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本發明提供一類具有酪氨酸酶抑制活性的化合物的制備方法，包括六種從桑葉中提取的具有酪氨酸酶抑制活性的多酚類化合物。通過將藥材經乙醇水溶液加熱提取，濃縮，硅膠柱分離，洗脫，洗脫液濃縮干燥，再用制備液相色譜繼續分離，收集溶液，溶液濃縮干燥后得到樣品并進行結構鑒定。本發明還提供了從桑葉中分離上述多酚類化合物的方法。本發明提供的六種多酚類化合物具有較強的酪氨酸酶抑制活性，能夠有效預防和治療黑色素合成異常導致的人體色素沉著性疾病、黑色素瘤以及其它需要抑制酪氨酸酶活性的病癥，可用于制備治療此類疾病的藥物。

氯吡格雷 (Clopidogrel) ，商品名波立維 (Plavix) ，是抑制血小板聚集的藥物。年銷售額超過百億美元，是目前世界上排名第二位的重磅炸彈級藥物。 (R)-鄰氯扁桃酸甲酯是氯吡格雷原料藥合成的重要前體化合物，酶促鄰氯苯甲酰甲酸甲酯不對稱還原是制備 (R)-鄰氯扁桃酸甲酯的重要方法，具有轉化率高、產品光學純度好、環境污染小等顯著優點。 本項目我們通過廣泛篩選，獲得一個高立體選擇性的羰基還原酶，將其與葡萄糖脫氫酶共克隆表達于大腸桿菌中，使用重組大腸桿菌整細胞在單水相體系中高效催化鄰氯苯甲酰甲酸甲酯的不對稱還原，使用廉價的葡萄糖作為輔底物，反應體系中無需額外添加價格昂貴的輔酶，反應體系簡便，原料成本低廉。底物濃度可高達600 g/L，完全轉化，產物 (R)-鄰氯扁桃酸甲酯的得率高于90%，光學純度高于99.9%。具有很好的產業化前景。

阿托伐他汀，又名立普妥，能夠降低血漿膽固醇和脂蛋白水平，是目前世界銷售排名首位的重磅炸彈級藥物，年銷售額超過百億美元。 (S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯是阿伐他汀手性側鏈合成的重要前體化合物，酶促4-氯-乙酰乙酸乙酯不對稱還原是制備 (S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯的重要方法，具有轉化率高、產品光學純度好、環境污染小等顯著優點。 本項目我們通過廣泛篩選，獲得一個高立體選擇性的羰基還原酶ScCR，該酶可以在有機/水兩相體系中高效催化4-氯-乙酰乙酸乙酯的不對稱還原，使用廉價的異丙醇作為輔底物，無需額外添加輔酶再生用酶，反應體系簡單。使用含該酶的大腸桿菌整細胞作為催化劑，底物濃度可高達600 g/L，完全轉化，產物 (S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯的得率達96%，光學純度高于99%。具有很好的產業化前景。

該項目研制了一種能識別甲睪酮的特異性單克隆抗體, 它是由保藏號為CCTCC NO:C201493的雜交瘤細胞株MT9C10所分泌的。形成的檢測甲睪酮的酶聯免疫技術和試劑盒，與現有技術相比，制備的單克隆抗體可以識別甲睪酮，識別靈敏度高，特異性好，該項目ELISA技術和試劑盒檢測靈敏度、準確度高，精密度好。 甲睪酮是一種人工合成的甾體類雄激素，具有環戊烷多氫菲的基本結構，在獸醫臨床上，甲睪酮被大量應用在畜牧養殖業中，能夠促進蛋白質的合成和骨骼肌的生長，通過抑制脂肪的增長，從而使肌肉變發達，并且能夠刺激動物對食物的欲望，使動物的日增重提高，同時大大提高了飼料的利用效率。 成果完成時間：2017年

1、成果來源、成果被評價及認定（發明專利授權號）等情況 本項目來源于國家“十二五”科技支撐計劃項目“大宗糧食綠色加工技術與 產品”中課題“玉米淀粉加工關鍵技術研究與示范（2012BAD34B07，479 萬元， 研究起止時間：2012.01-2014.12）”和國家自然科學基金“酶法選擇性合成單一 類型環糊精的控制策略研究（31101228，25 萬元，研究起止時間：2012.01- 2014.12）”，屬于農產品深加工科學技術領域。本項目累計申請發明專利 7 項（1 項獲授權），發表論文 11 篇（8 篇被 SCI 收錄），于 2015 年 7 月通過中國糧油學 會鑒定，獲國際先進評價。 2、主要技術內容、作用、對行業的意義，獲獎情況 CGT 酶生產環糊精最不利的條件之一是產物特異性差，給產物的分離純化 帶來很大不便。同時，CGT 酶存在的另一大缺陷是其熱穩定性較差，由于在環糊 精工業化生產中，底物淀粉首先要經過高溫糊化、液化處理，然后降溫至適當溫 度進行環化反應，若 CGT 酶能夠適應更高的反應溫度，勢必有助于提高反應效率， 因此，有必要改善 CGT 酶的熱穩定性，提高其催化效率，進而有效降低環糊精生20 產成本。本項目主要是通過改善 CGT 酶產物特異性和熱穩定性，提高該酶的使用 性能，將其應用于環糊精的工業化生產中，能顯著降低環糊精的生產成本，促進 環糊精在各個領域的廣泛應用。因此，隨著環糊精在食品、醫藥等領域中的應用 越來越廣闊，開發改善 CGT 酶使用性能的關鍵技術顯得尤為重要，具有很好的推 廣應用前景。 3、成果的技術指標、創新性與先進性 本項目在長期從事淀粉生物轉化研究的基礎上，針對環糊精工業化生產過程 中 CGT 酶的產物特異性和熱穩定性較差問題，通過深入研究和不懈努力，逐步改 善了 CGT 酶的產物特異性和熱穩定性，突破了關鍵技術，并實現了具有理想產物 特異性和熱穩定性的β-CGT 酶突變體在酶法生產β-環糊精中的應用。該酶使用 性能改善易操作，具有很好的應用價值，技術位于國際領先水平。與國內外同類 技術相比，具有以下創新： ①針對 CGT 酶產物特異性較差的問題，確定了 CGT 酶的產物特異性與其一級 結構的相關性，獲得構建具有理想產物特異性的 CGT 酶突變體的簡單可行方法， 為從本質上改善 CGT 酶的產物特異性提供理論基礎； ②針對 CGT 酶熱穩定性較差的問題，采用定點突變技術闡明了重要氨基酸殘 基對 CGT 酶熱穩定性產生影響的規律，獲得了構建具有理想熱穩定性的 CGT 酶突 變體的簡單可行方法，為從根本上改善 CGT 酶的熱穩定性打下了基礎； ③ CGT 酶使用性能的改善方法簡單易行，所得到具有理想產物特異性和熱 穩定性的酶突變體可直接應用于β-環糊精的工業化生產，能提高β-環糊精的得 率，降低β-環糊精的生產成本。 

隨著氣田開發越來越多，天然氣井運行壓力大、溫度高、時間長的特點也越來越突出。若生產過程中出現氣體泄露，易導致氣井環空帶壓或泄露事故。若泄露氣體中含硫化氫等有毒有害氣體，將對人身及財產安全造成巨大危害。氣密封檢測技術可以及時對入井油套管絲扣密封性進行預報，避免因絲扣密封失效造成重大事故及巨大經濟損失。因此，在油套管入井前進行絲扣的密封性檢測已成為國內很多陸地油氣田的強制要求。 針對傳統氣密封檢測系統存在的檢測時間長、操作步驟繁雜、占地空間大、控壓精度低、氣體消耗快等問題，我們提出了全新的“油套管螺紋連接氣密封自動檢測系統”。 本系統采用氣體直接連續增壓技術，檢測中持續增壓穩壓，解決了間歇水力增壓技術檢測時間長的問題，每個絲扣約節省45秒檢測時間，一千米管道可節省70分鐘。采用自動控制系統控制檢測步驟自動執行，解決了人工成本高、步驟多、重復性差的問題。新增氣體回收系統，回收率達到75%，每檢測1000米套管，節省30瓶氣源約1.2萬元氣源費用。全新撬裝設計，集成度高、占地面積小，一車全裝下。并有專為海洋平臺設計的緊湊型撬裝，功能不減、體積減半，更多的氣源，更快的換裝。目前，本系統及配套工具已在江蘇金壇儲氣庫、遼寧盤錦等地應用30余口井，現場反饋良好。 本系統已申請20余項發明專利，并已形成完備的知識產權保護群。

目前我國開始發展單體泵燃油噴射系統以使發動機的排放達到歐III排放標準，這對于我國節約能源、保護環境、降低車輛運輸成本等具有重要意義。本項目開發對單體泵內的關鍵零件—柱塞進行表面改性的工業化應用技術，使表面改性處理的柱塞不僅具有優異的耐磨壽命（顯著優于表面覆有TiN薄膜的柱塞），同時具有很低的摩擦系數（為TiN薄膜的～1/6），使柱塞/泵體摩擦副均具有高度的壽命水平和保持長期精度。

盡管堅固耐久型斥液表面的應用前景很美好，但將其大規模推廣前，還需解決一些問題。解決耐久性評價方法的合理選擇與統一化問題、優化提高耐久性的策略、開發優秀的斥液表面加工方法，對推動堅固耐久型斥液表面的工業化應用具有重要意義。

本發明公開了一種耦合熱溶萃取和熱解制備高品質生物油和氣體的方法，首先采用熱溶萃取法對生物質進行脫氧提質萃取，得到無水無灰、高碳含量、低氧含量和含有大量芳香碳結構的低分子量萃取物；然后將所述的低分子量萃取物進行熱解，收集氣體產物、液體產物(生物油)和固體產物(焦)。本發明通過耦合熱溶萃取和熱解技術所得到的生物油碳含量高、氧含量低、熱值高，并且生物油腐蝕性低、高附加值的芳香烴類化合物含量高，可以大大減少生物油的后處理工藝。另外，所得到的氣體產物的熱值增大。本發明工藝簡單，無需催化劑和氫氣，生產成本低，產物附加值高，具有較高的經濟效益、環境效益和廣闊的應用前景。

本發明公開了一種耦合熱溶萃取和熱解制備高品質生物油和氣體的方法，首先采用熱溶萃取法對生物質進行脫氧提質萃取，得到無水無灰、高碳含量、低氧含量和含有大量芳香碳結構的低分子量萃取物；然后將所述的低分子量萃取物進行熱解，收集氣體產物、液體產物(生物油)和固體產物(焦)。本發明通過耦合熱溶萃取和熱解技術所得到的生物油碳含量高、氧含量低、熱值高，并且生物油腐蝕性低、高附加值的芳香烴類化合物含量高，可以大大減少生物油的后處理工藝。另外，所得到的氣體產物的熱值增大。本發明工藝簡單，無需催化劑和氫氣，生產成本低，產物附加值高，具有較高的經濟效益、環境效益和廣闊的應用前景。