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結(jié)核分枝桿菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的構(gòu)建.表達(dá)和純化方法及其應(yīng)用
2021-01-12 00:00:00
云上高博會(huì)
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關(guān)鍵詞：
結(jié)核分枝桿菌
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項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:
本發(fā)明選擇結(jié)核桿菌生長期和休眠期主要的保護(hù)性抗原Mtb10.4 和Hsp16.3，構(gòu)建融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3（MH）。在大腸桿菌中表 達(dá)純化該蛋白，將該蛋白和佐劑混合構(gòu)建亞單位疫苗，分別于BCG初 免后12、14周加強(qiáng)免疫C57BL/6小鼠兩次，最后一次免疫6周后檢測(cè)細(xì) 胞免疫反應(yīng)，最后一次免疫后10周進(jìn)行結(jié)核菌毒株H37Rv攻擊。結(jié)果： 該融合蛋白能在大腸桿菌中穩(wěn)定大量表達(dá)，經(jīng)離子交換層析、凝膠過 濾層析和疏水層析三步純化得到純度較高的蛋白；構(gòu)建的亞單位疫苗 免疫動(dòng)物可產(chǎn)生
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