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中試階段/n經過十余年的科研攻關，在酶法制備生物柴油技術上取得多項關鍵 技術突破，形成了酶法生物柴油技術中酶催化劑的規(guī)模化制備、新型反 應介質中復合酶法生物柴油工藝技術的重大突破，對任何油源均具有高 效轉化效率，生物柴油得率均大于 95%以上，特別是對動物油尤其有效， 成本上可比擬現(xiàn)行的化學法工藝，無污染排放，是純粹的綠色制造，其經濟、社會和生態(tài)效益顯著。預計建設 2 萬噸生產線需要 4000 萬元。生物柴油是替代石化柴油等的優(yōu)良品種，具有綠色、可持續(xù)的特點， 為世人所公認，各國均競相發(fā)展。如果其原

已有樣品/n分離自海南紅樹林鏈霉菌所產生的新型水解酶超家族成員A13 具有典型的酰胺酶活性、芳基酰基酰胺酶活性和酰基轉移酶活性，它還具有不同尋常的底物廣泛性，這表明它在化學合成和環(huán)境污染物治理方面具有廣泛的應用前景。該成果為獨立完成，具有完全自主知識產權。在生物體內存在許多非肽類的碳氮鍵的水解反應，該類反應中很多是由腈水解酶超家族中的相關酶催化完成。在工業(yè)生產中，人們往往使用酰胺類化合物作為化學合成的前體，酰胺類化合

研發(fā)階段/n內容簡介：口服溶栓酶腸溶片主要用于心腦血管由于血栓引起的疾病治療，例如腦血栓、心肌梗死、肺血栓等疾病。供醫(yī)藥生產企業(yè)生產。技術原理：豆豉溶栓酶能直接降解血塊中的纖維蛋白，溶解血栓，使血管再通。利用微生物發(fā)酵產酶，經分離純化（鹽析、超濾、干燥），獲得酶活和純度高的溶栓酶，再經制片，包腸溶衣膜，使片劑中的溶栓酶不被胃液中的胃蛋白酶破壞，而在腸中溶解吸收。該項目成果鑒定為國內領先水平。技術指標：1.溶栓酶干粉的酶活達139U/kg(尿激酶單位)；2.腸溶片酶活達11125U/片(尿激酶單位)；

已有樣品/n本項目在已有的頭孢菌素C酰化酶原始序列基礎上，篩選出對頭孢菌素C的活性和穩(wěn)定性均有提高的新型突變體，并進行固定化研究。目前該固定化酶反應轉化率可達99%以上，重復批次在200批左右，還有進一步提升空間。后續(xù)在該突變體基礎上繼續(xù)進行定向進化和固定化研究，進一步提高其反應活性和重復使用批次，以打破韓國的技術壟斷，進一步降低國內7-ACA生產成本。在現(xiàn)有突變體基礎上繼續(xù)進行定向進化和固定化研究，以篩選到活性和穩(wěn)定性更強的突變體。7-ACA目前為國內最大的抗生素原料之一，其全國總產量約為1500

利用水解酶催化的高效、高選擇性以及反應條件溫和等優(yōu)點，在酶促合成藥物、天然產物以及新型高分子藥物方面進行了重要的發(fā)展，所獲得的實驗結果對生物催化的應用和理論研究均有重要意義。主要包括脂肪酶高選擇性催化合成一系列可聚合莽草酸乙烯酯衍生物，具有藥理活性的、水溶性得到提高的酮洛芬糖脂衍生物，一系列烷基取代的苯并咪唑衍生物以及酮洛芬的聚酯前藥等。反應選擇性好，產率高，同時所得到的高分子前藥具有較好的緩釋效果，部分化合物還表現(xiàn)出熱敏性，為其進一步的應用提供更多的基礎。

研究內容 ：本研究采用復合酶法水解蠶蛹蛋白制備免疫調節(jié)活性多 肽，得到最佳的水解工藝條件。在最佳水解條件下，酶解后蛋白質得率為 57.24%，小分子多肽得率為 32.16%。該結果達到了計劃指標，即蛋白質 得率>40%，小分子多肽得率 >20%。另外，本研究探討了水解條件與分子 量大小，分子量大小與免疫調節(jié)活性的關系，同時建立了毛細管凝膠電泳 測定蠶蛹多肽分子的檢測方法。 技術特點 ：本研究

本技術提供了一種易于產業(yè)化制作和一次性使用的用于殘留農藥檢測的酶電極，其制備方法簡單，性能穩(wěn)定，電極的重復性好，重量輕，易于攜帶，適用于敵百蟲檢測傳感器產業(yè)化的實際應用。其優(yōu)點在于：絲網(wǎng)印刷技術是目前制備一次性使用生物傳感器電極的主要方法。工藝成本低，適于產業(yè)化生產中價廉的要求，有利于制成一次性產品，方便客戶。絲網(wǎng)印刷技術靈活性和實用性的特點使其在制作電極時不受形狀、大小等限制，易微型化和集成化，可制成不同規(guī)格的酶電極產品，豐富產品種類。絲網(wǎng)印刷可以進行工

調味品產業(yè)總體上已經經歷了第一代味精、第二代特鮮味精和第三代雞精、 雞粉的發(fā)展過程，而雞汁是在前三代的基礎上，采用現(xiàn)代生物技術和工藝研制的 全新的第四代調味品。市售部分雞汁產品應歸為調配雞汁（如部分廠家濃縮雞汁 產品等），主要是由雞肉濃縮抽提物、淀粉、雞油、鹽、味精、水等經過調配、 熱處理、細化、均質和殺菌等工序處理制成。此類調配雞汁產品與采用酶法制備 的原雞汁相比，一方面在鮮香味、營養(yǎng)價值、加工安全性等存在較大的差距，同 時也不利于下游加工（如雞精加工）企業(yè)充分把控全過程產品質量。

羥喜樹堿 (10-Hydroxycamptothecin, HCPT) 是中國特有珙桐科旱蓮屬落葉植物喜樹( Camptotheca acuminata) 中含有的一種生物堿，在同類抗腫瘤單體中抗癌作用最強。HCPT 可以選擇抑制 DNA 拓撲異構酶 I 的活性，干擾拓撲異構酶催化的 DNA 切斷鏈接反應，使酶與 DNA 斷鏈復合物穩(wěn)定，并抑制切口處的重新接合，因此具有導致 DNA 斷鏈、干擾 DNA 復制的作用，即具有抗腫瘤的作用。臨床主要用于肝癌、頭頸部腫瘤、胃癌、膀胱癌及白血病。 但由于羥基喜樹堿特殊的理化性質：水不溶，脂難溶，內酯環(huán)結構不穩(wěn)定等因素，使得目前臨床應用 HCPT 的半衰期短，療效不夠理想。已上市使用的 HCPT 水針劑及粉針劑，均是將其在堿性 pH 下水解開環(huán)制備成鹽來增加其在水溶液中的溶解度。然而，喜樹堿類藥物的內酯結構是它們作用于靶酶的必要結構，所以 HCPT 羧酸鹽型與內酯型相比，活性顯著降低，毒性增大。另一方面，生物藥劑學研究表明，HCPT 半衰期短，作用維持時間較短，而增加劑量勢必會增加與劑量成正比的毒性反應。此外，與其他抗癌藥物相似，HCPT 對腫瘤細胞與正常細胞的殺傷力均很大，因此研制高效低毒的HCPT新型給藥系統(tǒng)具有重要的意義。 脂質納米粒(Lipid nanoparticles ,LN)系指以天然或合成類脂如三酰甘油等為載體材料, 將藥物包裹或內嵌于類脂核中, 制成粒徑約為50—1000nm 的膠粒給藥系統(tǒng)。除一般微粒載體的靶向特性外，LN還有其它特點：一是采用生理相容性好、毒性低的類脂材料為載體，其對人體的毒副作用很低；二是可采用已有成熟工藝的高壓均質法進行工業(yè)化生產。LN 的水分散系統(tǒng)可以進行高壓滅菌，具有長期的物理化學穩(wěn)定性。因此，LN很適合作為抗癌藥物的靶向給藥載體。 本項目利用磷脂與羥喜樹堿有較好親和性、可形成復合物的性質，以適量磷脂和大豆油為載體材料，制備載藥量高、穩(wěn)定性好的羥喜樹堿脂質納米粒，希望通過納米粒的被動靶向性聚集于肝臟，提高對肝腫瘤的治療效果。目前已經完成制備工藝、質量標準、穩(wěn)定性研究、藥效學研究、非臨床藥代動力學和體內分布研究和安全性評價，整理撰寫好申報資料，即將申報。 通過多批樣品放大試驗結果表明，羥喜樹堿脂質納米粒的制備工藝簡便易行，在現(xiàn)有的脂肪乳生產線上再增加部分設備就完全可以生產出來。其生產成本遠遠低于脂質體的制備。 動物藥效學實驗表明：注射用羥喜樹堿脂質納米粒(0.3~3.0 mg/kg)具有劑量依賴性的抗腫瘤作用。在3.0 mg/kg相同劑量下，注射用羥喜樹堿脂質納米粒的抗腫瘤作用明顯強于羥喜樹堿注射液（P < 0.01）；而1.0 mg/kg注射用羥喜樹堿脂質納米粒組的抑瘤率與3.0 mg/kg羥喜樹堿注射液組沒有統(tǒng)計學差異（P >0.05）。同時，病理組織學檢查顯示，羥喜樹堿納米脂質體組的腫瘤組織以中度壞死為主，其壞死率顯著大于羥喜樹堿注射液組。其結果提示，羥喜樹堿納米脂質體的抗腫瘤活性較羥喜樹堿注射液有顯著提高。 靶向性試驗結果表明，與羥喜樹堿注射液比較，注射用羥喜樹堿脂質納米粒對肝原位荷瘤裸鼠具有良好的肝靶向性和肝原位腫瘤靶向性。