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墾大學(xué).jpg){kind=logo}
磁性殼聚糖復(fù)合微球制備固定化葡萄糖異構(gòu)酶的方法
一種磁性殼聚糖復(fù)合微球制備固定化葡萄糖異構(gòu)酶的方法,其特征在于：這種磁性殼聚糖復(fù)合微球制備固定化葡萄糖異構(gòu)酶的方法為：一、向0.4～0.6mol/L的FeCl230～100ml和FeCl350～100ml中,加入分子量為4000的聚乙二醇6.0～10.0g,在磁力攪拌器下充分溶解,再用氨水調(diào)節(jié)溶液至pH8～10,繼續(xù)攪拌30min～50min,用重蒸水洗滌抽濾后真空冷凍干燥即得Fe3O4磁核；二、將殼聚糖粉末在3％～6％乙酸中超聲分散10min,制0.02～0.08g/ml殼聚糖溶液,通過(guò)乳化劑與Fe3O4磁核超聲分散并電動(dòng)攪拌10min進(jìn)行混合,使之形成微乳體系,并與1％～5％戊二醛交聯(lián)在2000r/min下繼續(xù)攪拌2～4h,然后用石油醚、丙酮和重蒸水洗滌,抽濾真空冷凍干燥后即得磁性殼聚糖復(fù)合微球；三、將制備好的磁性殼聚糖復(fù)合微球先用磷酸緩沖液pH7.0～7.8浸泡,抽濾后加入用緩沖液稀釋后的濃度為4mg/ml～16mg/ml的葡萄糖異構(gòu)酶15～20ml,在室溫?fù)u床上振蕩4～10h,取出放入4℃靜置過(guò)夜,傾出上清液,沉淀用蒸餾水洗滌再用上述磷酸緩沖液洗滌,直至洗滌液檢測(cè)不到戊二醛和游離酶,無(wú)紫外吸收,抽濾得固定化葡萄糖異構(gòu)酶
黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
2021-05-04
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重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應(yīng)用
本發(fā)明涉及重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應(yīng)用。獲得重組野生型 cC 的方法是：利用 pGAPZ α A 載體構(gòu)建野生型 cC 的表達(dá)系統(tǒng)；重組野生型 cC 在畢赤酵母 X-33 中表達(dá)；重組野生型 cC 的分離純化。對(duì)重組野生型 cC 對(duì)鰱魚魚糜凝膠劣化抑制作用的檢測(cè)方法是：魚糜樣品的制作；對(duì)所取魚糜樣品進(jìn)行溫浴處理，加重組野生型 cC 和未加 cC 成為對(duì)照組；處理樣品進(jìn)行 SDS-PAGE ，觀察結(jié)果。本發(fā)明驗(yàn)證了重組野生型 cC 可以直接加入魚糜制品中，能明顯抑制魚糜制品的凝膠劣化，在加工過(guò)程中能較好的保持其彈性，且其安全、無(wú)毒，有著良好的應(yīng)用前景
遼寧大學(xué)
2021-04-11
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?酶催化可控釋放一氧化氮生物材料制備方法
該材料具有良好的加工性，能制備成可注射溶液、薄膜、多孔支架、以及靜電紡絲纖維膜等多種產(chǎn)品。由于一氧化氮能夠可控按需釋放，CS-NO及其復(fù)合材料可用于治療糖尿病下肢缺血、皮膚損傷和心梗疾病。
南開大學(xué)
2021-04-10
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南極假絲酵母脂肪酶Ｂ基因及其在酵母展示中的應(yīng)用
該專利首次利用畢赤酵母細(xì)胞展示技術(shù)，通過(guò)酵母細(xì)胞壁蛋白融合表達(dá)的方法，實(shí)現(xiàn)了脂肪酶分子的細(xì)胞自固定化，有效地解決了脂肪酶進(jìn)一步加工與應(yīng)用過(guò)程的穩(wěn)定性；利用酵母細(xì)胞展示的一步酶固定化技術(shù)，減少了傳統(tǒng)固定化酶方法的酶分離純化的步驟和損失，解決了酶在使用過(guò)程的回收及反復(fù)使用的問題；將細(xì)胞展示脂肪酶的產(chǎn)酶水平進(jìn)一步提高達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平，為脂肪酶的在食品、飼料等領(lǐng)域的高效應(yīng)用提供了保證；參評(píng)專利在芳香酯生產(chǎn)、白酒釀造及脂酶復(fù)合飼料酶制劑生產(chǎn)等領(lǐng)域?qū)嵤?yīng)用，有效推動(dòng)了行業(yè)技術(shù)進(jìn)步和應(yīng)用企業(yè)產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)外的競(jìng)爭(zhēng)力，近3年相關(guān)產(chǎn)品新增總銷售額7.29億元，實(shí)現(xiàn)利稅1.34億元。獲得了第十九屆中國(guó)專利獎(jiǎng)。
華南理工大學(xué)
2021-04-10
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無(wú)酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器及其檢測(cè)方法
本發(fā)明公開了一種無(wú)酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器及其檢測(cè)方法，該無(wú)酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器包括由參比電極、對(duì)電極和工作電極組成的三電極體系，所述工作電極由對(duì)葡萄糖具有電催化氧化性能的材料制成；使用該無(wú)酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器檢測(cè)葡萄糖的方法，包括如下步驟：(1)電化學(xué)預(yù)處理工作電極：施加高負(fù)電位；(2)電化學(xué)氧化葡萄糖：施加葡萄糖氧化所需電位；(3)電化學(xué)清洗工作電極：施加正電位。本發(fā)明可去除樣品pH對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，使原本需要在堿性條件下進(jìn)行無(wú)酶的葡萄糖檢測(cè)，可在中性及酸性樣品中的進(jìn)行，并且具有電極穩(wěn)定性好、靈敏度高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，具有非常廣闊的應(yīng)用前景。
東南大學(xué)
2021-04-11
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關(guān)于軍團(tuán)菌來(lái)源的新型O-糖基轉(zhuǎn)移酶機(jī)理
糖基化修飾是一種廣泛存在且重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，由糖基轉(zhuǎn)移酶催化形成。抗體、疫苗等許多臨床治療性蛋白質(zhì)都具有特異性糖基化修飾，且對(duì)蛋白活性至關(guān)重要。基于糖基轉(zhuǎn)移酶的化學(xué)酶法合成方法，是獲得均一糖蛋白的有效手段之一。因此，找尋性質(zhì)優(yōu)良的各種糖基轉(zhuǎn)移酶十分關(guān)鍵。對(duì)比真核細(xì)胞，細(xì)菌來(lái)源的糖基轉(zhuǎn)移酶具有易表達(dá)純化和催化產(chǎn)率高等優(yōu)良性質(zhì)，常被改造為人工合成糖蛋白的工具酶。然而，蛋白O-連接糖基化修飾在原核生物與真核生物之間并不保守，這成為了利用細(xì)菌糖基化系統(tǒng)生產(chǎn)真核生物O-糖蛋白的一大瓶頸。為了解決這個(gè)問題，陳興教授課題組對(duì)病原菌-宿主相互作用中的蛋白質(zhì)糖基化進(jìn)行了探索。 某些病原菌入侵宿主細(xì)胞后，會(huì)分泌具有糖基轉(zhuǎn)移酶活性的效應(yīng)蛋白。這些效應(yīng)蛋白往往利用宿主的糖供體，并且修飾宿主的靶蛋白。因此，對(duì)這類糖基轉(zhuǎn)移酶的工程化，可為實(shí)現(xiàn)真核生物O-糖蛋白的合成提供新的有效策略。嗜肺軍團(tuán)菌效應(yīng)蛋白SetA具有O-葡萄糖轉(zhuǎn)移酶活性，然而其底物蛋白尚未被鑒定。 本研究首先開發(fā)了能夠?qū)崿F(xiàn)特異性標(biāo)記和選擇性富集的化學(xué)酶法策略。他們?cè)O(shè)計(jì)被SetA利用的生物正交基團(tuán)修飾的糖供體（尿苷二磷酸-6-疊氮-葡萄糖，UDP-6AzGlc），將疊氮葡萄糖6AzGlc轉(zhuǎn)移至底物蛋白。通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，與可切割生物素探針連接，實(shí)現(xiàn)對(duì)底物蛋白的選擇性富集和位點(diǎn)特異性質(zhì)譜鑒定(下圖)。質(zhì)譜分析鑒定到分布于276個(gè)蛋白的317個(gè)O-glucose修飾位點(diǎn)。天然糖供體標(biāo)記及軍團(tuán)菌侵染實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證了SetA可以修飾眾多的底物蛋白。
北京大學(xué)
2021-04-11
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一種產(chǎn)角蛋白酶的粘金黃桿菌及其分離方法
本發(fā)明公開了一種產(chǎn)角蛋白酶的粘金黃桿菌及其分離方法。所述粘金黃桿菌拉丁名為Chryseobac？terium？L99，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC？No.2295。本發(fā)明公開了該菌的形態(tài)學(xué)特征為：菌體桿狀，不產(chǎn)孢子，無(wú)運(yùn)動(dòng)性，革蘭氏染色呈陰性。本發(fā)明公開了該菌的全細(xì)胞脂肪酸主要成份為：十三甲基十四酸47.59％，二羥基-13-甲基十四酸和(或)Ω-7-順式-13甲基-十五酸15.72％，三羥基-15-甲基十六酸13.91％，Ω-9-順式-14甲基棕櫚酸9.48％。本發(fā)明還公開了該菌的16S核糖體DNA(16S？rDNA)全序列。本發(fā)明公開的分離方法包括三個(gè)步驟：普通營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基富集培養(yǎng)，以角蛋白為唯一碳氮源固體培養(yǎng)基初篩，以角蛋白為唯一碳氮源液體培養(yǎng)基的復(fù)篩。該方法快捷有效，所得菌種產(chǎn)酶能力強(qiáng)。
浙江大學(xué)
2021-04-13
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尿激酶、激肽釋放酶、抑肽酶和高純度尿多酸肽聯(lián)產(chǎn)工藝
本項(xiàng)目的特點(diǎn)是尿綜合利用聯(lián)產(chǎn)工藝，可將尿激酶、激肽釋放酶，抑肽酶和高純度尿多酸肽四種成分分別提取分離出來(lái)，能大大降低成本。高純度高分子尿激酶新工藝曾與中國(guó)藥品檢定所共同舉辦了學(xué)習(xí)班，轉(zhuǎn)讓給了四家藥廠還承擔(dān)制作了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品和亞太地區(qū)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品，MW54，000達(dá)100%，而英國(guó)制作的樣品只有60%。尿多酸肽是國(guó)際上唯一的尿制劑抗癌藥物，但含75%尿素、銨鹽、類黑精、雜醇油等大量雜質(zhì)，副作用大，穩(wěn)定性差。本工藝排雜徹底，提取分離純化手段先進(jìn)，成本低，收率高，純度高，活性高，無(wú)副作用。
北京航空航天大學(xué)
2021-04-13
業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
一種酶解短直鏈淀粉中溫自組裝制備納米淀粉工藝
本發(fā)明公開了一種酶解短直鏈淀粉中溫自組裝制備納米淀粉工藝，其特征在于，具體包括如下步驟：(1)配制緩沖溶液；(2)淀粉水溶液的制備；(3)糊化；(4)酶解，接著將脫脂后的淀粉溶液用無(wú)水乙醇沉淀；(5)制短直鏈淀粉；(6)制納米淀粉。通過(guò)采用酶水解淀粉在30?70℃回生制備納米淀粉，此方法制備的納米淀粉產(chǎn)率高，成本低，方法更加安全環(huán)保，用其作為藥物、活性成分等的包埋材料。講拓寬其在食品工業(yè)中的應(yīng)用領(lǐng)域。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-13
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蛋黃殼結(jié)構(gòu)的鈷基納米酶及其在汞離子檢測(cè)中的應(yīng)用
本發(fā)明屬于污染物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種蛋黃殼結(jié)構(gòu)的鈷基納米酶及其在汞離子檢測(cè)中的應(yīng)用。將六水合硝酸鈷和十六烷基三甲基溴化銨加入水中并混合均勻；與2?甲基咪唑溶液混合攪拌反應(yīng)，制得ZIF?67立方體。加入乙醇中并混合均勻，與多元含氧酸的水溶液混合均勻，然后進(jìn)行攪拌反應(yīng)，制得ZIF?67/PTA。加入乙醇溶液中并混合均勻，隨后加入氯金酸溶液和硼氫化鈉溶液，然后進(jìn)行攪拌反應(yīng)，制得ZIF?67/PTA/Au。本發(fā)明所合成的材料具有蛋黃殼納米立方體的介孔結(jié)構(gòu)，原材料價(jià)格廉價(jià)，性能穩(wěn)定，適合大批量合成。可實(shí)現(xiàn)對(duì)Hg²?的可視化檢測(cè)。
南京工業(yè)大學(xué)
2021-01-12