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一、成果簡(jiǎn)介 微生物飼料添加劑(FeedGradeMicrobialAdditives)是藥物保健促生長(zhǎng)飼料添加劑的最可行替代方案之一。美國(guó)FDA定義為可直接飼喂微生物(DFMS)，又被稱(chēng)為益生素(Probiotics)、益生菌等。它的核心含義是指攝入動(dòng)物體內(nèi)參與腸道內(nèi)微生物平衡的、具有抑制動(dòng)物胃腸道有害微生物群落的作用，或增強(qiáng)非特異或特異性免疫功能，具有預(yù)防疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和提高飼料轉(zhuǎn)化效率的活性微生物制劑。并可以進(jìn)一步與其他輔料(如生物活性多肽

本實(shí)用新型涉及一種采用靜電層層自組裝技術(shù)修飾的生物工程豬角膜。目的是提供的生物工程角膜具有促進(jìn)角膜移植后角膜緣干細(xì)胞、角膜上皮細(xì)胞遷移，提高植片的存活率，加速植片與宿主角膜的融合，加速眼表重建，促進(jìn)視功能恢復(fù)的特點(diǎn)。技術(shù)方案是：一種采用靜電層層自組裝技術(shù)修飾的生物工程豬角膜，其特征在于：該生物工程豬角膜的表面由內(nèi)而外依次反復(fù)沉積有聚陽(yáng)離子層、透明質(zhì)酸層及細(xì)胞趨化因子層，最外層為細(xì)胞趨化因子層。所述聚陽(yáng)離子層厚度為0.5?5nm，透明質(zhì)酸層厚度為0.5?10nm，細(xì)胞趨化因子層厚度為1?10nm。所述聚陽(yáng)離子為殼聚糖或聚賴(lài)氨酸。

在處理高濃度工業(yè)廢水時(shí)，，厭氧折流板反應(yīng)器（ABR)工藝可以在一個(gè)反應(yīng)器內(nèi)實(shí)現(xiàn)一體化的兩相或多相處理過(guò)程，但是，一體化反應(yīng)器內(nèi)污泥濃度低，兩相分離困難，處理效果不穩(wěn)定等問(wèn)題一直阻礙著該技術(shù)的發(fā)展，而本發(fā)明通過(guò) 在傳統(tǒng)ABR反應(yīng)器增設(shè)斜管，通過(guò)斜管區(qū)的污泥沉淀作用，不僅有效減少了污泥流失，而且在酸化反應(yīng)器和甲烷反應(yīng)器斜管區(qū)以下形成了懸浮污泥層，污泥濃度得到提高。實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)酸相和產(chǎn)甲烷相的分離，使得產(chǎn)酸菌和產(chǎn)甲烷菌能在各自的適應(yīng)的生存環(huán)境下生存，能更好的發(fā)揮各自的作用，達(dá)到高效處理廢水的目的。與普通的厭氧折流板反應(yīng)器相比，設(shè)備內(nèi)污泥濃度提高了約5%-12%，COD去除率提高了約5%-10%，更好的改善了污水的處理效果。

水生植物修復(fù)技術(shù)是一種成本少、耗能低、效果好的生物－生態(tài)新技術(shù)，即利用植物的吸收、吸附作用，富集導(dǎo)致水體富營(yíng)養(yǎng)化的氮、磷，降解、富集其它有毒有害污染物，同時(shí)由于水生植物生長(zhǎng)對(duì)藻類(lèi)的抑制作用，使水體中藻類(lèi)數(shù)量降低，提高水體透明度，達(dá)到化害為利、凈化水質(zhì)的目的，實(shí)現(xiàn)水域資源的可持續(xù)發(fā)展和利用。針對(duì)不同生態(tài)環(huán)境污染，從現(xiàn)場(chǎng)環(huán)境中篩選和構(gòu)建具有高效污染修復(fù)的水生植物- 微生物群落體系，更具有針對(duì)性強(qiáng)、適應(yīng)性強(qiáng)、效率高、成本低和對(duì)原有生態(tài)環(huán)境沒(méi)有威脅等優(yōu)點(diǎn)。

本課題研發(fā)用于海洋環(huán)境（海水及水產(chǎn)品）中病毒、致病菌等病原微生物、重點(diǎn)針對(duì)可能引起人類(lèi)疾病的細(xì)菌和病毒（如總桿菌數(shù)、大腸桿菌、糞鏈球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌、腺病毒、腸道病毒、甲肝病毒、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌、沙門(mén)氏菌及李斯特菌）快速檢測(cè)的分子生物技術(shù)，為研制用于這些微生物的現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)手段和設(shè)備奠定理論和技術(shù)基礎(chǔ)。檢測(cè)方法采用基因芯片檢測(cè)、蛋白質(zhì)檢測(cè)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)三種。

本發(fā)明公開(kāi)一種糖蜜基生物質(zhì)磺化碳催化劑的制備方法，包括將固體糖蜜與氫氧化鈉研磨混合后，于惰性氣氛下，在500℃~650℃煅燒，得到活性炭，之后與濃硫酸進(jìn)行磺化反應(yīng)，得到所述催化劑。本本發(fā)明以制糖工業(yè)的副產(chǎn)品糖蜜為原料，碳源來(lái)源豐富且廉價(jià)易得、工藝簡(jiǎn)單，催化劑具有較高比表面積和轉(zhuǎn)化率，可以使副產(chǎn)物高值化利用，具有一定的工業(yè)化實(shí)用價(jià)值。

利用現(xiàn)代分子生物學(xué)方法對(duì)傳統(tǒng)抗血清制備技術(shù)進(jìn)行改造，突破了過(guò)去抗血清生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)為主造成的不確定性和不系統(tǒng)性，提高了抗血清制備的技術(shù)含量和生產(chǎn)效率。有效去除抗血清中的非特異性抗體，從而實(shí)現(xiàn)抗體制備的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)模化生產(chǎn)，同時(shí)也降低了生產(chǎn)成本。免疫磁珠分離技術(shù)的最突出的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，可以明顯提高檢測(cè)的靈敏性，縮短病原體的檢測(cè)時(shí)間一至數(shù)天，并且可從復(fù)雜的樣品中直接分離病原體，降低標(biāo)本中抑制物的干擾，提高靈敏度。 已生產(chǎn)出 3 種診斷血清產(chǎn)品，包括“致病性大腸桿菌 O 抗原診斷血清試劑盒”、“大腸桿菌 H 抗原全套診斷血清試劑盒”和“志賀氏菌 O 抗原全套診斷血清試劑盒”，共計(jì) 147 種高特異性抗體。 經(jīng)中國(guó) CDC 使用證實(shí)，該血清具有反應(yīng)速度快、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，與日本生研同類(lèi)血清質(zhì)量相當(dāng)，遠(yuǎn)優(yōu)于國(guó)內(nèi)同類(lèi)產(chǎn)品。繼續(xù)在市場(chǎng)調(diào)研的基礎(chǔ)上，再進(jìn)行 11 種改類(lèi)試劑盒的研發(fā)和生產(chǎn)，填補(bǔ)國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)空白。 本項(xiàng)目完成后，實(shí)施單位將可生產(chǎn) 12 種診斷血清試劑盒（包括前期已完成開(kāi)發(fā)的 3 種），按每個(gè)疾控中心每年需求每種試劑盒一套計(jì)算，總需求量約 1200 套。此外，進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫單位對(duì)某些種類(lèi)的血清亦有一定需求，約為 300 套。按每套試劑盒平均 1 萬(wàn)元的售價(jià)計(jì)算，每年的市場(chǎng)可達(dá) 1500 萬(wàn)元。 免疫磁珠分離試劑盒可廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)，食品檢驗(yàn)，水質(zhì)／環(huán)境檢驗(yàn)，獸藥檢驗(yàn)等，市場(chǎng)非常之大，現(xiàn)主要的生產(chǎn)商為國(guó)外的Dynal 和 Matrix 公司，以 Dynal 公司為例，其每年可創(chuàng)造數(shù)十億美元的銷(xiāo)售額。由于依賴(lài)進(jìn)口，國(guó)內(nèi)多家疾病預(yù)防控制和出入境檢驗(yàn)檢疫單位已經(jīng)向項(xiàng)目實(shí)施單位提出了產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)意向。該產(chǎn)品研發(fā)成本約為每毫升 600 元，銷(xiāo)售價(jià)格在每毫升 2000 元左右，顯示了良好的市場(chǎng)前景。

本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，公開(kāi)了系列一中Flindersine衍生物在防治農(nóng)業(yè)真菌性病害中的用途。該類(lèi)衍生物對(duì)兩種植物病原真菌表現(xiàn)出不同程度的抑制活性，其中Nb?2?2對(duì)立枯絲核病菌的活性最好，EC50值可達(dá)6.228μg/mL，Nb?2?2對(duì)稻瘟病菌的活性最好，EC50值可達(dá)6.43μg/mL，Nd?3對(duì)番茄灰霉病菌的活性最好，EC50值可達(dá)2.956μg/mL，明顯優(yōu)于對(duì)照藥物嘧霉胺。本發(fā)明所涉及化合物合成方法簡(jiǎn)單且原料廉價(jià)易得，有望開(kāi)發(fā)為一種新型農(nóng)業(yè)抗細(xì)菌劑。

傳統(tǒng)發(fā)酵通常采用固態(tài)多菌種釀造，其功能微生物組成復(fù)雜，其形成的微生態(tài)在釀造的過(guò)程中一直處于動(dòng)態(tài)的平衡，這種微生態(tài)結(jié)構(gòu)與功能的揭示對(duì)提升傳統(tǒng)釀造食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、風(fēng)味保持具有重要意義，通過(guò)現(xiàn)代的微生態(tài)技術(shù)，認(rèn)識(shí)釀造微生物群落結(jié)構(gòu)及其功能，并加以理性應(yīng)用，既是重要的基礎(chǔ)科學(xué)問(wèn)題，又是行業(yè)技術(shù)升級(jí)的關(guān)鍵。實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期從事傳統(tǒng)釀造食品的應(yīng)用基礎(chǔ)研究和產(chǎn)業(yè)實(shí)踐，與國(guó)內(nèi)的眾多大型釀造企業(yè)，如鎮(zhèn)江恒順、瀘州老窖、山西老陳醋、張家界大德釀造、安徽胡玉美等保持著長(zhǎng)期的產(chǎn)學(xué)研合作。近十多年來(lái)，針對(duì)白酒、黃酒、醬油（醬）、泡菜等傳統(tǒng)釀造食品，在系統(tǒng)研究釀造微生物功能的基礎(chǔ)上，理性設(shè)計(jì)功能調(diào)控手段，達(dá)到傳承工藝特色，穩(wěn)定發(fā)酵生產(chǎn)，提升產(chǎn)品品質(zhì)的目的。 創(chuàng)新要點(diǎn) （1）系統(tǒng)建立了復(fù)雜釀造微生物群落結(jié)構(gòu)解析和微量代謝產(chǎn)物精確分析的技術(shù)體系，解決了妨礙定量研究傳統(tǒng)釀造食品微生物群落結(jié)構(gòu)以及精確其復(fù)雜組份的技術(shù)難題。 （2）創(chuàng)新了傳統(tǒng)釀造功能微生物高效篩選技術(shù)，從傳統(tǒng)食醋等釀造過(guò)程中分離獲得近百株背景明確、安全可靠、發(fā)酵性能優(yōu)良的微生物，形成了完備的釀造用菌種庫(kù)，包括乳酸菌、醋酸菌、酵母菌、米曲霉等。 （3）首次提出了傳統(tǒng)釀造菌群生物強(qiáng)化策略，構(gòu)建了釀造微生物群落功能強(qiáng)化技術(shù)體系并實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)應(yīng)用，促進(jìn)了傳統(tǒng)釀造生產(chǎn)的三個(gè)可控（釀造微生物群落功能可控、釀造過(guò)程可控、產(chǎn)品品質(zhì)可控）。

目前生物柴油的制備方法一般是通過(guò)酯交換反應(yīng)生產(chǎn)。酯交換法主要有酸催化酯交換、堿催化酯交換、酶法催化酯交換、多相催化酯交換、均相體系催化酯交換和超臨界酯交換。傳統(tǒng)的化學(xué)法通常采用強(qiáng)酸（硫酸）或強(qiáng)堿（KOH 和 NaOH）作催化劑，是均相催化反應(yīng)過(guò)程，反應(yīng)條件相對(duì)溫和，反應(yīng)速率快，但這些催化劑具有強(qiáng)腐蝕性，反應(yīng)結(jié)束后需對(duì)它們進(jìn)行中和和分離等后續(xù)處理，工藝流程長(zhǎng)，生產(chǎn)成本增加，還存在廢水和廢渣排放等環(huán)境污染問(wèn)題，因此采用非均相催化技術(shù)制備生物柴油勢(shì)在必行。