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胃癌在世界范圍內(nèi)和我國(guó)均是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，根據(jù)世界 衛(wèi)生組織公布的全球統(tǒng)計(jì)報(bào)告[1]，全球新發(fā)胃癌 98,9000 例，發(fā)病率 為 17.6/10 萬(wàn)人，僅次于肺癌居第二位。早期胃癌是病灶局限于胃黏 膜和黏膜下層，不考慮是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因無(wú)明顯癥狀和局部體征， 常不足以引起患者和醫(yī)師的足夠重視而發(fā)生誤診或漏診。 目前，制備腫瘤細(xì)胞單鏈 DNA 適配子的方法主要涉及到隨機(jī)單 鏈 DNA 文庫(kù)和引物的構(gòu)建、聚合酶

本發(fā)明提供了一種提高小球藻在養(yǎng)豬廢水中生物量的方法，屬于微生物應(yīng)用領(lǐng)域。本發(fā)明將保藏編號(hào)為CGMCC NO.9225的小球藻與保藏編號(hào)為CGMCC NO.7724的類(lèi)芽孢桿菌共培養(yǎng)于養(yǎng)豬廢水中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)類(lèi)芽孢桿菌能夠顯著提高小球藻在養(yǎng)豬廢水中的生物量，促進(jìn)作用達(dá)1.6倍。本發(fā)明方法解決了養(yǎng)豬廢水處理問(wèn)題，降低環(huán)境污染，類(lèi)芽孢桿菌的加入改善了養(yǎng)豬廢水中水體微環(huán)境，顯著提高小球藻生物量，降低了微藻生物柴油的生產(chǎn)成本，取得較好的經(jīng)濟(jì)效益，具有良好的市場(chǎng)應(yīng)用前景。

該項(xiàng)目是在國(guó)家自然科學(xué)基金《肌球蛋白輕鏈激酶基因調(diào)控在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移中作用》和《肌球蛋白輕鏈激酶在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用及其分子機(jī)理研究》項(xiàng)目的資助下完成的。目前，正在應(yīng)用高轉(zhuǎn)移傾向的人乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行腫瘤轉(zhuǎn)移分子機(jī)理的研究。/line腫瘤的侵襲與移轉(zhuǎn)是惡性腫瘤最基本的生物學(xué)特性之一，也是腫瘤患者死亡的重要原因。然而，有關(guān)轉(zhuǎn)移的確切機(jī)制目前尚不十分清楚。因此，腫瘤轉(zhuǎn)移一直是腫瘤學(xué)研究的一個(gè)熱點(diǎn)。建立理想的腫瘤轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型對(duì)深入進(jìn)行腫瘤轉(zhuǎn)移的研究具有重要的意義。SCID鼠為嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（Severecombinedimmunodeficiency，SCID）鼠，幾乎完全喪失T和B淋巴細(xì)胞免疫功能，缺乏體液和細(xì)胞免疫功能。本方法2003年6月27日申請(qǐng)了國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利，申請(qǐng)?zhí)枺?3130264.5，我們應(yīng)用SCID鼠腫瘤轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型，從乳腺癌細(xì)胞系MCF-7篩選到了一株具有高轉(zhuǎn)移傾向的乳腺癌細(xì)胞株，命名為L(zhǎng)M-MCF-7，為乳腺癌MCF-7細(xì)胞的轉(zhuǎn)移亞克隆。/line技術(shù)指標(biāo)和成熟程度：本發(fā)明采用含有小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液培養(yǎng)LM-MCF-7細(xì)胞，使其能體外長(zhǎng)期生長(zhǎng)和穩(wěn)定傳代。經(jīng)實(shí)驗(yàn)觀(guān)察與驗(yàn)證，體外生長(zhǎng)的LM-MCF-7具有典型的上皮樣形態(tài)，接觸生長(zhǎng)抑制喪失。遺傳學(xué)研究證實(shí)該細(xì)胞為異倍體，染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)畸變嚴(yán)重，符合惡性腫瘤的遺傳學(xué)特征。該細(xì)胞SCID鼠接種成瘤率為100％，與MCF-7細(xì)胞相比成瘤早，轉(zhuǎn)移快，轉(zhuǎn)移臟器范圍更廣泛。經(jīng)檢測(cè)，LM-MCF-7細(xì)胞系仍保留瘤組織原有的生物學(xué)特性，它的建立可為乳腺癌轉(zhuǎn)移機(jī)制的基礎(chǔ)研究和臨床的干預(yù)研究提供理性的配對(duì)細(xì)胞模型。

【發(fā) 明 人】徐力，鹿競(jìng)文【技術(shù)領(lǐng)域】本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗乳腺癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的中藥復(fù)方及其制備方法和應(yīng)用?！菊勘景l(fā)明公開(kāi)了一種抗乳腺癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的中藥復(fù)方，它包含如下重量份數(shù)的組分：柴胡8~10份、白芍8~15份、當(dāng)歸8~10份、法半夏8~10份、橘核8~10份、夏枯草8~10份、浙貝母8~10份、生牡蠣10~30份、八月札8~10份、山慈菇5~10份、莪術(shù)8~10份、生苡仁8~30份、炮山甲8~10份、露蜂房8~10份、蛇六谷9~15份、紅豆杉8~10份，生甘草3~6份。本發(fā)明還公開(kāi)了上述中藥復(fù)方的制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明的抗乳腺癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的中藥復(fù)方針對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的“肝郁化火，痰瘀毒結(jié)，氣血兩虛”基本病機(jī)，疏肝解郁、消痰散瘀、清熱解毒、益氣養(yǎng)血，能明顯降低乳腺癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率，臨床具有確切功效。

乳腺癌是女性健康的“頭號(hào)殺手”。最新調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，平均每3分鐘世界上就有一位婦女被診斷為乳腺癌，我國(guó)女性乳腺癌的發(fā)病率和死亡率也是逐年上升，目前已位居女性惡性腫瘤發(fā)病率之首。其中，雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）和原癌基因Her-2均為陰性的三陰性乳腺癌（TNBC），是一種高危型乳腺癌，具有獨(dú)特的臨床病理和分子特征，轉(zhuǎn)移性強(qiáng)、患者預(yù)后較差，其對(duì)內(nèi)分泌治療不敏感，尚無(wú)有效治療藥物。課題組新發(fā)現(xiàn)孤兒核受體Nur77在三陰性乳腺癌中具有重要的作用，是一個(gè)治療三陰性乳腺癌藥物開(kāi)發(fā)的靶點(diǎn)。項(xiàng)目組篩選以核

成果創(chuàng)新點(diǎn) 首個(gè) CENP-E 馬達(dá)驅(qū)動(dòng)域結(jié)合的有機(jī)小分子化合物 Syntelin，對(duì)實(shí)驗(yàn)性乳腺癌的有較好的治療作用，可用于 制備抑制腫瘤細(xì)胞增殖藥物。對(duì)實(shí)驗(yàn)性乳腺癌的有較好的 治療作用，可用于制備抑制腫瘤細(xì)胞增殖藥物。 技術(shù)成熟度 關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)階段 轉(zhuǎn)化計(jì)劃 轉(zhuǎn)讓 所需支持 預(yù)計(jì)所需資金 5000 萬(wàn)

首個(gè) CENP-E 馬達(dá)驅(qū)動(dòng)域結(jié)合的有機(jī)小分子化合物 Syntelin，對(duì)實(shí)驗(yàn)性乳腺癌的有較好的治療作用，可用于制備抑制腫瘤細(xì)胞增殖藥物。對(duì)實(shí)驗(yàn)性乳腺癌的有較好的治療作用，可用于制備抑制腫瘤細(xì)胞增殖藥物。 

多發(fā)性骨髓瘤(Multiple myeloma，MM)和三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)是兩種截然不同的腫瘤類(lèi)型，據(jù)之前統(tǒng)計(jì)和預(yù)測(cè)，2018年僅在美國(guó)兩者合計(jì)有大于7萬(wàn)例新增病例，并導(dǎo)致超過(guò)1.6萬(wàn)人死亡（American Cancer Society 2018 Facts and Figures）。MM起源于惡性漿細(xì)胞增殖, 而TNBC則是一種由缺乏雌激素、孕酮和HER2受體導(dǎo)致的對(duì)大多數(shù)激素療法具有耐藥性的高度轉(zhuǎn)移性乳腺癌。盡管MM和TNBC在生理表現(xiàn)或目前的藥物干預(yù)方面沒(méi)有明顯的相似之處，但它們都依賴(lài)于26S蛋白酶體功能來(lái)維持正常的腫瘤生存。這一依賴(lài)性也成為了TNBC和MM的“阿喀琉斯之踵”。FDA已經(jīng)批準(zhǔn)bortezomib、carfilzomib和ixazomib等數(shù)個(gè)蛋白酶體抑制劑以治療MM，但這類(lèi)藥物的使用通常會(huì)導(dǎo)致癌癥耐藥性與復(fù)發(fā)，最終使治療失敗，因此亟需開(kāi)發(fā)克服耐藥的新的治療方法。  26S蛋白酶體在其不同的亞基上有>300個(gè)保守的磷酸化位點(diǎn)，但參與相關(guān)修飾的激酶和磷酸酶還遠(yuǎn)未獲得充分研究。美國(guó)UCSD的Dixon課題組之前研究發(fā)現(xiàn)雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)控激酶2（DYRK2）是一個(gè)蛋白酶體調(diào)控激酶（X. Guo et al., Nature Cell Biology 18, 202-212 (2016)）。它磷酸化蛋白酶體RPT3亞基上的Thr25位點(diǎn)，增強(qiáng)蛋白酶體活性；抑制這一磷酸化過(guò)程則顯著降低蛋白酶體活性，進(jìn)而導(dǎo)致TNBC小鼠異種移植模型中腫瘤細(xì)胞周期進(jìn)展受阻、生長(zhǎng)減緩（S. Banerjee et al., PNAS 115, 8155-8160 (2018)）。本工作驗(yàn)證了蛋白酶體調(diào)節(jié)因子DYRK2作為多發(fā)性骨髓瘤和三陰性乳腺癌的治療靶標(biāo)的可行性，并報(bào)道了一種高效、高選擇性的DYRK2小分子抑制劑，在細(xì)胞與動(dòng)物水平驗(yàn)證了該分子的抑癌作用。由于使用了抑制蛋白酶體調(diào)節(jié)因子這一新穎的機(jī)制，該小分子抑制劑可以克服多發(fā)性骨髓瘤和三陰性乳腺癌對(duì)蛋白酶體抑制劑產(chǎn)生的耐藥性。該工作表明靶向26S蛋白酶體調(diào)節(jié)因子有望成為針對(duì)多發(fā)性骨髓瘤和三陰性乳腺癌的新治療策略，為克服腫瘤耐藥性難題提供了新的思路。目前，雷曉光、肖俊宇課題組正在與北大人民醫(yī)院路瑾醫(yī)生的團(tuán)隊(duì)緊密合作，進(jìn)一步積極推進(jìn)針對(duì)臨床中多藥耐藥的多發(fā)性骨髓瘤的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究與臨床前候選藥物開(kāi)發(fā)。

該研究是評(píng)價(jià)吡咯替尼聯(lián)合卡培他濱治療HER2陽(yáng)性乳腺癌腦轉(zhuǎn)移療效和安全性的首個(gè)前瞻性臨床研究，也是首個(gè)根據(jù)乳腺癌腦轉(zhuǎn)移既往是否接受過(guò)腦部局部放療，分為兩個(gè)獨(dú)立隊(duì)列進(jìn)行的前瞻性臨床研究，為乳腺癌腦轉(zhuǎn)移患者的臨床治療帶來(lái)了新的啟示。

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年乳腺癌 的發(fā)病人數(shù)約有 120 萬(wàn)人，約 50 萬(wàn)人死于乳腺癌。乳腺癌屬全身性 疾病，綜合治療非常關(guān)鍵，其中化療是不可替代的重要手段之一。然 而多藥耐藥常導(dǎo)致治療失敗及后期腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重威脅患者 生存。腫瘤細(xì)胞在化療中產(chǎn)生的耐藥性常表現(xiàn)為多藥耐藥，即同時(shí)對(duì) 多種結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制不同的化療藥物產(chǎn)生交叉耐藥的現(xiàn)象，它是化療 失敗的主要原因。近年來(lái)，腫瘤耐藥細(xì)胞株已成