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課題進展按計劃進行，完成了240株檢測范圍內(nèi)和檢測范圍外近緣菌株的收集；對29株軍團菌、17株鉤端螺旋體和32株克雷伯的靶基因序列破譯和序列分析；完成了探針篩選及終型芯片點制；進行了105份模擬樣品的檢測實驗；進行了芯片判讀系統(tǒng)Bactarray軟件的初步開發(fā)；初步建立了芯片生產(chǎn)質(zhì)量控制體系；課題組額外進行了嗜肺軍團菌3，6，13型的O抗原破譯，并完成了其序列分析；申請發(fā)明專利2項，發(fā)表SCI 論文2篇。

針對我國油田區(qū)域土壤不同濃度、不同原油物性、不同土壤環(huán)境的石油污染，開發(fā)物理化學—生物耦合技術以及微生物—植物聯(lián)合生態(tài)修復的分類集成技術，并建立相應的示范工程。在著重開展技術創(chuàng)新與集成的同時，嘗試建立油田區(qū)污染土壤的修復理論體系、技術規(guī)范和評價體系，建設油田區(qū)典型石油污染土壤生態(tài)修復集成技術的示范工程，同時為在我國大面積開展石油污染土壤修復工作建立一個具有國際先進水平和引領作用的技術研發(fā)平臺，為我國油田區(qū)污染土壤生態(tài)功能恢復和環(huán)境質(zhì)量改善提供技術支撐。 1、篩選出的高效石油降解菌與篩

羥喜樹堿 (10-Hydroxycamptothecin, HCPT) 是中國特有珙桐科旱蓮屬落葉植物喜樹( Camptotheca acuminata) 中含有的一種生物堿，在同類抗腫瘤單體中抗癌作用最強。HCPT 可以選擇抑制 DNA 拓撲異構酶 I 的活性，干擾拓撲異構酶催化的 DNA 切斷鏈接反應，使酶與 DNA 斷鏈復合物穩(wěn)定，并抑制切口處的重新接合，因此具有導致 DNA 斷鏈、干擾 DNA 復制的作用，即具有抗腫瘤的作用。臨床主要用于肝癌、頭頸部腫瘤、胃癌、膀胱癌及白血病。 但由于羥基喜樹堿特殊的理化性質(zhì)：水不溶，脂難溶，內(nèi)酯環(huán)結構不穩(wěn)定等因素，使得目前臨床應用 HCPT 的半衰期短，療效不夠理想。已上市使用的 HCPT 水針劑及粉針劑，均是將其在堿性 pH 下水解開環(huán)制備成鹽來增加其在水溶液中的溶解度。然而，喜樹堿類藥物的內(nèi)酯結構是它們作用于靶酶的必要結構，所以 HCPT 羧酸鹽型與內(nèi)酯型相比，活性顯著降低，毒性增大。另一方面，生物藥劑學研究表明，HCPT 半衰期短，作用維持時間較短，而增加劑量勢必會增加與劑量成正比的毒性反應。此外，與其他抗癌藥物相似，HCPT 對腫瘤細胞與正常細胞的殺傷力均很大，因此研制高效低毒的HCPT新型給藥系統(tǒng)具有重要的意義。 脂質(zhì)納米粒(Lipid nanoparticles ,LN)系指以天然或合成類脂如三酰甘油等為載體材料, 將藥物包裹或內(nèi)嵌于類脂核中, 制成粒徑約為50—1000nm 的膠粒給藥系統(tǒng)。除一般微粒載體的靶向特性外，LN還有其它特點：一是采用生理相容性好、毒性低的類脂材料為載體，其對人體的毒副作用很低；二是可采用已有成熟工藝的高壓均質(zhì)法進行工業(yè)化生產(chǎn)。LN 的水分散系統(tǒng)可以進行高壓滅菌，具有長期的物理化學穩(wěn)定性。因此，LN很適合作為抗癌藥物的靶向給藥載體。 本項目利用磷脂與羥喜樹堿有較好親和性、可形成復合物的性質(zhì)，以適量磷脂和大豆油為載體材料，制備載藥量高、穩(wěn)定性好的羥喜樹堿脂質(zhì)納米粒，希望通過納米粒的被動靶向性聚集于肝臟，提高對肝腫瘤的治療效果。目前已經(jīng)完成制備工藝、質(zhì)量標準、穩(wěn)定性研究、藥效學研究、非臨床藥代動力學和體內(nèi)分布研究和安全性評價，整理撰寫好申報資料，即將申報。 通過多批樣品放大試驗結果表明，羥喜樹堿脂質(zhì)納米粒的制備工藝簡便易行，在現(xiàn)有的脂肪乳生產(chǎn)線上再增加部分設備就完全可以生產(chǎn)出來。其生產(chǎn)成本遠遠低于脂質(zhì)體的制備。 動物藥效學實驗表明：注射用羥喜樹堿脂質(zhì)納米粒(0.3~3.0 mg/kg)具有劑量依賴性的抗腫瘤作用。在3.0 mg/kg相同劑量下，注射用羥喜樹堿脂質(zhì)納米粒的抗腫瘤作用明顯強于羥喜樹堿注射液（P < 0.01）；而1.0 mg/kg注射用羥喜樹堿脂質(zhì)納米粒組的抑瘤率與3.0 mg/kg羥喜樹堿注射液組沒有統(tǒng)計學差異（P >0.05）。同時，病理組織學檢查顯示，羥喜樹堿納米脂質(zhì)體組的腫瘤組織以中度壞死為主，其壞死率顯著大于羥喜樹堿注射液組。其結果提示，羥喜樹堿納米脂質(zhì)體的抗腫瘤活性較羥喜樹堿注射液有顯著提高。 靶向性試驗結果表明，與羥喜樹堿注射液比較，注射用羥喜樹堿脂質(zhì)納米粒對肝原位荷瘤裸鼠具有良好的肝靶向性和肝原位腫瘤靶向性。

基于肝細胞球技術的新一代生物人工肝支持系統(tǒng)SRBAL （Spheroids reservoir bioartificial liver）由美國Mayo Clinic醫(yī)學中心人工肝項目主任Scott L. Nyberg教授研發(fā)，目前處于Ⅰ期臨床試驗研究階段。Mayo Clinic是全球著名醫(yī)療機構，是美國排名第二的醫(yī)學中心，其消化科排名全美第一。Nyberg教授是Mayo Clinic血管外科中心主任，William J. von Liebeg移植中心外科學教授，肝臟疾病轉(zhuǎn)化醫(yī)學“Advanced Liver Diseases Study Group”計劃負責人之一，人工肝項目主任，從事生物人工肝（BAL）研究21年。Nyberg教授帶領的BAL研究團隊在Mayo Clinic完成了 HepatAssist BAL的Ⅲ期臨床試驗，同時開發(fā)了SRBAL系統(tǒng)，目前SRBAL系統(tǒng)因能容納超過400克的肝細胞，同時采用有利于肝細胞功能發(fā)揮的肝細胞球結構，其肝臟支持性能在文獻已報道的BAL系統(tǒng)中處于領先地位。同時Nyberg教授小組在全球首先培育并利用FAH-deficient豬作為生產(chǎn)人源性肝細胞的生物“工廠”，創(chuàng)造性的解決了各種肝細胞治療，包括BAL 系統(tǒng)所面臨的高活性人源化肝細胞來源問題。 ELAD(extraorporeal liver assistant device, ELAD) 體外肝臟支持系統(tǒng)是上世紀90年代，由Baylar設計, 美國Vital治療公司研制開發(fā)，運用HepG2-C3A 人肝癌細胞株,包括四個中空纖維透析生物反應器，每個反應器含有大約100g的肝癌細胞。ELAD系統(tǒng)已經(jīng)進入Ⅲ期臨床試驗多年，是目前最接近上市的生物人工肝支持系統(tǒng)。SRBAL系統(tǒng)采用和ELAD系統(tǒng)不同的細胞來源，培養(yǎng)方式和生物反應器形式，預期對ELAD系統(tǒng)肝臟支持功能有顯著改進。

用于耐藥性結核病的治療，為制備抗結核桿菌藥物提供了一個新 的選擇，解決了已有異煙肼衍生物不能有效抑制耐藥性結核桿菌、易 引起肝損傷等問題，該衍生物在抑制耐藥性結核桿菌活性方面高于異 煙肼，而且不易引起肝損傷。

本項目研發(fā)出防控土傳病害的全元生物有機肥系列產(chǎn)品以及配套施用技術，利用這些技術能有效控制土傳病害的發(fā)生，田間應用效果十分顯著，技術水平處于國際領先。 一、項目分類 顯著效益成果轉(zhuǎn)化 二、成果簡介 針對經(jīng)濟作物土傳病害已經(jīng)成為我國發(fā)展高效益農(nóng)業(yè)的瓶頸（由于我國經(jīng)濟作物的生產(chǎn)都是集約化生產(chǎn)模式，過量施用化學氮肥導致土壤酸化和養(yǎng)分不平衡，這給土傳病原菌創(chuàng)造了更有利的生長環(huán)境，使我國土傳病害發(fā)生比國際上更嚴重）問題，成果完成團隊長期從事高產(chǎn)和抑病型土壤微生物區(qū)系特征解析研究，并在此基礎上研發(fā)調(diào)控高產(chǎn)和抑病型土壤微生物區(qū)系的技術途徑，從理論到實踐，收到了很好的效果。在實踐上，研發(fā)出防控土傳病害的全元生物有機肥系列產(chǎn)品以及配套施用技術，利用這些技術能有效控制土傳病害的發(fā)生，田間應用效果十分顯著，技術水平處于國際領先。所研發(fā)的系列全元生物有機肥專利技術和產(chǎn)品已被全國20多家大型生物有機肥企業(yè)轉(zhuǎn)讓和轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生了顯著經(jīng)濟和社會效益。在學術上，揭示了經(jīng)濟作物抑病型土壤微生物群落中的關鍵微生物和核心微生物，及其種群間互作關系，在國際土壤微生物領域權威刊物上發(fā)表了大量研究論文，產(chǎn)生了較大的學術影響，吸引了眾多國際著名專家前來開展合作研究。

本發(fā)明公開了一種生物質(zhì)富氮熱解聯(lián)產(chǎn)含氮化學品與摻氮焦的系統(tǒng)，包括富氮熱解子系統(tǒng)、焦炭摻氮子系統(tǒng)、外源氮素引入子系統(tǒng)、富氮氣體冷凝子系統(tǒng)。富氮熱解子系統(tǒng)產(chǎn)生高溫煙氣，并促使生物質(zhì)與外源氮素發(fā)生反應；富氮氣體冷凝子系統(tǒng)將熱解氣體進行冷凝分離出富集含氮化學品的液體產(chǎn)物并進行存儲；焦炭摻氮子系統(tǒng)產(chǎn)生高溫氣化氣，并對焦炭進行深加工處理并存儲冷卻后的焦炭產(chǎn)品；外源氮素引入子系統(tǒng)向富氮熱解子系統(tǒng)和焦炭摻氮子系統(tǒng)提供外源氮素，并

1. 痛點問題 化學工業(yè)是我國國民經(jīng)濟的支柱產(chǎn)業(yè)，集中于生產(chǎn)基礎和大宗化工原料，而面向高端制造業(yè)和戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)的產(chǎn)品，其比重不足10%。化工產(chǎn)業(yè)正受到國外技術壁壘和國內(nèi)消費結構升級及生態(tài)環(huán)境保護要求提高的多重壓力，需要加快轉(zhuǎn)型升級，邁向高端化和綠色化。 針對傳統(tǒng)醫(yī)藥中間體、精細化工生產(chǎn)設備技術革新的研究方向，微反應器和微流控技術的研究和應用成為國內(nèi)外研究機構的研究熱點。微反應器和微流控技術自上世紀九十年代提出，就受到學術界和產(chǎn)業(yè)界的廣泛關注。微反應連續(xù)化生產(chǎn)技術是一項在新世紀中具有革命性的技術，是生物、化學、化工等交叉前沿的方向；2009年，25家國際著名跨國公司和研究機構將微化工技術列入化工產(chǎn)業(yè)發(fā)展新方向，聯(lián)合啟動了構建所謂靈活、快速、未來化工廠的“F3計劃”。醫(yī)藥中間體、精細化工產(chǎn)品由于產(chǎn)量小，目前普遍采用傳統(tǒng)的反應釜等設備，單批次生產(chǎn)，存在原料利用率低、污染排放量大,生產(chǎn)過程安全性較差，難以適應可持續(xù)發(fā)展的需要。解決醫(yī)藥中間體、精細化工生產(chǎn)的環(huán)保、安全、效率等問題，是目前廣大中小型生產(chǎn)企業(yè)實現(xiàn)跨越式發(fā)展的關鍵。 2. 解決方案 微反應器/微流控技術：以微結構元件為核心，在微米或亞毫米受限空間內(nèi)進行的流動、傳遞和反應過程，它通過減小體系的分散尺度強化混合、分散與傳遞，提高過程可控性和效率，以“數(shù)量放大”為基本準則，將實驗室成果可靠地運用于工業(yè)過程，實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。 目前，微反應器/微流控技術已經(jīng)從研究階段向工業(yè)化生產(chǎn)階段發(fā)展，相關技術及產(chǎn)品的應用正處于快速增長的階段，在生物醫(yī)藥、化妝品、環(huán)保等領域，都有著廣泛的應用需求。采用微反應器成套技術，在實現(xiàn)化學品生產(chǎn)的連續(xù)化同時，具有低能耗，高效率，低排放，高安全性等一系列優(yōu)勢。 1) 本項成果基于微化工技術，結合先進的生產(chǎn)裝備自動化技術，提供面向生物醫(yī)藥制造領域的綠色高效的微流控技術生產(chǎn)方案。 2) 同時，結合先進智能制造技術，可以構建全自動的集成化工藝平臺，實現(xiàn)智能化、綠色化的生產(chǎn)工藝及裝備的整體應用。

本發(fā)明（名稱為：一類噁唑并香豆素衍生物在農(nóng)藥方面的應用）涉及一類噁唑并香豆素衍生物及其制備方法，以及在抑菌、除草方面的用途。這類噁唑并香豆素衍生物均可通過4?甲基?6?氨基?7?羥基香豆素與不同羧酸縮合制備，這些化合物可作為殺菌劑防治番茄灰霉病菌、柑橘炭疽病菌、白菜黑斑病菌、小麥全蝕病菌、棉花枯萎病菌，也可作為除草劑防治雜草馬唐、灰藜。

針對我國油田區(qū)域土壤不同濃度、不同原油物性、不同土壤環(huán)境的石油污染，開發(fā)物理化學—生物耦合技術以及微生物—植物聯(lián)合生態(tài)修復的分類集成技術，并建立相應的示范工程。在著重開展技術創(chuàng)新與集成的同時，嘗試建立油田區(qū)污染土壤的修復理論體系、技術規(guī)范和評價體系，建設油田區(qū)典型石油污染土壤生態(tài)修復集成技術的示范工程，同時為在我國大面積開展石油污染土壤修復工作建立一個具有國際先進水平和引領作用的技術研發(fā)平臺，為我國油田區(qū)污染土壤生態(tài)功能恢復和環(huán)境質(zhì)量改善提供技術支撐。