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特異抑制沙眼衣原體的優(yōu)化重組噬菌體蛋白的制備與應用
相關專利制備出一種對衣原體的生長具有明顯的特異抑制作用。該蛋白對沙眼衣原體有確切的特異的清除效果應用范圍:沙眼衣原體引起的泌尿生殖道感染的發(fā)病率居性傳播疾病之首，是美國最常見的疾病之一，在全部人群中感染占 10-19%，是引起前列腺炎和盆腔炎最主要的致病菌，可導致不孕和異位妊娠。目前臨床上沙眼衣原體的治療以抗生素為主，不僅治療效果不令人滿意，而且引起菌群失調，抵抗力下降等眾多的問題。 經過進一步的人體實驗，這種衣原體噬菌體蛋白可以轉化為臨床最為需求的、國際上首創(chuàng)的最新生物治療，特異性應用于臨床沙眼衣原體感染的治療。效益分析:基于相關專利開發(fā)應用在沙眼衣原體生殖道感染的生物治療。 一、主要技術優(yōu)勢：分子量約 50kDa 的蛋白片段，免疫原性低，更容易進入組織深層，制造成本低； 二、抑制率可達 65%-92%，對各型衣原體標準株和臨床病人中分離株。 三、這種良好的效果在生殖道衣原體感染小鼠模型中得到了驗證
天津醫(yī)科大學
2021-04-10
復合物理場協(xié)同強化菜籽蛋白糖基化改性的方法
其他成果/n一種復合物理場協(xié)同強化菜籽蛋白糖基化改性的方法，包括如下步驟：1)菜籽蛋白的制備；2)菜籽蛋白溶液的配制；3)蛋白質?糖混合溶液的配制；4)微波?超聲波復合物理場協(xié)同處理；5)離心分離；6)透析與干燥。其中，步驟3)中，微波的功率為200～500W，超聲波的功率為100～300W，反應體系的溫度為60～70℃，反應時間為6～10min。本發(fā)明利用微波快速加熱效應和超聲波的機械攪拌與加速擴散作用，可避免反應體系出現(xiàn)局部高溫現(xiàn)象，使糖基化反應更為均勻；同時微波的電磁場與超聲波的空穴作用會在反應體系中形成超臨界高溫與高壓的微環(huán)境及界面濃縮現(xiàn)象，從而避免傳統(tǒng)濕熱法下由于長時間持續(xù)高溫作用而產生褐變物質，消除了色澤對產品的影響。
武漢輕工大學
2021-04-11
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復合蛋白酶解提取鴨硫酸軟骨素技術
本技術首先根據(jù)鴨胸軟骨的化學組成設計了一種用于提取鴨硫 酸軟骨素的新型復合蛋白酶的基礎配方，并利用復配酶制備鴨硫酸軟骨素，其 工藝包括鴨胸軟骨骨粉的制備、鴨胸軟骨骨粉的酶解提取、蛋白質的沉降、硫 酸軟骨素粉末四個步驟。本發(fā)明采用了復配酶解法提取鴨胸軟骨的硫酸軟骨素， 采用新型復合蛋白酶和胰蛋白酶復配，去掉了堿提這一步，在復配酶使用上也 進行了優(yōu)化，其收率比其它方法提高了 20%左右，產品純度達到 90%~95%。用復 合酶代替稀堿或濃堿解離軟骨能夠大大降低對環(huán)境的污染，并且可以有效縮短 生產周期、降低生產成本、增加了產品收率、提高產品質量，填補了該領域的 空白。 技術優(yōu)點或者效益預測:硫酸軟骨素(Chondroitinsulfate，CS)是 D-葡萄糖 醛酸和 N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷鍵連接而成的重復二糖單位組成的酸 性黏多糖。硫酸軟骨素具有抗凝血、抗炎癥、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降血 脂、防止動脈粥樣硬化、調節(jié)體內水分、清除自由基和延緩衰老等多種生理功 能，可應用于食品、藥品、各種保健品及高檔化妝品中。我國是全球硫酸軟骨 素產量最大的國家，占全球產量的 80%以上，年平均產量多于 4000 噸；我國硫 酸軟骨素主要出口到美國、歐洲、日本等地，其中美國作為我國硫酸軟骨素第 一大出口市場，出口份額約占 50%。所以，隨著硫酸軟骨素生物活性功能不斷研 究及其應用領域的不斷擴展，硫酸軟骨素用途越來越廣，具有廣闊市場應用前 景。
青島農業(yè)大學
2021-04-11
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一種具有ACE抑制功能的魚肉蛋白肽及其制備方法
本發(fā)明提供了一種具有ACE抑制功能的魚肉蛋白肽及其制備方法，屬于食品加工技術領域。本發(fā)明的魚肉蛋白肽制備方法包括：(1)制備去脂的魚肉漿液；(2)調節(jié)魚肉漿液溫度和pH值1?3，加入胃蛋白酶酶解；(3)調節(jié)溫度和pH值為6.5?8.0，加復合蛋白酶酶解；(4)酶解液高溫下保溫后冷至室溫，離心并取上清液通過二步超濾法處理；(5)濾液過柱分離，收集洗脫峰，即得。本發(fā)明方法適于產業(yè)化生產，不添加任何添加劑，制得的魚肉蛋白肽具有優(yōu)異的ACE抑制功能，IC50小于0.34mg/mL，肽中分子量小于1000D的肽比例為95％以上，易吸收，可廣泛應用于特需食品和營養(yǎng)食品的制造。
中國農業(yè)大學
2021-04-11
揭示鈣周期素結合蛋白CACYBP促進肝癌生長增殖新機制
研究人員運用生物信息學分析疊加肝癌隊列標本驗證證實CACYBP在肝癌組織中高表達，且高表達CACYBP的肝癌病人總生存時間及無疾病進展時間更短，預后更差；而通過體外細胞實驗及小鼠模型發(fā)現(xiàn)缺失CACYBP的肝癌細胞株在體內和體外的生長增殖能力顯著減弱。為了研究CACYBP調控肝癌生長的分子機制，研究人員利用串聯(lián)親和純化連用質譜技術，首次鑒定出環(huán)指蛋白41（RNF41）與CACYBP相互作用，并通過泛素化實驗及放線菌酮追蹤檢測證實RNF41為CACYBP上游特異的E3泛素連接酶，在肝癌細胞中促進CACYBP的降解，且兩者在肝癌組織中的表達呈顯著負相關。進一步研究發(fā)現(xiàn)，CACYBP促進Ser10磷酸化使P27Kip1存留在胞漿中，從而加速細胞周期，促進肝癌細胞生長增殖，而RNF41對這一過程具有抑制作用。 該研究結合生物信息學分析、肝癌隊列標本、細胞功能及分子機制驗證，一方面揭示了CACYBP促進肝癌生長增殖的上下游分子機制，另一方面為開發(fā)新型肝癌診療靶點提供了理論依據(jù)。
中山大學
2021-04-13
具有時間分辨率的活體蛋白質激活技術
提出并發(fā)展了一種蛋白質“鄰近脫籠”策略，將可遺傳編碼的非天然氨基酸脫籠技術與計算機輔助設計篩選技術相結合，在一系列不同種類的蛋白質上實現(xiàn)了高時間分辨的原位激活，為在活細胞及活體動物內研究蛋白質的動態(tài)調控機制提供了一種普適性技術。利用這一被命名為 CAGE-prox 的新方法，他們建立并驗證了“激酶正交激活和信號轉導調控”、 “時間分辨的蛋白質組學分析”，“基于毒素蛋白的抗腫瘤蛋白前藥”等一系列原創(chuàng)應用，展示了這一化學生物學新技術在開展蛋白質動態(tài)功能研究與調控中的優(yōu)勢和特色。“化學脫籠”策略，可通過對蛋白質關鍵殘基的化學保護和脫保護反應，實現(xiàn)對其活性的“關－開”調控（Nat. Chem. Biol. 2016, 12, 129）。利用這一技術，他們先后在賴氨酸（Nat. Chem., 2014, 6, 352; Nat. Chem. Biol., 2014, 10, 1003）、酪氨酸（J. Am. Chem. Soc., 2016, 138, 15118）等天然氨基酸側鏈上實現(xiàn)了生物正交斷鍵反應和化學脫籠，開展了激酶等蛋白質家族的特異激活和機制研究（ACS Cent. Sci, 2016, 2, 325，ACS Cent. Sci. 2019, 5, 145）。由于細胞內蛋白質的種類繁多、活性調控機制各異，目前該方法仍受可供脫籠的氨基酸種類限制，無法適用于所有蛋白質。
北京大學
2021-04-11
自噬關鍵蛋白ATG4B抑制劑的篩選及活性
通過計算機虛擬篩選和建立熒光共振能量轉移的體外高通量篩選體系，篩選得到新型的ATG4B小分子抑制劑S130。通過對自噬信號通路的研究，發(fā)現(xiàn)S130不影響自噬體功能及其與溶酶體的融合，而是抑制了LC3-PE的去脂化過程，最終阻斷細胞自噬。這為進一步明確ATG4B在自噬信號通路中的調控作用提供了新的理論基礎。通過抗腫瘤作用的研究，發(fā)現(xiàn)S130可有效抑制結腸癌細胞的生長，且營養(yǎng)缺乏能進一步增強S130的抗腫瘤效果，而過表達ATG4B可部分對抗S130引起的腫瘤細胞死亡，提示ATG4B可能是腫瘤治療中的潛在靶點。同時，藥代動力學實驗結果表明，該抑制劑在體內主要分布于腫瘤組織，從而抑制結腸癌細胞的生長。綜上，該研究表明ATG4B可能是腫瘤治療的潛在藥物靶標，而S130作為高效的ATG4B小分子抑制劑具有開發(fā)成為腫瘤治療藥物的潛能。
中山大學
2021-04-13
一種C型凝集素編碼基因及其蛋白制備和應用
本發(fā)明涉及分子微生物學領域，具體的說是一種C型凝集素(C-type?lectin)及其制備和應用。C型凝集素為序列表SEQ?ID?No.1中的氨基酸序列所示。制備方法：以許氏平鮋cDNA為模板PCR擴增C型凝集素基因，構建質粒pLecC；將pLecC轉化大腸桿菌BL21Transetta(DE3)，對轉化子進行誘導表達后，收集上清，濃縮后即得重組C型凝集素。所述C型凝集素對多種弧菌具高效凝集作用，經C型凝集素處理后的細菌對許氏平鮋的侵染能力顯著降低。因此，該C型凝集素有望應用于魚類細菌性病害的防治。
青島農業(yè)大學
2021-04-13
用種子蛋白質基因工程改良超大穗小麥的品質
本項目是采用種子蛋白質基因工程手段，將富含賴氨酸的豌豆球蛋白基因（Vicilingene）轉入超大穗小麥體內并令其表達，以期大幅度提高超大穗小麥的種子蛋白質含量和賴氨酸含量，改良超大穗小麥的營養(yǎng)品質和加工品質，使超大穗小麥盡快成為大面積推廣種植的超高產優(yōu)質小麥良種。其次，本項研究將豐富分子遺傳學理論并開辟一條高蛋白品質育種的新途徑，所
西安交通大學
2021-01-12
結核桿菌蛋白酶體調控復合體ATPase作用機理
Mpa六聚體除了與真核生物蛋白酶體調節(jié)顆粒Rpt1-Rpt6蛋白六聚體以及古細菌PAN蛋白六聚體具有一定的結構同源性之外，還具有一些明顯不同的結構特征：（1）結核桿菌Mpa具有形成雙環(huán)的兩個串聯(lián)寡核苷酸/寡糖結合（OB）結構域，而古細菌蛋白酶體相關ATPase調控顆粒（PAN）和真核生物蛋白酶體ATPase調控顆粒復合體（Rpt1-6）每個蛋白亞基都只具有單個OB結構域；（2）Mpa在具有蛋白酶體活化功能的C末端之前具有一個泛素樣的β-grasp結構域，而古細菌PAN和真核生物Rpt1-6蛋白復合體并不具有這樣的一個β-grasp結構域? 由于β-grasp結構域的存在，Mpa六聚體中各個蛋白亞基C末端被埋在結構核心中而沒有暴露在蛋白復合體結構的表面，這就影響了C末端的GQYL基序與20S 蛋白酶體復合體的對接，從而阻礙了六聚化的Mpa與七次對稱的28聚體的蛋白酶體相互作用。我們通過功能研究進一步解釋了為什么單獨的Mpa六聚體在體外情況下不能有效結合蛋白酶體核心顆粒并啟動蛋白質特異性降解，結合晶體結構域功能研究，我們提出了結核桿菌蛋白酶體ATPase調控顆粒Mpa與20S蛋白酶體復合體這一分子量超過1100KDa蛋白質機器的作用模型
南方科技大學
2021-04-13