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南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院氮素連續(xù)流動分析儀及樣品制備系統(tǒng)等采購項(xiàng)目招標(biāo)

一步酶法從頭孢菌素 c（CPC） 生產(chǎn) 7－氨基頭孢烷酸（ 7-ACA） 是繼我們研發(fā)的兩步酶法工藝成功應(yīng)用于工1 成果簡介一步酶法從頭孢菌素 c（CPC） 生產(chǎn) 7－氨基頭孢烷酸（ 7-ACA） 是繼我們研發(fā)的兩步酶法工藝成功應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)以后，在生產(chǎn)頭孢菌素類抗生素醫(yī)藥中間體技術(shù)的又一個(gè)突破。與化學(xué)法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環(huán)保和轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)采用基因工程技術(shù)對 CPC 酰化酶（一步酶法用酶）的基因進(jìn)行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構(gòu)建的高效啟動子 HP 以及優(yōu)化組合的調(diào)控表達(dá)元件，構(gòu)建并篩選出了能夠高效、高活性表達(dá)一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細(xì)胞株。這是國內(nèi)第一個(gè)使得 CPC 酰化酶活性能夠達(dá)到工業(yè)應(yīng)用水平的技術(shù)。由于采用了高效的表達(dá)系統(tǒng)和穩(wěn)定的質(zhì)粒，以及組成型表達(dá)結(jié)構(gòu)，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩(wěn)定，在發(fā)酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導(dǎo)劑就可以實(shí)現(xiàn)高效、高活性表達(dá)。在高效表達(dá) CPC 酰化酶的基礎(chǔ)上，我們通過在表達(dá)基因上同時(shí)引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進(jìn)行。通過自己開發(fā)研制的可重復(fù)使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達(dá)到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質(zhì)，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達(dá)到 60U/g 以上。固定化酶可以重復(fù)使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復(fù)使用。2 技術(shù)指標(biāo)菌 種：基因工程大腸桿菌，卡那抗性，組成型表達(dá)。 發(fā)酵溫度： 37℃ 培 養(yǎng) 基：普通的大腸桿菌培養(yǎng)基，主要成分有玉米漿等廉價(jià)的營養(yǎng)源。 發(fā)酵周期： 20 小時(shí) 發(fā)酵酶活： 3U/ml 以上（ 5 升發(fā)酵罐） 特 點(diǎn)：遺傳特性穩(wěn)定，不需要添加誘導(dǎo)劑和抗生素，工藝簡單。3 合作方式小試技術(shù)轉(zhuǎn)讓或合作進(jìn)行中試。4 所屬行業(yè)領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生。業(yè)生產(chǎn)以后，在生產(chǎn)頭孢菌素類抗生素醫(yī)藥中間體技術(shù)的又一個(gè)突破。與化學(xué)法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環(huán)保和轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)采用基因工程技術(shù)對 CPC 酰化酶（一步酶法用酶）的基因進(jìn)行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構(gòu)建的高效啟動子 HP 以及優(yōu)化組合的調(diào)控表達(dá)元件，構(gòu)建并篩選出了能夠高效、高活性表達(dá)一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細(xì)胞株。這是國內(nèi)第一個(gè)使得 CPC 酰化酶活性能夠達(dá)到工業(yè)應(yīng)用水平的技術(shù)。由于采用了高效的表達(dá)系統(tǒng)和穩(wěn)定的質(zhì)粒，以及組成型表達(dá)結(jié)構(gòu)，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩(wěn)定，在發(fā)酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導(dǎo)劑就可以實(shí)現(xiàn)高效、高活性表達(dá)。在高效表達(dá) CPC 酰化酶的基礎(chǔ)上，我們通過在表達(dá)基因上同時(shí)引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進(jìn)行。通過自己開發(fā)研制的可重復(fù)使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達(dá)到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質(zhì)，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達(dá)到 60U/g 以上。固定化酶可以重復(fù)使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復(fù)使用。

一步酶法從頭孢菌素c（ CPC） 生產(chǎn)7－氨基頭孢烷酸（7-ACA） 是繼我們研發(fā)的兩步酶法工藝成功應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)以后，在生產(chǎn)頭孢菌素類抗生素醫(yī)藥中間體技術(shù)的又一個(gè)突破。與化學(xué)法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環(huán)保和轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)采用基因工程技術(shù)對 CPC 酰化酶（一步酶法用酶）的基因進(jìn)行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構(gòu)建的高效啟動子 HP 以及優(yōu)化組合的調(diào)控表達(dá)元件，構(gòu)建并篩選出了能夠高效、高活性表達(dá)一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細(xì)胞株。這是國內(nèi)第一個(gè)使得 CPC 酰化酶活性能夠達(dá)到工業(yè)應(yīng)用水平的技術(shù)。由于采用了高效的表達(dá)系統(tǒng)和穩(wěn)定的質(zhì)粒，以及組成型表達(dá)結(jié)構(gòu)，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩(wěn)定，在發(fā)酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導(dǎo)劑就可以實(shí)現(xiàn)高效、高活性表達(dá)。在高效表達(dá) CPC 酰化酶的基礎(chǔ)上，我們通過在表達(dá)基因上同時(shí)引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進(jìn)行。通過自己開發(fā)研制的可重復(fù)使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達(dá)到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質(zhì)，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達(dá)到 60U/g 以上。固定化酶可以重復(fù)使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復(fù)使用。

對碳纖維布加固鋼筋混凝土梁、柱、框架節(jié)點(diǎn)及框架結(jié)構(gòu)等的受力性能進(jìn)行了系統(tǒng)地試驗(yàn)研究、機(jī)理分析和三維非線性力學(xué)計(jì)算，為混凝土結(jié)構(gòu)補(bǔ)強(qiáng)固技術(shù)提供了理論依據(jù)。針對歷史保護(hù)建筑的特點(diǎn)，研究了多種荷載組合作用下歷史保護(hù)建筑的破壞機(jī)理、衰變規(guī)律、剩余壽命及可靠性，并對在役歷史保護(hù)建筑物的檢測鑒定與加固技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)地試驗(yàn)研究。本項(xiàng)研究獲得了上海市科技進(jìn)步三等獎(jiǎng) 1 項(xiàng)，華夏建設(shè)科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)三等獎(jiǎng) 1 項(xiàng)

新型單洞雙線城市軌道交通類矩形盾構(gòu)隧道修建成套關(guān)鍵技術(shù)產(chǎn)業(yè)化及應(yīng)用。 一、項(xiàng)目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、成果簡介 我國城市軌道交通建設(shè)正面臨地下空間資源日漸稀缺的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，面對集約型開發(fā)要求，常規(guī)的圓形盾構(gòu)隧道法已不能適應(yīng)， 類矩形截面不同于矩形截面和橢圓形截面，嚴(yán)格的矩形斷面空間利用率最高，但其主要面臨著機(jī)械開挖困難、矩形轉(zhuǎn)角部位管片結(jié)構(gòu)受力不合理等問題；橢圓形隧道可有效避免以上矩形隧道出現(xiàn)的問題，但其空間利用率相對較低。類矩形斷面就是對以上兩種斷面類型的折中，以求綜合其優(yōu)點(diǎn)，規(guī)避其缺點(diǎn)。 本項(xiàng)目成果已實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化和規(guī)模化，形成從技術(shù)開發(fā)、裝備制造、施工工法、配套施工工藝、后評價(jià)體系等在內(nèi)的全套關(guān)鍵技術(shù)。目前已生產(chǎn)異形盾構(gòu)12臺套，分別在上海、杭州、南京、鄭州、寧波、舟山等地開展了成功應(yīng)用，累計(jì)完成掘進(jìn)30km，為當(dāng)?shù)爻鞘熊壍澜煌üこ探ㄔO(shè)提供了有效的技術(shù)支撐。

本發(fā)明公開了季銨鹽型陽離子聚電解質(zhì)-陰離子表面活性劑復(fù)合物的制備方法及用途。首先采用溶液滴定絡(luò)合的方式制備季銨鹽型陽離子聚電解質(zhì)-陰離子表面活性劑復(fù)合物，后將其溶解在有機(jī)溶劑中，將其涂覆在支撐層上，烘干得到季銨鹽型陽離子聚電解質(zhì)-陰離子表面活性劑復(fù)合物滲透汽化優(yōu)先透醇膜。季銨鹽型陽離子聚電解質(zhì)-陰離子表面活性劑復(fù)合物內(nèi)部的離子交聯(lián)結(jié)構(gòu)能夠有效抑制該滲透汽化透醇膜在醇/水料液中的過度溶脹，保持膜的穩(wěn)定性；同時(shí)，表面活性劑的疏水長鏈和聚電解質(zhì)的疏水主鏈，能提供膜對醇的優(yōu)先選擇吸附。因此，該類優(yōu)先透醇膜制膜方法簡單易行、成本低廉，具有良好的工業(yè)化應(yīng)用前景。