糖代謝標(biāo)記中的副反應(yīng)
在利用疊氮非天然糖 Ac4ManNAz 對細(xì)胞進(jìn)行唾液酸化標(biāo)記時,質(zhì)譜數(shù)據(jù)中出現(xiàn)了胞質(zhì)蛋白。而正常情況下,胞質(zhì)蛋白是不具有唾液酸修飾的。為了解釋這一現(xiàn)象,利用基于位點的化學(xué)蛋白質(zhì)學(xué)技術(shù)手段鑒定到這些蛋白中的半胱氨酸殘基被非天然糖所修飾,并且產(chǎn)生了帶有不同乙酰基數(shù)目的修飾情況。為了進(jìn)一步排除這些修飾是通過代謝途徑產(chǎn)生的可能性,將全乙酰化的非天然糖直接與細(xì)胞裂解液或純蛋白孵育,也都能發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)上的半胱氨酸可以被修飾。
北京大學(xué)
2021-04-11