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本發(fā)明提出一種與蘋果抗炭疽菌葉枯病基因位點(diǎn)緊密連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用，分子標(biāo)記包括6個(gè)SNP標(biāo)記以及5個(gè)InDel標(biāo)記，分別為SNP3955，SNP4236，SNP4257，SNP4299，SNP4336，SNP4432，InDel4199，InDel4227，InDel4254，InDel4305及InDel4334。此外，本發(fā)明還提出篩選該標(biāo)記的方法，以及上述標(biāo)記的應(yīng)用。本發(fā)明利用全基因組重測(cè)

本發(fā)明涉及一種手性螺環(huán)磷酸和制備方法及其應(yīng)用。該手性螺環(huán)磷酸化合物具有式(1)結(jié)構(gòu)的化合物，主要結(jié)構(gòu)特征是具有手性螺雙二氫茚骨架。該手性螺環(huán)磷酸化合物可以由具有螺環(huán)骨架的光學(xué)活性的1，1’-螺環(huán)二氫化茚-7，7’-二酚為手性起始原料合成。該手性螺環(huán)磷酸是一種新型的質(zhì)子酸類有機(jī)小分子催化劑，可以廣泛用于許多催化不對(duì)稱有機(jī)反應(yīng)中，特別是可適用在吲哚烷基化的不對(duì)稱催化反應(yīng)中，反應(yīng)條件溫和，產(chǎn)率好，對(duì)映體選擇性高。

本發(fā)明屬于有機(jī)合成領(lǐng)域，公開(kāi)了一種螺羥吲哚類化合物的合成方法，是以靛紅類化合物、活性亞甲基化合物和1，3-二羰基化合物為原料，以大孔型強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂或凝膠型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為催化劑，在水相中“三組分一鍋法”合成螺羥吲哚類化合物，該方法具有操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)條件溫和、反應(yīng)時(shí)間短(0.5～3小時(shí))、產(chǎn)率高(90％～99％)、催化劑能重復(fù)使用、環(huán)境友好、成本低等優(yōu)點(diǎn)。

胞內(nèi)寄生性單增李斯特菌和綿羊李斯特菌能在吞噬細(xì)胞等抗原遞呈細(xì)胞內(nèi)繁殖，引發(fā)高水平的抗原遞呈作用，分別通過(guò)MHCⅠ和Ⅱ類途徑引起宿主抗原特異性的CD8+和CD4+ T細(xì)胞免疫反應(yīng)，建立長(zhǎng)期有效的免疫保護(hù)記憶，因此可作為一種通用的疫苗載體。本項(xiàng)目以上述兩種李斯特菌為活菌載體搭建新型疫苗構(gòu)建通用平臺(tái)，該平臺(tái)具有以下優(yōu)勢(shì)：生物安全——敲除了菌株致病基因，降低了毒性；外源蛋白表達(dá)穩(wěn)定——外源抗原基因整合至細(xì)菌基因組，永遠(yuǎn)不會(huì)丟失；外源抗原具有分泌性——抗原基因融合有分泌信號(hào)肽，使蛋白能分泌到胞外，更有利于免疫刺激；對(duì)環(huán)境、公共健康安全——重組疫苗菌株不攜帶耐藥基因，不會(huì)給環(huán)境和公共健康帶來(lái)危害。本平臺(tái)技術(shù)目前已獲得授權(quán)專利，成果屬于國(guó)際先進(jìn)水平，已在結(jié)核疫苗及豬繁殖與呼吸綜合癥病毒疫苗的研制上應(yīng)用。該平臺(tái)還可應(yīng)用于腫瘤治療性疫苗及其他預(yù)防病毒和慢性細(xì)菌感染的疫苗的研發(fā)，是一種通用的疫苗構(gòu)建平臺(tái)。

從寒假到現(xiàn)在，清華大學(xué)天津高端裝備研究院表界面微納技術(shù)研究所（以下簡(jiǎn)稱清華高端院表界面所）的實(shí)驗(yàn)室里，科研人員已連續(xù)忙碌了好多天。為了趕制捐獻(xiàn)給抗疫醫(yī)務(wù)人員的消毒除菌凝膠，留在天津的研究所員工幾乎全部上崗。由于生產(chǎn)線工人沒(méi)有復(fù)工，這些科研工作者們就成了“臨時(shí)工”，實(shí)驗(yàn)室成了“臨時(shí)生產(chǎn)線”。“相比傳統(tǒng)噴灑消毒液的方式，緩釋二氧化氯可以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期持續(xù)消毒，無(wú)死角覆蓋，是一種更好的消毒方式。”清華高端院表界面所常務(wù)副所長(zhǎng)杜川說(shuō)。在北京清華長(zhǎng)庚醫(yī)院執(zhí)行院長(zhǎng)董家鴻院士的建議下，大年初二，高端院應(yīng)急專項(xiàng)小組緊急集結(jié)，針對(duì)除菌消毒的應(yīng)用需求，在之前技術(shù)儲(chǔ)備的基礎(chǔ)上，以最快的速度研發(fā)出以緩釋二氧化氯技術(shù)為核心的消毒除菌凝膠，為這場(chǎng)特殊戰(zhàn)“疫”提供綠色、安全、長(zhǎng)期高效的消毒除菌新手段。經(jīng)廣東省微生物分析檢測(cè)中心檢測(cè)，殺菌率達(dá)到99.9%。一瓶消毒除菌凝膠可以在10—20平方米的房間使用1—2個(gè)月，而且其揮發(fā)濃度僅為美國(guó)國(guó)家職業(yè)安全衛(wèi)生協(xié)會(huì)建議暴露限值0.1ppm濃度（parts per million）的三分之一，在保證消殺效果的同時(shí)，不會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生影響。

? ：隨著我國(guó)載人航天事業(yè)的發(fā)展及核能、電磁能在軍事、科技、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，研究輻射損傷防治手段、積極尋找有效抗輻射損傷藥物成為迫切需要解決的問(wèn)題。“龍抗I號(hào)”是運(yùn)用多種活性成分篩選技術(shù)從豐富的傣藥資源中精心篩選出的特色抗輻射藥物。

該技術(shù)利用不同食用菌子實(shí)體或加工副產(chǎn)物，制作不同功效的食用菌系列 凍干方便菌湯，適用于食品加工企業(yè)、凍干食品加工企業(yè)、果蔬加工企業(yè)。解 決了生鮮果、菜、菌加工副產(chǎn)物綜合高效利用問(wèn)題；將生鮮果、菜、菌的營(yíng)養(yǎng) 與保健功效與糕點(diǎn)、面點(diǎn)相結(jié)合，改善和提高了普通糕點(diǎn)及面食制品的營(yíng)養(yǎng)與 功能；增加了糕點(diǎn)及面食制品的花色品種，以滿足消費(fèi)者的多樣化需求。該技 術(shù)可直接對(duì)生鮮果、菜、菌加工副產(chǎn)物進(jìn)行濕法打漿利用，省去了脫水干燥與 粉碎工序，簡(jiǎn)化了工藝流程，降低了加工能耗。通過(guò)打發(fā)順序的調(diào)整和有關(guān)配 料的應(yīng)用，提高了制品的性能，保護(hù)了原料中的營(yíng)養(yǎng)與功效成分。

本實(shí)用新型涉及一種乳酸菌復(fù)合菌劑的制備裝置，包括外箱體，外箱體頂部設(shè)置有蒸汽接口，外箱體內(nèi)上部設(shè)置有上端開(kāi)口的原料箱，原料箱通過(guò)管道連接有位于其下方的混合箱，混合箱兩端均通過(guò)轉(zhuǎn)軸轉(zhuǎn)動(dòng)固定在固定板上，混合箱底部設(shè)置有凸輪，凸輪連接有位于外箱體外的驅(qū)動(dòng)裝置，混合箱通過(guò)管道連接有菌種箱和培養(yǎng)箱，菌種箱通過(guò)管道與培養(yǎng)箱相連，菌種箱連接有伸出外箱體外的接種管，培養(yǎng)箱底部設(shè)置有加熱裝置，加熱裝置與控制器相連；本實(shí)用新型通過(guò)將原料箱、混合箱、菌種箱和培養(yǎng)箱均設(shè)置在外箱體內(nèi)，方便進(jìn)行蒸汽滅菌消毒，保證培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌無(wú)氧環(huán)境，凸輪驅(qū)動(dòng)混合箱搖晃，避免傳統(tǒng)攪拌葉污染培養(yǎng)液的隱患。

本項(xiàng)目涉及功能性醋酸菌/乳酸菌及其發(fā)酵調(diào)控技術(shù)，可用于果蔬飲品、酵素、新型調(diào)味品的發(fā)酵制造。水果、蔬菜等農(nóng)產(chǎn)品由于其保質(zhì)期短，運(yùn)輸成本高，較適宜于在原產(chǎn)地或產(chǎn)地附近進(jìn)行深加工，以延長(zhǎng)保質(zhì)期及產(chǎn)品附加值。發(fā)酵類果蔬飲品由于經(jīng)過(guò)微生物處理，在口味、質(zhì)地以及營(yíng)養(yǎng)成分等方面均得到了顯著改善，其中果蔬類益生菌類發(fā)酵飲品，更是得到關(guān)注健康的消費(fèi)人群的青睞。然而目前市場(chǎng)中的發(fā)酵果蔬汁類產(chǎn)品，魚(yú)龍混雜，很多產(chǎn)品存在發(fā)酵程度不高；高度依賴后調(diào)配；微生物混亂及發(fā)酵過(guò)程控制不科學(xué)；食品安全性不能得到保障等問(wèn)題。 針對(duì)這一類型的產(chǎn)品，本項(xiàng)目從發(fā)酵菌種、發(fā)酵工藝、功能成分分析以及產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化等方面系統(tǒng)的進(jìn)行了研發(fā)。 1）豐富的菌種：本課題組擁有近百株背景明確、安全可靠、發(fā)酵性能優(yōu)良 的微生物，形成了完備的釀造用菌種庫(kù)，包括乳酸菌、醋酸菌、酵母菌、米曲霉等。可以針對(duì)不同的發(fā)酵原料以及最終產(chǎn)品口感及質(zhì)構(gòu)的要求，選擇一種益生菌或復(fù)合發(fā)酵菌種，實(shí)現(xiàn)個(gè)性化的定制需求。 2）科學(xué)工藝：通過(guò)科學(xué)的發(fā)酵工藝及過(guò)程控制，實(shí)現(xiàn)了乳酸菌等微生物的高密度培養(yǎng)，活菌數(shù)可達(dá) 100 億/ml。大幅降低生產(chǎn)成本和周期，混菌發(fā)酵可由幾個(gè)月縮短至 10 天內(nèi)，乳酸菌發(fā)酵縮短至 24 小時(shí)內(nèi)。實(shí)現(xiàn)高效的物質(zhì)轉(zhuǎn)化，總酸可以達(dá)到 6%，提高產(chǎn)品品質(zhì)及生產(chǎn)穩(wěn)定性。 3）成分分析：建立了完備的發(fā)酵產(chǎn)品成分分析技術(shù)平臺(tái)。針對(duì)與產(chǎn)品風(fēng)味、以及腸道調(diào)節(jié)、增強(qiáng)免疫等健康功能緊密相關(guān)的有機(jī)酸、短鏈脂肪酸、多酚、多肽等功能成分進(jìn)行精確定量分析以及健康功能評(píng)價(jià)。 4）產(chǎn)品風(fēng)味: 本課題組研發(fā)的果蔬發(fā)酵產(chǎn)品口味濃郁、發(fā)酵特色明顯，無(wú)不良異味。避免了發(fā)酵后的過(guò)度調(diào)配及添加劑的使用，即可達(dá)到較優(yōu)的感官要求。符合健康、綠色的現(xiàn)代加工食品的需求。