|
搜索
搜 索
高等教育領域數字化綜合服務平臺
一種許氏平鮋免疫增強蛋白HMGB1基因及編碼蛋白和應用
本發明涉及分子生物學領域，具體的說是一種許氏平鮋免疫增強蛋白(HMGB1)編碼基因及其重組蛋白制備和應用。HMGB?1為序列表SEQ?ID?No.1中的氨基酸序列所示，該蛋白的編碼基因為序列表SEQ?ID?No.2中的堿基序列所示。其制備方法：以鰻弧菌刺激的許氏平鮋頭腎cDNA為模板，PCR擴增HMGB1編碼基因，構建質粒pHMGB1；將pHMGB1轉化大腸桿菌BL21Transetta(DE3)，對轉化子進行誘導表達后，提取和純化蛋白，即得重組HMGB1蛋白。所述重組HMGB1蛋白可結合雙鏈DNA，并可顯著提高許氏平鮋頭腎巨噬細胞的免疫活性，提高其對鰻弧菌的殺菌功能和許氏平鮋對鰻弧菌的抵抗能力。該重組HMGB1蛋白可作為免疫增強劑應用于魚類鰻弧菌病害的防治。
青島農業大學
2021-04-13
一種幾丁質合酶及其基因和應用
本發明涉及幾丁質合酶，特別涉及卵菌門中的幾丁質合酶，其氨基酸序列為與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列在相似性在75％以上，優選在80％以上，更優選在90％以上，最優選在95％以上且具有與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列相同功能的氨基酸序列。所述幾丁質合酶的活性水平能夠調節卵菌的活性孢子囊和活性游動孢子的產量從而影響卵菌的致病力或寄主的發病程度。
中國農業大學
2021-04-11
重組畢赤酵母發酵生產堿性果膠酶
該項目成功構建了一株高產堿 性果 膠 酶的畢 赤酵 母工 程 菌 (Pichia pastoris GS115)，通過對發酵過程的優化控制，在 3L 罐中酶活達到 890U/mL。 在此基礎上進行了堿性果膠酶的中試及其工業化研究，在 10 噸發酵罐中產酶達到 1305U/mL。采用該重組堿性果膠酶代替傳統的強堿高溫工藝，廢水 COD 顯著降低，可生化性較大提高。處理體系 pH 值為 9.4，代于堿精練水平；酶處理溫度低于堿處理，這些結果對棉織物前處理的清潔生產具有重要的應用價值。
江南大學
2021-04-11
基于膠體金標記技術的轉鐵蛋白和血紅蛋白雙指標同時檢 測新技術建立及便血檢測產品研發
成果簡介：便隱血是指消化道出血量少，肉眼不見血色，少 量紅細胞被消化分解，以至在顯微鏡下也無從發現的出血。正 常人便隱血檢驗為陰性，而陽性結果常見于腸癌、消化道炎癥 或出血性疾病等患者糞便檢測，便隱血檢測對診斷消化道出血 具有重要意義，也是目前進行消化道腫瘤普查、初篩和監測的 有效手段，是臨床上診斷消化道出血的重要依據。 目前，便隱血檢測的主要指標為轉鐵蛋白和血紅蛋白，且
合肥工業大學
2021-04-14
適用于呋喃唑酮殘留分析的酶聯免疫檢測試劑盒
研發階段/n本成果合成了人工免疫原和包被原，制備出高效價的特異性抗體，建立了肌肉(豬、雞、魚)、肝臟(豬、雞)、腎臟(豬)中AOZ殘留檢測的ELISA方法，并與建立的多殘留檢測HPLC方法進行了對比。該方法的檢測限、回收率、變異系數均達到我國獸藥殘留快速檢測的要求。以上述方法為基礎，在國內首次研制出動物樣品中AOZ殘留檢測ELISA試劑盒。通過與國外同類試劑盒、HPLC法的比對和動物殘留試驗證明，該試劑盒的靈敏度、準確度和重現性與國外試劑盒水平相當。經多家檢測機構和研究單位的復核和應用表明，該試劑盒
華中農業大學
2021-01-12
一種海洋黑曲霉生產耐鹽纖維素酶的液體發酵方法
本發明公開了一種海洋黑曲霉生產耐鹽纖維素酶的液體發酵方法。包括如下步驟:1)從東海近海10～20m深處的泥土里篩選得到一株海洋黑曲霉;2)海洋黑曲霉接種于PDA培養基上,32～40℃下培養60～90小時,得到斜面孢子,斜面孢子保藏于4℃;3)斜面孢子接種于PDA-1培養基,在32～40℃下培養60～90h,得到活化的孢子;4)活化的孢子接種于茄子瓶斜面,42℃培養74小時,得到擴培的茄子瓶斜面孢子;5)擴培得到的茄子瓶斜面孢子用滅菌人工海水稀釋到108個孢子/ml,接種于液體發酵產酶培養基,發酵5～10天,得到纖維素酶。本發明具有產酶活高、酶穩定、耐鹽性好等優點,生產的纖維素酶可以在較高鹽含量的條件下降解纖維素,為該水解物的后續應用打下基礎。
浙江大學
2021-04-13
(R)-硫辛酸手性中間體的綠色酶法不對稱合成技術
(R)-硫辛酸是一種能消除老化與致病的類似維他命的物質，可以去除機體自由基，促進機體利用葡萄糖合成維生素C，能有效去除黑色素，還可協助輔酶進行有利于機體免疫力的生理代謝，是一種萬能抗氧化劑藥物，廣泛應用于預防和治療心臟病、糖尿病及老年癡呆癥。而近年來歐美國家開始將其應用于食品、保健品及化妝品，應用范圍的擴展為其市場增長提供了廣闊的空間。目前 (R)-硫辛酸的生產主要是通過化學拆分法合成 (化學拆分法合成途徑) ，即先通過化學法合成混旋硫辛酸，再利用苯乙胺作為拆分劑對其進行拆分，得到的右旋硫辛酸苯乙胺鹽，經鹽酸脫鹽得到 (R)-硫辛酸粗品，精制后即可得到合格的 (R)-硫辛酸。但由于該法工藝復雜，需要多次結晶，成本高、理論得率僅為50%。
本技術利用酶法不對稱還原8-氯-6-羰基辛酸乙酯制備 (S)-8-氯-6-羥基辛酸乙酯，再結合化學法合成 (R)-硫辛酸的工藝路線 (化學-酶法合成途徑) ，可使 (R)-硫辛酸的合成步驟由化學-拆分法的9步縮減到化學-酶法的6步、產品收率提高40%、生產成本降低20%，而且也顯著地減少了原料消耗和廢物排放，是典型的環境友好的綠色合成工藝。合成的最終產品 (R)-硫辛酸的光學純度在99%以上，其產業化更具有經濟效益、更符合綠色技術的要求。
華東理工大學
2021-04-13
氯吡格雷手性前體(R)-鄰氯扁桃酸甲酯的酶法制備
氯吡格雷 (Clopidogrel) ，商品名波立維 (Plavix) ，是抑制血小板聚集的藥物。年銷售額超過百億美元，是目前世界上排名第二位的重磅炸彈級藥物。
(R)-鄰氯扁桃酸甲酯是氯吡格雷原料藥合成的重要前體化合物，酶促鄰氯苯甲酰甲酸甲酯不對稱還原是制備 (R)-鄰氯扁桃酸甲酯的重要方法，具有轉化率高、產品光學純度好、環境污染小等顯著優點。
本項目我們通過廣泛篩選，獲得一個高立體選擇性的羰基還原酶，將其與葡萄糖脫氫酶共克隆表達于大腸桿菌中，使用重組大腸桿菌整細胞在單水相體系中高效催化鄰氯苯甲酰甲酸甲酯的不對稱還原，使用廉價的葡萄糖作為輔底物，反應體系中無需額外添加價格昂貴的輔酶，反應體系簡便，原料成本低廉。底物濃度可高達600 g/L，完全轉化，產物 (R)-鄰氯扁桃酸甲酯的得率高于90%，光學純度高于99.9%。具有很好的產業化前景。
華東理工大學
2021-04-13
他汀側鏈(S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯的酶法制備
阿托伐他汀，又名立普妥，能夠降低血漿膽固醇和脂蛋白水平，是目前世界銷售排名首位的重磅炸彈級藥物，年銷售額超過百億美元。
(S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯是阿伐他汀手性側鏈合成的重要前體化合物，酶促4-氯-乙酰乙酸乙酯不對稱還原是制備 (S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯的重要方法，具有轉化率高、產品光學純度好、環境污染小等顯著優點。
本項目我們通過廣泛篩選，獲得一個高立體選擇性的羰基還原酶ScCR，該酶可以在有機/水兩相體系中高效催化4-氯-乙酰乙酸乙酯的不對稱還原，使用廉價的異丙醇作為輔底物，無需額外添加輔酶再生用酶，反應體系簡單。使用含該酶的大腸桿菌整細胞作為催化劑，底物濃度可高達600 g/L，完全轉化，產物 (S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯的得率達96%，光學純度高于99%。具有很好的產業化前景。
華東理工大學
2021-04-13
用于檢測甲睪酮的單克隆抗體及酶聯免疫技術與試劑盒
該項目研制了一種能識別甲睪酮的特異性單克隆抗體, 它是由保藏號為CCTCC NO:C201493的雜交瘤細胞株MT9C10所分泌的。形成的檢測甲睪酮的酶聯免疫技術和試劑盒，與現有技術相比，制備的單克隆抗體可以識別甲睪酮，識別靈敏度高，特異性好，該項目ELISA技術和試劑盒檢測靈敏度、準確度高，精密度好。
甲睪酮是一種人工合成的甾體類雄激素，具有環戊烷多氫菲的基本結構，在獸醫臨床上，甲睪酮被大量應用在畜牧養殖業中，能夠促進蛋白質的合成和骨骼肌的生長，通過抑制脂肪的增長，從而使肌肉變發達，并且能夠刺激動物對食物的欲望，使動物的日增重提高，同時大大提高了飼料的利用效率。
成果完成時間：2017年
華中農業大學
2021-01-12