過定量PCR與高通量測序分析證實了標(biāo)記方法具有良好的空間特異性。鄰近核酸標(biāo)記技術(shù)操作簡單、具有普適性，為日后研究核酸的亞細胞定位與功能關(guān)系提供了必要的工具。

1 成果簡介現(xiàn)代社會人們生活節(jié)奏加快、缺乏鍛煉、工作學(xué)習(xí)壓力加大，使人們不自覺地進入“亞健康”狀態(tài)，特別是隨著步入老年社會，人們越來越關(guān)注身體的健康，推行健康概念服務(wù)可以滿足大多數(shù)人群的需求。 飛活網(wǎng)（ fihuo.com） 通過結(jié)合便攜的傳感器腕帶、智能手機和后臺海量數(shù)據(jù)處理平臺，可以給人們展示長期的基本健康數(shù)據(jù)和環(huán)境數(shù)據(jù)，并用于比較和分析。關(guān)注家人和朋友的健康不再是一個夢想，可以實現(xiàn)在線的健康數(shù)據(jù)瀏覽和監(jiān)控。 飛活網(wǎng)具備社交網(wǎng)絡(luò)的基本交互功能， 可以輕松獲得最新和最熱的健康資訊；可以邀請和加入朋友的健康生活圈子，開始健康的生活方式； 可以定制和發(fā)布個人的健康計劃，并記錄健康日記；可以長期保存，瀏覽和分析個人健康數(shù)據(jù)； 可以發(fā)布和參與健康測試，提高對健康生活的認識； 可以提交和回答健康問題，獲得貼心的健康問題答案。 飛活網(wǎng)還研制了計步器和健康腕帶智能設(shè)備，以及相關(guān)的智能手機應(yīng)用和微博應(yīng)用，可以實現(xiàn)隨時隨地的健康數(shù)據(jù)采集、分析與共享，比如步數(shù)、距離、路線、卡路里、 脈率、血氧和營養(yǎng)等數(shù)據(jù)。基于健康傳感器網(wǎng)絡(luò)和數(shù)據(jù)處理平臺， 可以實現(xiàn)具有特色的健康主題服務(wù)。 下圖展示了傳感器設(shè)備、智能手機應(yīng)用和飛活網(wǎng)服務(wù)的連接關(guān)系。 2013_18_12 應(yīng)用說明2012 年 8 月，飛活網(wǎng)服務(wù)網(wǎng)站開始上線試運行，同時發(fā)布了 Android 平臺的手機健康應(yīng)用供用戶免費下載，用戶可以使用手機健康應(yīng)用不斷收集日常的運動和健康數(shù)據(jù)，并定時上傳到飛活網(wǎng)服務(wù)器上進行保存和處理，從而實現(xiàn)長期的健康數(shù)據(jù)瀏覽、管理和分析，不僅可以幫助用戶建立個人健康檔案，還可以進行健康指導(dǎo)。此外， 飛活網(wǎng)研制的計步器和健康腕帶智能設(shè)備非常方便攜帶和使用，不僅能耗較低，而且可以緩存多天的數(shù)據(jù)并能通過藍牙上傳到手機，然后通過無線上傳至服務(wù)器。3 效益分析目前移動健康領(lǐng)域發(fā)展迅速，國內(nèi)外都涌現(xiàn)出一些優(yōu)秀的初創(chuàng)公司，各個投資機構(gòu)都密切關(guān)注健康醫(yī)療領(lǐng)域。 飛活網(wǎng)的核心競爭力是為用戶提供長期的健康數(shù)據(jù)采集、管理、分析和指導(dǎo)等服務(wù)。 而且， 面向不同人群開發(fā)的擴展傳感器設(shè)備還可以擴展到家庭和社區(qū)等更廣泛的領(lǐng)域。飛活網(wǎng)通過初步建立從個人健康數(shù)據(jù)產(chǎn)生、收集、存儲到分析和指導(dǎo)的路徑，具有明顯的社會和經(jīng)濟效益。通過結(jié)合智能設(shè)備的制造和營銷，以及增值的飛活網(wǎng)服務(wù)可以吸引越來越多的人群參與其中，并享受健康生活帶來的幸福感和成就感。

南方科技大學(xué)與深圳國家感染性疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心/南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院（深圳市第三人民醫(yī)院）等聯(lián)合，從臨床新冠肺炎病例獲取生物樣本，首次使用冷凍電子顯微鏡觀察到了新冠病毒經(jīng)滅活后的真實形貌，為新冠病毒的識別、鑒定和臨床相關(guān)研究提供重要的超微影像基礎(chǔ)。該成果于當(dāng)?shù)貢r間2020年3月5日發(fā)布在生物領(lǐng)域最大的預(yù)印本發(fā)行服務(wù)BioRxiv上。自從2019年底新冠肺炎疫情爆發(fā)以來，南方科技大學(xué)冷凍電鏡中心與深圳國家感染性疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心/南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院（深圳市第三人民醫(yī)院）等成立聯(lián)合研究團隊，啟動對新冠病毒感染肺炎以及新冠病毒分離、培養(yǎng)、鑒定及結(jié)構(gòu)解析等系統(tǒng)性研究分析。聯(lián)合研究團隊依托南方科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院（深圳市第三人民醫(yī)院）生物安全III級實驗室條件，在2020年1月27日從1名新冠肺炎患者肺泡灌洗液中分離出病毒株，并迅速完成基因組測序和鑒定，及時向全球流感信息共享平臺（GISAID注冊編號：EPI_ISL_406594）注冊共享信息，把其命名為“BetaCoV/Shenzhen/SZTH-003/2020”的新冠毒株。隨后進一步完善了實驗室病毒擴增、純化及滅活技術(shù)，并綜合應(yīng)用間接免疫熒光法（IFA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、和基因組序列與譜系分析多種方案核實和確認滅活的新冠病毒。隨后南方科技大學(xué)冷凍電子顯微鏡中心專家，利用冷凍電子顯微鏡分析技術(shù)，不僅首次觀察到了真實的新冠病毒經(jīng)滅活后的形貌，并且捕捉到了該病毒侵染宿主細胞中的一個重要中間狀態(tài)。此時病毒正處于識別和附著宿主細胞后，準(zhǔn)備與細胞發(fā)生融合的時期。經(jīng)國內(nèi)外文獻檢索，這是新冠肺炎疫情爆發(fā)以來，科研工作者首次在冷凍電子顯微鏡下觀察到新冠病毒全病毒的真實形貌。冷凍電子顯微鏡避免了常溫電子顯微鏡對生物樣品的脫水、染色等破壞作用，最大限度地保持了生物樣品生理狀態(tài)下的真實形貌。聯(lián)合研究團隊現(xiàn)正在進一步揭示新冠病毒超微結(jié)構(gòu)、病毒侵染人類宿主細胞的特性、與新冠肺炎臨床預(yù)后關(guān)系。在深圳市的大力支持下，聯(lián)合研究團隊正在打造高等級生物安全臨床冷凍電子顯微鏡研究平臺，全力推進新冠病毒以及其他致命性病毒的超微結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究，為傳染病病原鑒定、公共衛(wèi)生突發(fā)事件防控和潛在的抗體、疫苗和新藥研發(fā)提供堅實的科學(xué)基礎(chǔ)。

（一）蠟樣芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌NJYH63305是團隊自行篩選的有益芽孢桿菌，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、食品保健、飼料等領(lǐng)域。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，是一種集抑菌、殺蟲、促生于一體的環(huán)境友好型高效生防制劑，對茶輪斑病菌、黃瓜枯萎病菌、立枯絲核菌、煙草赤星病菌、茶云紋葉枯病菌、小麥全蝕病菌、小麥紋枯病、尖鐮孢菌、鐮刀菌、終極腐霉菌等植物病害及小菜蛾具有較強抑制作用。在醫(yī)藥領(lǐng)域，可調(diào)節(jié)人體腸道微生態(tài)平衡，適于治療急慢性痢疾、腸炎、腹瀉、嬰幼兒腹瀉引起的腸功能紊亂等；在食品保健領(lǐng)域，可作為食品添加劑，長期服用能促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，減少腸道疾病的發(fā)生，提高免疫能力、增強抗病能力。 1、蠟樣芽孢桿菌國內(nèi)外研究進展目前，國內(nèi)外蠟狀芽孢桿菌研究大多處于實驗室內(nèi)研究階段，其商品化并應(yīng)用于農(nóng)業(yè)防治的實例較少。國內(nèi)市場上蠟樣芽孢桿菌農(nóng)用制劑大部分為復(fù)配試劑，同時其大規(guī)模培養(yǎng)過程中也存在不少問題，如發(fā)酵放大過程信息采集困難、制劑有效期不長、產(chǎn)品貨架期短等，這些問題的深入研究對解決蠟樣芽孢桿菌高密度培養(yǎng)瓶頸、降低蠟樣芽孢桿菌生產(chǎn)成本、促進細胞大規(guī)模培養(yǎng)領(lǐng)域重大突破具有重要意義。2、本課題組技術(shù)優(yōu)勢（1）團隊以項目為紐帶，建立了蠟樣芽孢桿菌在線監(jiān)控的高密度培養(yǎng)與多階段發(fā)酵集成技術(shù)，在1000L發(fā)酵罐上蠟樣芽孢桿菌活菌數(shù)高達800億個/g, 比初始培養(yǎng)提高了230%，達國際領(lǐng)先水平；（2）篩選的芽孢保護劑，可提高蠟樣芽孢桿菌活性，延長半衰期40％以上；（3）協(xié)同江蘇省農(nóng)科院及南京農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站進行綠色防控技術(shù)推廣，于江蘇浦口林大蔬菜基地、江寧區(qū)湖熟街道設(shè)施蔬菜基地、溧水傅家邊茶廠等地建立2800畝示范區(qū)，重點試驗核心區(qū)460畝。推廣示范區(qū)內(nèi)，蠟樣芽孢桿菌對水稻紋枯病、灰霉病、晚疫病等真菌病害抑制率達51.8％～85.9％，與蘇云金芽孢桿菌（Bt）進行增效試驗，小菜蛾殺滅率提高29%，降低化學(xué)農(nóng)藥使用量50％以上，農(nóng)藥殘留量低于國家無公害農(nóng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)；（4）目前已在國內(nèi)外重要期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文10余篇，出版專著《高效有益微生態(tài)制劑開發(fā)與利用——蠟樣芽孢桿菌》，申請國家發(fā)明專利4項，授權(quán)3項，其中3項（ZL200910028025.1、ZL201010579133.0、ZL200910028320.7）在南京新百藥業(yè)有限公司成功實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。（二）凝結(jié)芽孢桿菌團隊自行篩選獲得一株益生凝結(jié)芽胞桿菌NJYHHWG 877005，除具有和乳酸菌及雙歧桿菌同樣的保健功效外，還具有耐酸、耐熱、耐鹽、容易培養(yǎng)和保存的特點。凝結(jié)芽孢桿菌為兼性厭氧菌，進入腸道后會消耗游離氧，有利于厭氧微生物乳酸菌和雙歧桿菌的生長，多用于調(diào)節(jié)腸道內(nèi)微生態(tài)菌群平衡，團隊自主知識產(chǎn)權(quán)的凝結(jié)芽胞桿菌NJYHHWG 877005對甜瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、西瓜炭疽病菌等有很強的防治效果，可進行新型高效生物農(nóng)藥的開發(fā)。

中試階段/n該成果是一種高密度活魚運輸車，包括車體、水氧循環(huán)裝置和魚箱，車體上固定設(shè)有魚箱和水氧循環(huán)裝置；魚箱內(nèi)設(shè)有隔板，隔板上有溢流口，魚箱外壁設(shè)有保溫層，每個隔間頂面設(shè)裝魚口，側(cè)面設(shè)卸魚口；水氧循環(huán)裝置包括過濾裝置、增氧裝置和換熱器，通過水泵、管道和閥門與魚箱串聯(lián)連接；水體溶氧和溫度為自動控制，泵和制冷壓縮機通過車載發(fā)動機帶動，且能夠利用產(chǎn)生的冷量維持水體低溫。通過采用上述結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)運輸過程魚箱內(nèi)的溶氧和溫度控制，延長活魚運輸時間，提高存活率。