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項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:本發(fā)明提供高效降解黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的溶桿菌及其用.具體地,本發(fā)明提供一株雙功能高效降解菌(Lysobacter?sp.)CW239及其在降解低污染濃度黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A中的應(yīng)用.與現(xiàn)有的黃曲霉毒素降解菌相比,本發(fā)明的菌株CW239能夠在低濃度毒素污染條件下達(dá)到極佳的降解效果.在液體發(fā)酵條件下,在含有黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A終濃度20μg/L的發(fā)酵培養(yǎng)液中,12h菌株CW239對(duì)赭曲霉毒素A的降解率為53.1%,48h降解率達(dá)到99.8%;12h菌株CW239對(duì)黃曲霉毒素B1的降解率為42.5%,48h降解率達(dá)到83.4%.用菌株CW239處理毒素污染的飼料(終濃度20μg/kg),48h對(duì)赭曲霉毒素A降解率為68.7%,黃曲霉毒素B1降解率為52.1%.菌株CW239在食品及飼料生物脫毒應(yīng)用方面具有實(shí)質(zhì)性的應(yīng)用價(jià)值和重大意義.

項(xiàng)目簡(jiǎn)介 腦卒中為腦血管破裂或血栓阻塞血管導(dǎo)致大腦缺血損傷，其治療的藥物非常缺乏，阿替普酶是迄今為止唯一獲得FDA批準(zhǔn)用于缺血性腦卒中的溶栓藥物,易引起再灌注損傷,可延長(zhǎng)其給藥時(shí)間窗和減輕再灌注損傷。但臨床上神經(jīng)保護(hù)劑十分缺乏。本項(xiàng)目為腦中風(fēng)治療的小分子蛋白藥物研究，包括兩個(gè)小分子量蛋白。其一是犬鉤蟲(chóng)抗凝多肽5（AcAP5），是一種具有強(qiáng)效抗血栓形成（抑制FXa）和溶血栓（抑制TAFIa）兩種功能的蛋白，其中溶栓作用為本團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)（已申請(qǐng)專利并獲得授權(quán)）。其二是在AcAP5基礎(chǔ)上改造的蛋白TBN（已申請(qǐng)專利），具有溶栓和神經(jīng)保護(hù)作用功能。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明AcAP5和TBN均具有較好的溶栓（溶解動(dòng)脈血栓）、抗栓（預(yù)防腦中風(fēng)血栓溶解過(guò)程中血栓再形成）和神經(jīng)保護(hù)作用（減小梗死體積），“三位一體”的功能使其具有更好的治療腦卒中效果。項(xiàng)目團(tuán)隊(duì) 王銀葉，教授，在心血管領(lǐng)域特別是腦卒中新藥研究方面有20多年的經(jīng)驗(yàn)，發(fā)表了數(shù)十篇相關(guān)文章，主持過(guò)多項(xiàng)國(guó)家自然基金和科技部項(xiàng)目。項(xiàng)目骨干：朱元軍，博士，講師。擅長(zhǎng)蛋白質(zhì)/多肽的設(shè)計(jì)、表達(dá)和純化工藝研究。項(xiàng)目骨干：劉曉巖，博士，講師。擅長(zhǎng)腦卒中的疾病模型構(gòu)建，以及藥物的藥理活性評(píng)價(jià)及機(jī)制研究。以及碩士研究生4名。整個(gè)團(tuán)隊(duì)具有蛋白設(shè)計(jì)、表達(dá)、純化、分子機(jī)制和藥效學(xué)評(píng)價(jià)等技術(shù)能力和條件。 應(yīng)用范圍 AcAP5和TBN可用于急性缺血性腦卒中患者的治療。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，我國(guó)每年腦卒中新發(fā)病例高達(dá)200余萬(wàn)，假設(shè)僅僅5%的病人（10萬(wàn)）接受10000元的AcAP5或TBN等蛋白治療，則年銷售額可望達(dá)到10億元。項(xiàng)目階段 本項(xiàng)目處于臨床前研究階段。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明AcAP5和TBN均具有較好的抗栓、溶栓和腦保護(hù)作用，150 nmol/kg給藥劑量下AcAP5和TBN均可顯著減少小鼠腦梗死的體積。

腦卒中為腦血管破裂或血栓阻塞血管導(dǎo)致大腦缺血損傷，其治療的藥物非常缺乏，阿替普酶是迄今為止唯一獲得FDA批準(zhǔn)用于缺血性腦卒中的溶栓藥物,易引起再灌注損傷,可延長(zhǎng)其給藥時(shí)間窗和減輕再灌注損傷。但臨床上神經(jīng)保護(hù)劑十分缺乏。本項(xiàng)目為腦中風(fēng)治療的小分子蛋白藥物研究，包括兩個(gè)小分子量蛋白。其一是犬鉤蟲(chóng)抗凝多肽5（AcAP5），是一種具有強(qiáng)效抗血栓形成（抑制FXa）和溶血栓（抑制TAFIa）兩種功能的蛋白，其中溶栓作用為本團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)（已申請(qǐng)專利并獲得授權(quán)）。 其二是在AcAP5基礎(chǔ)上改造的蛋白TBN（已申請(qǐng)專利），具有溶栓和神經(jīng)保護(hù)作用功能。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明AcAP5和TBN均具有較好的溶栓（溶解動(dòng)脈血栓）、抗栓（預(yù)防腦中風(fēng)血栓溶解過(guò)程中血栓再形成）和神經(jīng)保護(hù)作用（減小梗死體積），“三位一體”的功能使其具有更好的治療腦卒中效果。

本發(fā)明提供高效降解黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的溶桿菌及其用.具體地,本發(fā)明提供一株雙功能高效降解菌(Lysobacter?sp.)CW239及其在降解低污染濃度黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A中的應(yīng)用.與現(xiàn)有的黃曲霉毒素降解菌相比,本發(fā)明的菌株CW239能夠在低濃度毒素污染條件下達(dá)到極佳的降解效果.在液體發(fā)酵條件下,在含有黃曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A終濃度20μg/L的發(fā)酵培養(yǎng)液中,12h菌株CW239對(duì)赭曲霉毒素A的降解率為53.1%,48h降解率達(dá)到99.8%;12h菌株CW239對(duì)黃曲霉毒素B1的降解率為42.5%,48h降解率達(dá)到83.4%.用菌株CW239處理毒素污染的飼料(終濃度20μg/kg),48h對(duì)赭曲霉毒素A降解率為68.7%,黃曲霉毒素B1降解率為52.1%.菌株CW239在食品及飼料生物脫毒應(yīng)用方面具有實(shí)質(zhì)性的應(yīng)用價(jià)值和重大意義.

中試階段/n重組溶瘤 II 型單純皰疹病毒(OH2)注射劑屬于腫瘤免疫與腫瘤基因治療 I 類生物創(chuàng)新藥物，是繼腫瘤手術(shù)、放療和化療治療三大傳統(tǒng)手段后的第四大常規(guī)治療手段， 具有安全性高、靶向性好、殺傷效率高、副作用小和成本低等特點(diǎn)。根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，OH2 注射劑對(duì)結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、黑色素瘤、頭頸部腫瘤等實(shí)體瘤具有良好的治療效果。同時(shí)， OH2可與聯(lián)合化療、放療、單抗類藥物聯(lián)合應(yīng)用。OH2 注射劑已完成主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)建立、OH2 三級(jí)種子批建立、初步穩(wěn)定性研究等臨床前研究和新藥審評(píng)相關(guān)工作，

本發(fā)明公開(kāi)了一種耦合熱溶萃取和熱解制備高品質(zhì)生物油和氣體的方法，首先采用熱溶萃取法對(duì)生物質(zhì)進(jìn)行脫氧提質(zhì)萃取，得到無(wú)水無(wú)灰、高碳含量、低氧含量和含有大量芳香碳結(jié)構(gòu)的低分子量萃取物；然后將所述的低分子量萃取物進(jìn)行熱解，收集氣體產(chǎn)物、液體產(chǎn)物(生物油)和固體產(chǎn)物(焦)。本發(fā)明通過(guò)耦合熱溶萃取和熱解技術(shù)所得到的生物油碳含量高、氧含量低、熱值高，并且生物油腐蝕性低、高附加值的芳香烴類化合物含量高，可以大大減少生物油的后處理工藝。另外，所得到的氣體產(chǎn)物的熱值增大。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，無(wú)需催化劑和氫氣，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)物附加值高，具有較高的經(jīng)濟(jì)效益、環(huán)境效益和廣闊的應(yīng)用前景。

本發(fā)明公開(kāi)了一種耦合熱溶萃取和熱解制備高品質(zhì)生物油和氣體的方法，首先采用熱溶萃取法對(duì)生物質(zhì)進(jìn)行脫氧提質(zhì)萃取，得到無(wú)水無(wú)灰、高碳含量、低氧含量和含有大量芳香碳結(jié)構(gòu)的低分子量萃取物；然后將所述的低分子量萃取物進(jìn)行熱解，收集氣體產(chǎn)物、液體產(chǎn)物(生物油)和固體產(chǎn)物(焦)。本發(fā)明通過(guò)耦合熱溶萃取和熱解技術(shù)所得到的生物油碳含量高、氧含量低、熱值高，并且生物油腐蝕性低、高附加值的芳香烴類化合物含量高，可以大大減少生物油的后處理工藝。另外，所得到的氣體產(chǎn)物的熱值增大。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，無(wú)需催化劑和氫氣，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)物附加值高，具有較高的經(jīng)濟(jì)效益、環(huán)境效益和廣闊的應(yīng)用前景。

腦卒中為腦血管破裂或血栓阻塞血管導(dǎo)致大腦缺血損傷，其治療的藥物非常缺乏，阿替普酶是迄今為止唯一獲得FDA批準(zhǔn)用于缺血性腦卒中的溶栓藥物,易引起再灌注損傷,可延長(zhǎng)其給藥時(shí)間窗和減輕再灌注損傷。但臨床上神經(jīng)保護(hù)劑十分缺乏。本項(xiàng)目為腦中風(fēng)治療的小分子蛋白藥物研究，包括兩個(gè)小分子量蛋白。其一是犬鉤蟲(chóng)抗凝多肽5（AcAP5），是一種具有強(qiáng)效抗血栓形成（抑制FXa）和溶血栓（抑制TAFIa）兩種功能的蛋白，其中溶栓作用為本團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)（已申請(qǐng)專利并獲得授權(quán)）。 其二是在AcAP5基礎(chǔ)上改造的蛋白TBN（已申請(qǐng)專利），具有溶栓和神經(jīng)保護(hù)作用功能。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明AcAP5和TBN均具有較好的溶栓（溶解動(dòng)脈血栓）、抗栓（預(yù)防腦中風(fēng)血栓溶解過(guò)程中血栓再形成）和神經(jīng)保護(hù)作用（減小梗死體積），“三位一體”的功能使其具有更好的治療腦卒中效果。

剪切變稀是流體的一種流變學(xué)行為，某些流體在施加剪切力后，流體的粘度降低。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)不少天然產(chǎn)物及聚合物的溶液具有剪切變稀的特性，同時(shí)，剪切變稀性質(zhì)也得到廣泛應(yīng)用，如：大多數(shù)涂料被賦予剪切變稀特性，涂刷時(shí)，對(duì)涂料施加剪切力，涂料變稀，易于均勻地分散在被涂覆物表面，一旦停止涂刷，剪切力消失后，涂料粘度恢復(fù)到施加剪切力前的粘度，限制涂料自發(fā)流動(dòng)，避免產(chǎn)生涂層不均一、流掛等現(xiàn)象。隨著剪切變稀性質(zhì)研究的深入，以及應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，對(duì)剪切變稀性能要求也在不斷提高，不時(shí)有具備剪切變稀性質(zhì)的聚合物設(shè)計(jì)合成出來(lái)。其中，聚丙烯酸因其易于合成、性能可調(diào)等優(yōu)點(diǎn)逐步在市場(chǎng)上占據(jù)主導(dǎo)地位。疏水改性聚丙烯酸聚合物是聚丙烯酸剪切稀化劑的第二代產(chǎn)品。較第一代堿溶脹型聚丙烯酸剪切稀化性更容易控制，可調(diào)范圍更寬。盡管疏水改性聚丙烯酸聚合物剪切稀化性能可調(diào)范圍寬，但是市售產(chǎn)品并不能做到面面俱到，覆蓋整個(gè)需求范圍。本項(xiàng)目即根據(jù)需求方的提出的特殊性能要求開(kāi)發(fā)特定疏水改性聚丙烯酸聚合物。 需求方性能要求如下： 1）與丙二醇有很好的相容性；2）剪切稀化指數(shù)（0.3rpm與30rpm的粘度比值）要求20℃≥15，-20℃≥10，且30rpm粘度值小于1000；3）粘度對(duì)鹽的敏感性高；4）耐剪切：2000rpm剪切5min，要求粘度損失小于10%；5）高溫穩(wěn)定性：要求80℃還能保持增稠效果。 目前市售疏水改性丙烯酸聚合物的均是針對(duì)水體系開(kāi)發(fā)的，本項(xiàng)目要求與丙二醇有相容性，針對(duì)的不完全水體系，必須有特定結(jié)構(gòu)的聚合物才能滿足要求。 疏水改性丙烯酸聚合物在國(guó)外已經(jīng)有相關(guān)產(chǎn)品上市，但是作為產(chǎn)品，市場(chǎng)定位是應(yīng)用，這類產(chǎn)品是以功能化的角度進(jìn)入市場(chǎng)，比如：水性涂料增稠劑等。根據(jù)需求方提供的信息，市場(chǎng)上沒(méi)有專用除冰液增稠劑產(chǎn)品。由于生產(chǎn)企業(yè)對(duì)產(chǎn)品結(jié)構(gòu)保密，無(wú)法從產(chǎn)品結(jié)構(gòu)方面全面了解國(guó)外狀況，因此無(wú)法從產(chǎn)品結(jié)構(gòu)判定市場(chǎng)上是否滿足需方要求的產(chǎn)品。 國(guó)內(nèi)還沒(méi)有見(jiàn)到疏水改性丙烯酸有影響力的產(chǎn)品，市售產(chǎn)品還僅為第一代的堿溶脹型聚丙烯酸。需求方試用了國(guó)內(nèi)所有產(chǎn)品，均不能達(dá)到性能要求。 從30年前提出部分疏水改性丙烯酸的理念后，國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)界有過(guò)大量研究，不過(guò)學(xué)術(shù)研究與產(chǎn)品技術(shù)開(kāi)發(fā)著眼點(diǎn)不同，現(xiàn)有的報(bào)道都是對(duì)結(jié)構(gòu)性能的一般規(guī)律性研究，體統(tǒng)合成制備方面研究報(bào)道很少。更重要的是尚未看到水-丙二醇體系的相關(guān)研究。 根據(jù)現(xiàn)有資料，疏水改性聚丙烯酸聚合物制備可以分為兩大類：合成法和改性法。合成法采用疏水性單體與丙烯酸共聚使聚合物結(jié)構(gòu)中帶有疏水性基團(tuán)；改性法用市售聚丙烯酸通過(guò)酯化方法在丙烯酸鏈上帶上疏水性基團(tuán)。合成法的優(yōu)點(diǎn)是可進(jìn)行分子設(shè)計(jì)，疏水性可調(diào)范圍寬、改性法的優(yōu)點(diǎn)是較合成法簡(jiǎn)單，但是疏水可調(diào)性受限。疏水改性聚丙烯酸制備的工藝路線分為：1、沉淀法，聚合物結(jié)構(gòu)容易控制，高?？蒲袉挝灰园l(fā)文章為目的均采用此法。但是，該方法后處理極為繁瑣，通過(guò)環(huán)評(píng)難度較大；2、界面聚合法，工藝簡(jiǎn)單，但是，產(chǎn)品質(zhì)量差，而且不穩(wěn)定；3、膠束共聚法，工藝也較為簡(jiǎn)單，產(chǎn)品質(zhì)量雖然不如沉淀法好，但是，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定；以上3條工藝路線為合成法。4、聚合物改性法，產(chǎn)品質(zhì)量較易控制，也較為穩(wěn)定，但是成本較高，后處理也較為復(fù)雜。 本研究組已有30多年的聚合物合成研究經(jīng)歷，承擔(dān)過(guò)多個(gè)聚合物制備類項(xiàng)目，涉及的單體基本為丙烯酸類，苯乙烯類。曾經(jīng)承擔(dān)過(guò)疏水改性丙烯酸的合成項(xiàng)目，用于油田高溫、高鹽地層的采油。對(duì)疏水改性丙烯酸聚合物合成有一定的經(jīng)驗(yàn)。 本項(xiàng)目開(kāi)發(fā)50L“較高剪切稀化指數(shù)的堿溶脹疏水改性聚丙烯酸聚合物”制備技術(shù)，制備的“較高剪切稀化指數(shù)的堿溶脹疏水改性聚丙烯酸聚合物”達(dá)到需求方提出的技術(shù)指標(biāo)。本項(xiàng)目采用疏水性單體與丙烯酸共聚的方法制備“較高剪切稀化指數(shù)的堿溶脹疏水改性聚丙烯酸聚合物”。該路線疏水性可調(diào)范圍寬，變化不同結(jié)構(gòu)的疏水性單體及含量即可加以調(diào)節(jié)。同時(shí)，剪切稀化指數(shù)也可以用此方法調(diào)節(jié)。采用膠束共聚工藝路線，生產(chǎn)過(guò)程易于控制，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

本發(fā)明是一種具有內(nèi)增塑功能的腸溶型藥用包衣聚丙烯酸樹(shù)脂乳液，它由以下配比 的原料(質(zhì)量比)經(jīng)反應(yīng)而成：甲基丙烯酸∶甲基丙烯酸甲酯∶甲基丙烯酸丁酯∶復(fù)合乳化 劑∶過(guò)硫酸鉀∶分子量調(diào)節(jié)劑＝1∶(1.20-1.32)∶(1.451.58)∶(0.060-0.080)∶ (0.013-0.025)∶(0.020-0.030)。本發(fā)明還公開(kāi)了種子聚合法制備上述聚丙烯酸樹(shù)脂乳液的 方法。本發(fā)明聚丙烯酸樹(shù)脂乳膠液屬于腸溶型水分散體包衣，具有使用安全、環(huán)保、不需加 入增塑劑即可實(shí)現(xiàn)高效、高質(zhì)量包衣的特點(diǎn)。